中国人脂联素基因rs2241766单核苷酸多态性与高血压相关性研究的Meta分析

李 浪 车 艳 李秀秀 郭小华 阎 岩

高血压是常见的慢性病，是以动脉血压持续升高为特征的“心血管综合征”，是我国心脑血管病最主要的危险因素，在我国人群脑卒中及冠心病发生乃至死亡中扮演着重要的角色[1]。高血压的病因尚不明确，基因与环境因素以及两者之间的相互作用在高血压的发生发展中起到了重要的作用，其中基因多态性与高血压易感性的相关性也引起了极大的关注[2-3]

脂联素(ADIP0Q)是由脂肪细胞分泌的特异性激素蛋白，是人体的一种保护因子，在抗动脉粥样硬化、胰岛素抵抗和抗炎等过程中起着极其重要的作用[4]。脂联素基因(OMIM:605441, GeneID:9370)位于人类3q27，DNA全长约为16kb(GeneBank 登录号: NT-005612)，包含3个外显子和2个内含子。脂联素基因有多个单核苷酸突变位点，rs2241766是位于外显子2(+45T/G)上面的突变。

有研究显示，脂联素浓度在糖尿病、冠心病和代谢综合征等胰岛素抵抗相关性疾病中降低，而脂联素浓度的降低与脂联素基因的单核苷酸多态性rs2241766有相关性，然而结果尚存争议[5-6]。因此，我们进行Meta分析旨在为我国人群脂联素基因rs2241766单核苷酸多态性与高血压易感性相关性提供循证医学证据。

资料与方法

1.研究对象 通过收集公开发表的有关中国人脂联素基因rs2241766基因多态性与高血压相关性的病例对照实验作为研究文献，以其中的收缩压≥140mmHg(1mmHg=0.133kPa)或舒张压≥90mmHg为高血压研究病例，以健康体检者作为对照组，通过分子生物学方法检测研究病例和对照人群中脂联素基因rs2 241 766位点等位基因及基因型的分布频率，研究脂联素基因rs2241766基因多态性与高血压的相关性。

2. 资料来源 以脂联素基因、基因多态性和高血压为主题词，计算机检索2016年4月以前,中国知网、万方数据库、维普信息资源系统获得全部中文文献，同时检索同期Medline在外文期刊发表的中国人资料。

制定的检索式如下：中文数据库：“‘脂联素’或‘脂联素基因’”和“‘基因多态性’或‘多态性’或‘单核苷酸多态性’或‘突变’”和“‘高血压’或‘高血压性心脏病’”；英文数据库： “‘ADIP0Q’ OR ‘APM’” AND “‘polymorphism’ OR ‘polymorphisms’ OR ‘variant’ OR ‘mutant’” AND “hypertension‘’ OR ‘high blood pressure’”

3. 纳入、排除标准及研究质量控制 由1名心内科医师和1名医学统计工作者共同对获得的文献进行质量评价：① 研究对象均为中国人，民族不限；② 均为独立的研究，同一组资料重复报道者，取其资料最完整的文献；③ 各文献研究方法、诊断标准以及对照组人群的选择标准相似；④ 检验对照组人群是否符合H-W遗传平衡定律(Hardy-Weinberg equilibrium，HWE)。使用the Newcastle-Ottawa quality assessment scale对纳入文献进行评分。

4. 研究资料的获得 符合要求的文献，每篇文献数据收集由两位研究者分别独立完成。数据提取过程中若有争议，参照原文讨论后取得一致。

5. 统计学分析处理 ① 对所选择的研究基因型分布进行H-W遗传平衡检验，要求符合遗传平衡规律；② 应用漏斗图分析纳入文献是否存在明显的偏倚；③ 对各研究的结果进行异质性检验、OR值及其95%CI；④对各研究的结果进行异质性检验，并根据检验结果选用相应的数据合并方法，若各研究间无显著异质性(I2小于或等于50)，则采用固定效应模型进行数据合并，若结果间存在显著异质性(I2>50)，则采用校正后的随机效应模型法(D-L法)进行数据合并，计算总OR值。采用Meta分析软件包Review Manager 5.3进行数据统计与分析，采用双侧检验，显著性水准为0.05。

结 果

1. 检索及筛选结果 通过中英文数据库检索共获得符合纳入标准的文献8篇(图1)[5-12]。来自8篇文献的10个研究包含的总病例数为1 907例，总对照组为2 263例，纳入文献的基本信息见表1。综述、研究数据不全，同一地区以资料和研究细节交代不完整者不得纳入本次研究。对照组人群基因型分布的Hardy-Weinberg平衡检验结果见表1。

图1 文献筛选流程图

2.纳入研究的基本特征 纳入研究的基本特征见表1。

3.入选文献的质量评估 所有纳入文献均为病例对照研究；病例组高血压诊断以收缩压≥140mmHg或舒张压≥90mmHg，以健康体检者作为对照组。根据the Newcastle-Ottawa quality assess ment scale对纳入文献进行评分，评分结果见表1。

文献基本资料情况见表1。

表1 入选文献一般情况及rs2241766等位基因频率与基因型分布特点

注：GH=gestational hypertension; PE=pre-eclampsia; HT=hypertension;DM=type 2 diabetes; Mets=metabolic syndrome HDW(p值)为对照组哈迪温伯格平衡检测值

4.入选文献的异质性评估 对于rs2 241 766位点而言，其隐形基因模型(GG VS GT+TT)存在异质性,其他四种基因模型不存在异质性。漏斗图显示无明显发表偏移(图2)。

图2 脂联素基因rs2241766基因多态性 与高血压相关性入选研究漏斗图

5. Meta分析结果 共有10个研究探讨了rs2241766基因多态性和高血压之间的关联性，包括1907例高血压患者和2 263例对照正常人群。图3显示等位基因模型(G VS T)合并后的总 (OR=1.13, 95%CI:1.03,1.24,P=0.01)；图4共显性基因模型(GG VS TT)合并后的总 (OR=1.33, 95%CI:1.08,1.65，P=0.008)，表明rs2241766基因多态性和高血压之间的关联性显著。

由表2可知，隐形基因模型(GG VS GT+TT)存在高度异质性，行敏感性分析后发现异质性仍得不到改善，故行亚组分析探讨异质性来源。图5为按照有无合并症行亚组分析的Meta分析森林图，由图可知，无合并症亚组内仍存在高度异质性，故还需要在无合并症亚组内再行亚组分析探究该亚组内异质性来源。

通过阅读原文献，我们发现Leu等[12]和Jeng等[5]这两篇文献的实验组的BMI数值在25～26之间，将这两篇文献独立于无合并症亚组时，无合并症亚组内异质性得到显著降低，如图6所示。因此无合并症亚组内高度异质性来源于此两篇文献。

由于对无合并症亚组中进行文献分析时，我们发现剔除BMI指数位于25～26之间的两篇文献后异质性得到显著改善，所以，我们将BMI指数作为分组因素对全部文献进行亚组分析，如图7所示，

图3 脂联素基因rs2 241 766位点等位基因模型(G VS T)Meta分析森林图

图4 脂联素基因rs2 241 766位点共显性基因模型(GG VS TT)Meta分析森林图

图5 脂联素基因rs2 241 766位点隐性基因模型(GG VS GT+TT)亚组Meta分析森林图

图6 脂联素基因rs2 241 766位点隐性基因模型(GG VS GT+TT)无合并症亚组Meta分析森林图

图7 脂联素基因rs2 241 766位点隐性基因模型(GG VS GT+TT)BMI指数亚组Meta分析森林图

我们发现，对于正常者和肥胖者人群，其罹患高血压的风险增加。

讨 论

在我们的Meta分析结果中，脂联素基因rs2241766与高血压易感性存在相关性。在等位基因模型(G VS T)中，等位基因G相对于等位基因T可增加13%的机率罹患高血压。而在共显性基因模型中(GG VS TT)中，与基因型TT的患者相比，基因型GG可增加33%的机率罹患高血压。对于隐性基因模型(GG VS GT+TT)而言，高度的异质性存在于纳入文献中。通过对原始文献深入分析，我们发现在无合并症的亚组内，剔除实验组BMI指数在25至26区间内的2篇文献后，无合并症亚组内的异质性得到显著降低，并且GG基因型相对于GT+TT基因型患者而言，可增加68%的机率罹患高血压。为此，我们将BMI指数作为分组因素对纳入的全部文献进行亚组分析，我们发现，在正常者中携带GG基因型的人群可以增加173%的机率罹患高血压，而在肥胖者携带GG基因型的人群中可增加66%的机率罹患高血压，看似BMI指数的增加可以在某种程度上降低携带GG基因人群罹患高血压的风险，但是由于我们纳入的文献过少，BMI指数与脂联素rs2241766多态性和高血压相关性之间的关系需要更多的研究，我们关于BMI指数部分的结果需要谨慎对待。漏斗图提示，本篇Meta分析纳入文献内不存在偏移，Meta分析结果稳定。

脂联素rs2241766与高血压易感性的关系在Xi等[13]的文章中也讨论过，在他的文章中，脂联素rs2241766与高血压易感性不存在相关性。但是，脂联素基因rs2241766与肥胖、冠心病和2型糖尿病均存在相关性[14-15]。在高血压患者的血浆中，脂联素的浓度是降低的，并且低浓度的脂联素浓度可能与脂联素基因的单核苷酸多态性相关[16-17]。与此同时，在芬兰人群中，高密度脂蛋白的浓度在脂联素基因rs2241766的TT基因型患者中是上升的[18]，这也从侧面支持GG基因型患者可能有更高的罹患高血压疾病的机率。在日本人群中，脂联素rs2241766基因多态性与低血浆脂联素浓度相关，并且有着较其它类型的单核苷酸多态性更好的罹患高血压的概率[19]。我们推测，脂联素基因rs2241766的突变存在于外显子，该处发生突变可能影响脂联素基因的表达，从而使血浆中脂联素浓度降低，增加罹患高血压的概率。尽管我们得到了有意义的结果，但是更多的关于脂联素基因rs2241766与血浆低浓度脂联素和高血压易感性相关性的研究需要进行以得到更加准确的结果。

我们的这篇Meta分析也存在一些缺点。第一，基因与基因和基因与环境之间的互相作用关系没有在我们这篇文章中讨论；第二，我们只是在我国人群中分析，没有考虑到人种的影响；第三，我国是个幅员辽阔的国家，纳入的文献大多来自汉族人群，更多的关于其它民族的研究需要进行。

综上所述，脂联素基因rs2241766与高血压易感性存在相关性，rs2241766可增加罹患高血压的风险。