进口和国产激素处理杜泊羊的发情和超排效果比较

2018-10-30田秀娥王永军付明哲赵彦儒崔瑞贤

家畜生态学报 2018年10期

田秀娥，王永军*，付明哲，赵彦儒，崔瑞贤

(1.西北农林科技大学动物科技学院，陕西杨凌 712100；2.宁波市三生药业有限公司，浙江宁波 315000；3.庆阳市肉羊工程技术研发中心，甘肃庆阳 745204 )

胚胎移植是良种家畜快速扩繁常用的技术手段。供体同期发情与超数排卵是胚胎移植的一个重要环节。超排效果好则可望得更多的卵子或胚胎，对充分发挥优秀母畜的繁殖潜力和提高胚胎移植效率具有十分重要的现实意义。虽然该项技术的试验与研究已有几十年的历史，但仍然存在超排效果波动较大，影响因素较多的问题[1]。如供体年龄、重复超排次数[2]、供体发情周期的阶段、产后时间长短、卵巢功能、季节[3]、激素种类与用量[4]、激素来源与卵巢状态[5-8]等。其研究结果表明上述因素均会不同程度地影响羊同期发情、超数排卵及胚胎移植效果。关于激素来源，一些研究人员采用进口激素进行超排处理，如苗玉青等[9]2004年比较了来自日本、加拿大、中国科学院动物研究所和宁波三生药业生产的促卵泡激素(Follicle stimulating hormone,FSH)对杜泊羊超排效果，发现宁波生产的FSH效果最好。这些研究结果表明不同来源的激素超数排卵效果存在差异。随着近年来胚胎移植在生产实践中的大面积推广和应用，在超排过程中对进口激素的用量也越来越大，而其价格逐年上涨，导致胚胎移植的成本进一步增加。为了在不影响超排效果的前提下降低胚胎移植的成本，在羊胚胎移植超排时研究用国产激素取代进口激素显得尤为重要。本试验旨在以杜泊羊为研究对象，分别用国产和进口产品对其进行同期发情和超数排卵处理，通过比较分析使用不同产品后的发情和超排效果以及经济性，解决绵羊胚胎移植推广应用过程中如何选择性价比较高的产品问题，为以后羊养殖企业在实施超数排卵选择激素时提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验羊的选择与饲养管理

在甘肃某种羊场选择中等体况、年龄和胎次一致的(均为2胎)健康杜泊绵羊18只作为试验用供体，试验羊采用常规饲养管理，自由饮水。

1.2 试验羊分组与处理程序

将选择的试验用供体羊随机分为试验组和对照组，分别用国产和进口产品进行同期发情和超排处理，具体处理方案为：任意一天(记做D1)，两组羊分别肌注氯前列醇钠，D7分别放置进口和国产阴道栓，从D16开始连续4 d，每天注射2次，两组羊分别按照减量法肌肉注射进口和国产FSH(进口组第1次注射时需要换栓)，其总剂量分别为每只供体羊200 mg(10mL)和300单位，D19第7次超排注射的同时取栓，随后观察24 h内供体的发情情况，24 h内发情都视为超排处理有效。当供体发情后每隔8 h配种一次直至发情结束，D24供体羊术前饥饿，D25手术冲胚并记录每只供体卵巢上的黄体情况以及回收卵子或胚胎情况。本次试验所采用的程序及两种产品的剂量均为前期相关试验优化筛选而出。

1.3 材料

进口FSH：FOLLTROPIN-V(贝尔尼奇公司，400mg/瓶)；国产FSH(宁波三生药业有限公司，批号：B161005，500单位/瓶);进口孕激素阴道栓(Controlled internal drug release,CIDR)(贝尔尼奇公司，1.56 g孕酮/支);国产孕激素阴道栓(CIDR)(宁波三生药业有限公司，0.3 g孕酮/支);氯前列醇钠注射液，宁波三生药业有限公司，2 mL/支(批号：S161007)。

1.4 数据处理

分析统计超排处理有效率、回收率、羊均回收胚胎和卵子数、羊均回收胚胎数、羊均可利用胚胎数、胚胎利用率等指标。试验所获数据均采用独立样本t检验法分析。平均数以“均值±标准差”表示，P>0.05表示差异不显著，P<0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 不同来源激素处理对杜泊羊同期发情效果的影响

两组羊分别用不同来源激素处理后其发情情况见表1。经试情观察发现两组羊均于取栓后72 h内全部发情，也就是说72 h内的同期发情率均为100%。然而由于这些羊均在同期发情处理的同时进行超数排卵处理，一般认为24 h内发情羊为超排处理有效，即超排有效，故试验只统计了取栓后24 h供体的发情情况，超过24 h发情的供体羊进入正常配种。由表1知，两个不同处理间超排处理有效率很接近，试验组高于对照组11.11个百分点，而统计上未达到显著水平(P>0.05)。即便如此，此结果在相当程度上说明国产产品对杜泊羊的发情及超排反应效果良好。

2.2 不同来源激素处理杜泊羊超排和胚胎回收的影响

不同来源激素处理后杜泊羊超排和胚胎回收情况见表2、表3。供体发情只表明其有排卵，但具体排卵数的多少则需通过手术的方法直观观察其卵巢上的黄体数量、颜色及大小。由表2数据可知杜泊羊对照组和试验组羊均黄体数分别为10.63个、14.11个(P<0.05)，国产激素处理组显著高于进口激素处理组；由于对照组有一只羊黄体数较少，其实际超排反应率较试验组低12.5个百分点。表明经激素处理后凡是发情的绵羊其超排效率均为国产产品显著优于进口产品。

由表3可知，杜泊绵羊对照组和试验组平均回收数、平均回收胚胎数、平均可用胚胎数以及胚胎可利用率分别为9.29 vs 10.56、8.83 vs 10.11、7.43 vs 9.78、98.11 vs 96.70，各指标均为国产组高于进口组，但差异均未达显著水平(P>0.05)。进一步分析表3数据还可以发现，两组羊均不同程度出现未受精卵，占比9.4%～15.62%，提示在开展胚胎移植工作时应高度重视发情供体的配种工作，采取各种措施提高供体母羊受配率以减少不必要的损失。

表1 不同来源激素处理对杜泊羊发情效果的影响Table 1 Effects of different treatment on estrus effect of dorper sheep

表2 不同处理方案对杜泊绵羊超数排卵效果影响Table 2 Effects of different treatments on superovulation of Dorper sheep

注：对照组中一只供体因只有2枚黄体，未回收胚胎。

Notes:In the control group, the embryos of a donor was not recovered because only two yellow bodies were observed.

表3 两组羊胚胎回收及利用情况Table 3 Recovery and utilization of embryos with two groups

注：对照组有一只羊因生殖器官异常，未回收到胚胎。

Notes:One sheep in control group had abnormal reproductive organs,so no embryos are recovered.

2.3 不同处理方案费用

本试验研究中所采用的不同产品的费用情况见表4。从表4可知，在其他产品种类与数量一致的情况下，采用国产产品羊均总费用较进口产品便宜235元，性价比较高。

表4 不同来源产品费用Table 4 Cost of products with different sources

注：表中仅列出两处理组不同产品的费用，其他所用相同产品未列入。

Notes:Cost of different products of two treatments are listed in the
Table, other similar products are not listed.

3 讨论

FSH即卵泡刺激素，是由动物脑垂体前叶嗜碱性细胞合成与分泌的一种糖蛋白激素。该激素是由α亚基和β亚基以非共价健结合组成的异二聚体，对雌性动物来说，其主要功能是促进卵巢卵泡生长、卵泡颗粒细胞的增生以及雌激素的合成与分泌[10]。基于此，目前国内外研究人员对FSH进行了大量的研究。在畜牧业生产中，FSH已广泛应用于羊、牛等动物的超数排卵、同期发情以及胚胎移植等领域。为了提高其在这些领域的应用效果，许多研究人员对不同来源的FSH对绵羊的超排效果进行了研究。如张帆[5]用宁波产FSH对杜泊羊超排，结果每只获可用胚胎7.8枚，高于魏建英等[6]羊均获可用胚胎5.16枚的结果；李爱朵[8]用宁波产FSH对119只萨福克羊进行超排处理，结果平均每只供体羊获胚胎10.18枚。易金云等[11]用10只杜泊绵羊进行超排试验结果发现其平均可用胚为11.3枚。与本试验相比，这些研究结果超排结果不一，其原因可能与使用剂量、羊的年龄以及超排季节有关。

也有研究人员比较研究了进口和国产激素对绵羊的超排效果，唐大伟等[12]2005年的研究结果表明，中科院产FSH对绵羊的超排效果好于加拿大产品，平均黄体数分别为7.2、5.0个，平均回收胚胎数分别为6.7、4.71枚，平均可用胚胎数分别为5.02、3.19枚，其研究结果均说明国产激素对绵羊品种有较好的超排效果，与本试验的研究结果一致。

用于超排的FSH均是从家畜脑垂体中提取的。商品FSH制剂中都含一定量的LH，不同厂家、同一厂家不同批次的FSH制剂中LH含量差异较大，导致FSH制剂的超排效果不稳定，国内外许多报道已证明了这一点[1]。上述研究结果表明，不论是进口的还是国产的激素，只要其效价稳定，在适宜的剂量下，均可产生较好的超排效果。因此在生产中选择激素产品时应综合考虑产品的效果和价格，理性选择性价比高的产品。