岩鹿乳康胶囊对乳腺增生大鼠血清雌孕激素的影响

2018-10-21郭宇飞王书勤赵素贞周海军

世界中医药 2018年6期

郭宇飞王书勤赵素贞周海军

摘要目的：探讨岩鹿乳康胶囊对成年雌性乳腺增生大鼠血清雌激素、孕激素水平的影响。方法：选取Wister大鼠60只，将其随机分为6组：空白组、疾病模型组、去卵巢组、三苯氧胺组、乳癖消组、岩鹿乳康胶囊组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大鼠血清中雌二醇（E2）和孕酮（P）水平。结果：与乳癖消组以及疾病模型组比较，岩鹿乳康组血液中E2的水平均显著降低（P<0.05），P水平明显升高（P<0.05）；与三苯氧胺组比较，岩鹿乳康组血液中E2和P水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论：岩鹿乳康胶囊能显著降低血中雌激素以及升高孕激素水平。

关键词岩鹿乳康胶囊；大鼠；乳腺增生；雌激素；孕激素

AbstractObjective：TostudytheeffectsofYanluRukangCapsuleonestrogenandprogesteroneinserumofratswithhyperplasiaofmammaryglands.Methods：All60Wisterratswererandomlydividedintosixgroups：blankcontrolgroup，tamoxifengroup，YanluRukanggroup，Rupixiaogroup，diseasemodelgroup，ovariectomizedgroup.Then，thecontentofestradiol（E2）andprogesterone（P）inserumofratsweredetectedbyELISAmethods.Results：ComparedwithRupixiaogroupandmodelgroup，thecontentofE2inbloodintheYanluRukanggroupwassignificantlydecreased，andthecontentofPwassignificantlyhigher（P<0.01）；Comparedwithtamoxifengroup，thecontentofE2andPinthebloodintheYanluRukanggroupdidnotsignificantlychanged，andtherewasnostatisticalsignificance（P>0.05）.Conclusion：YanluRukangcapsulecansignificantlyreduceestrogenandelevatedprogesteronelevelsinblood.

KeyWordsYanluRukangCapsule；Ratswithhyperplasiaofmammaryglands；Progesterone

中图分类号：R289.5文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2018.06.051

乳腺增生中医称为“乳癖”，又称乳腺结构不良，是既非炎性反应，亦非肿瘤，以乳腺肿块及疼痛为临床特点的一种疾病。随着生存环境的改变及生活节奏的加快，乳腺病的发病呈上升趋势。乳腺增生成为女性特别是育龄妇女最常见的乳腺病，发病率为80%～90%，居乳腺病发病的首位[1]。目前用于乳腺增生病治疗的中成药，品种繁多，治法不一，用药方法不一。中西药并用以暂时缓解症状为目的，导致病情易反复，不良反应明显。近年来，研究发现，乳腺增生是一种由于内分泌失调导致的疾病[2]。雌激素的过度刺激可使乳腺组织从正常生长到增生乃至肿瘤形成[3]。乳腺增生患者体内雌激素分泌增多，孕激素分泌不足；患者体内泌乳素水平升高，对乳腺组织有直接刺激作用，还可抑制黄体期孕酮的分泌，促进雌二醇的合成，从而导致雌孕激素比例失调，在雌激素持续刺激下，使乳腺组织增生过度，导致乳腺增生[4]。因此，关于本病的治疗，西医多以对抗雌激素为主，代表药物有甲基睾丸素、三苯氧胺等。本类药物针对其症状的改善有一定的作用，并且起效快、服用方便，但是对内分泌影响较大，不良反应明显，例如三苯氧胺長期使用可致子宫内膜癌等，不适宜在临床长期及广泛的应用[5]。我们在前期岩鹿乳康胶囊治疗脾肾阳虚型乳癖中发现，其临床疗效独特、不良反应少[6]。岩鹿乳康胶囊的作用机制与乳腺雌激素水平调节相关。我们就岩鹿乳康胶囊对乳腺增生大鼠雌孕激素方面的影响进行探讨。现报道如下。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1动物清洁级成年未孕Wistar雌性大鼠80只（北京维通利华有限公司提供），鼠龄7～8周，体重180～200g，在SPF条件下饲养。

1.1.2药物岩鹿乳康胶囊（云南海沣药业有限公司，国药准字Z20025379）；枸橼酸他莫昔芬片（三苯氧胺）（扬子江药业集团有限公司，国药准字H32021472）；乳癖消颗粒（哈尔滨太华药业有限公司，国药准字Z19990028）；以上各药以60kg人为标准，成人6倍给药。苯甲酸雌二醇注射液（苏州市苏牧动物药业有限公司，批号：100862511）；黄体酮注射液（天津金耀药业有限公司，国药准字H12020533）。

1.1.3试剂与仪器美国Labnet生产微型高速离心机（型号为C2500-R-230V）；日本ASONE生产的电热恒温培养箱（型号为ICV-450）；Thermoscientific生产的全自动酶标仪（型号为MultiskanMK3）；伊莱瑞特生物科技有限公司的大鼠雌二醇（E2）酶联免疫吸附测定试剂盒（货号为E-EL-R0348c），大鼠孕激素/孕酮酶联免疫吸附试验测定试剂盒（货号为E-EL-R0775c）。

1.2方法

1.2.1分组与模型制备饲养1周结束后，选取60只适应性良好的大鼠，按照完全随机分组的原则分为空白组、疾病模型组、去卵巢组、三苯氧胺组、乳癖消组、岩鹿乳康胶囊组，每组10只。除空白组外，其余各组大鼠后腿内侧交替肌内注射苯甲酸雌二醇注射液0.5mg/（kg·d），连续25d，随后改为黄体酮注射液4mg/（kg·d）交替肌内注射，连续5d。

1.2.2给药方法造模结束次日开始给药。1）空白对照组：给予生理盐水0.2mL/d，共30d。2）疾病模型组：给予生理盐水0.2mL/d，共30d。3）去卵巢组：用戊巴比妥钠按40mg/kg腹腔注射麻醉，无菌条件下摘除双侧卵巢，关闭腹腔。术后应用青霉素（4万U/kg）。给予生理盐水0.2mL/d，至试验结束。4）三苯氧胺组：于100mL含有0.5%CMC-Na的溶液中加入60mg三苯氧胺，搅拌使其充分溶解，每只大鼠灌胃量约0.01mL/（g·d）的三苯氧胺药物溶液，为成人剂量的6倍（成人剂量10mg/60kg），共30d。5）乳癖消组：于100mL的0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）溶液中加入12g乳癖消片，搅拌使其充分溶解，每只大鼠灌胃量约0.01mL/（g·d）乳癖消溶液，为成人剂量的6倍（成人剂量6g/60kg），共30d。6）岩鹿乳康胶囊组：于100mL的0.5%羧甲基纤维素钠溶液中加入36g岩鹿乳康胶囊，搅拌使其充分溶解，每只大鼠灌胃量约0.01mL/（g·d）岩鹿乳康溶液，为成人剂量的6倍（成人剂量6g/60kg），共30d。

1.2.3检测指标与方法1）观察并记录记录大鼠乳头直径及乳头高度，测量采用电子游标卡尺进行。2）于末次给药后第1天各组大鼠用10%水合氯醛（0.35mL/100mL）麻醉，腹部备皮约2.5cm，络合碘消毒皮肤，纵向切口，分离皮肤和肌肉层，纵向剪开肌肉层，游离肠胃，充分暴露腹主动脉，右手持采血管平针进腹主动脉，左手用眼科镊轻轻辅佐，约抽取动脉血5mL，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清E2和P的水平。

1.3统计学方法

数据整理统计和分析采用SPSS20.0统计软件进行处理，计量资料采用（±s）表示，比较采用t检验；P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.16组治疗后的大鼠乳头直径及高度比较与空白对照组比较，疾病模型组乳头直径及高度明显增大（P<0.05）。与疾病模型组比较，去卵巢组乳头直径及乳头高度均明显减小（P<0.05）。与疾病模型组比较，三苯氧胺组、乳癖消组、岩鹿乳康胶囊组乳头直径、乳头高度均明显减小（P<0.05）；与三苯氧胺组比较，岩鹿乳康胶囊组乳头直径差异无统计学意义（P>0.05），但乳头高度明显增高（P<0.05）；与乳癖消组比较，岩鹿乳康胶囊组乳头直径明显减小（P<0.05）。见表1。

2.26组血清中E2和P比较

与空白对照组比较，疾病模型组血清E2水平明显增高（P<0.05），P水平明显降低。与疾病模型组比较，去卵巢组E2水平明显降低（P<0.05）。与疾病模型组比较，三苯氧胺组、乳癖消组、岩鹿乳康胶囊组血清血清E2水平明显降低（P<0.05），P水平明显升高（P<0.05）。与三苯氧胺组比较，岩鹿乳康胶囊组血清E2、P水平差异无统计学意义（P>0.05）；与乳癖消组比较，岩鹿乳康胶囊组血清E2水平明显降低（P<0.05），P水平明显升高（P<0.05）。见表2。

3讨论

现代医学认为，乳房为性激素的靶器宫，其功能受下丘脑-垂体-卵巢分泌的激素调控。乳腺增生的发病因素诸多，性腺轴失调为其主要原因[7]。现代药理研究指出，岩陀主要化学成分为岩白菜素，具有抗炎、抗HIV、抑制微生物、镇咳、抗氧化、镇痛、增强免疫等作用[8]。有研究指出，岩陀在其他增生性疾病中如乳腺，具有抑制纤维组织增生、增加局部血流量，减轻炎性反应的作用[9]。鹿角霜其含磷酸钙、碳酸钙、氛化物等，并含有睾酮、孕酮、垂体泌乳素、雌二醇4种甾体生物激素，其中某些成分有可能是鹿角治乳腺病的物质基础[10-11]。研究证明，鹿角霜等有类雌激素样作用，能提高雌激素水平[12-13]。亦有指出鹿角霜有类似雄激素作用调节雌孕激素比例[14]，亦能拮抗雌激素或泌乳素[15]。李增战等[16]认为，鹿角霜能地对抗戊酸雌二醇性小鼠乳腺增生，促进正常小鼠巨噬细胞的吞噬功能，并能刺激血液中T淋巴细胞的增殖。大剂量能明显抑制MA2737小鼠乳腺癌的生长。总之，鹿角霜改善内源激素的分泌，进而调整内分泌水平[17]。鹿衔草药理作用包括降压、扩血管、强心保护心肌作用。研究证明鹿衔草通过植物雌激素样作用，提升血清雌激素水平[18]。

从本研究各组的大鼠乳头直径及高度以及血清中E2和P的结果比较分析得出，岩鹿乳康胶囊不仅治疗乳腺增生效果显著，且可以从根本上调控雌孕激素，纠正内分泌紊乱。疾病模型组与空白对照组比较显示造模成功。乳癖消组治疗有效，对雌孕激素有影响；即降低雌激素升高孕激素。韩蓉等[19]在乳腺宁片对乳腺增生大鼠及激素水平的影响中也有所证实，但效果弱于岩鹿乳康组与三苯氧胺组。三苯氧胺治疗效果显著，但纠正内分泌紊乱不如岩鹿乳康胶囊；这或许是临床应用三苯氧胺产生不良反应的原因之一[20]。而郁琳等[21]在三苯氧胺、丹那哇治疗子宫内膜异位症血清雌、孕激素及子宫内膜雌孕激素受体的变化一文中指出，经三苯氧胺治疗3个月后，血清雌二醇值升高；而治疗6个月后，血清雌二醇值下降[21]。去势组治疗效果佳，对于一般育龄期女性而言选择这种治疗方法不现实。

中醫学称乳腺增生病为乳癖，多因情志内伤，肝气郁结，乳络阻滞或肾阳不足以致冲任不调，气滞痰凝所致；治法则以疏肝理气，温补肾阳，活血化瘀，软坚散结，消肿止痛等为主。岩鹿乳康胶囊是由岩陀，鹿角霜，鹿衔草3种药物组成。岩陀，苦、涩，凉；具有清热凉血，调经止痛。取其行气、活血、化瘀，散结止痛之功治疗乳腺增生病。鹿角霜为引药归肝、肾之经，其味咸，故能温阳寒，软坚散结。且为血肉有情之品温补肾阳之要药，更是治疗乳腺增生的常用药物，并且疗效显著[22-23]。鹿衔草味甘苦，性温，归肺、胃、肝、肾经，能补虚，益肾，活血调经，且可以引药归经入卵巢以调摄冲任[24]。仅从名字由来便可知补肾之佳品，亦是治疗乳腺增生病之良药[25]。3药合用清热凉血，调经止痛，以治疗乳癖。临床研究亦证实，此方对此病有效[6，26]。

总之，岩陀，鹿角霜，鹿衔草均入肾经，有补肾之功；补肾的药物均对性激素有调节作用。由于中药是从多方面，多角度调整内分泌，具体降低或是升高激素水平或许与用量与配伍有关。

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