新疆库尔勒香梨果皮中多糖含量的测定

海仁古丽·麦麦提， 王安平， 阿依夏古丽·巴卡斯， 海力茜·陶尔大洪

(新疆医科大学1药学院， 乌鲁木齐 830011； 2第二附属医院麻醉科， 830063)

库尔勒香梨(PyruscommunisL.)为蔷薇科梨属植物白梨的果实,原产于新疆库尔勒地区，距今已有1 400多年的历史[1]。库尔勒香梨中主要含有多糖、挥发油、甾体类、黄酮类等化学成分，多糖是香梨中的主要成分，具有增强人体免疫力、促进淋巴细胞产生等作用，已成为日常生活中常见的水果[2-4]。本课题组前期已对库尔勒香梨的化学成分、微量元素进行了测定和研究[5-6]。本研究采用苯酚硫酸法测定库尔勒香梨果皮中的多糖含量，现报道如下。

1 仪器与试药

1.1仪器UV-2550型紫外分光光度计(日本岛津)，AB135-5型分析天平(Mettler-Teledo)，SK5200HP型超声清洗器(上海科导超声仪器有限公司)，RE-52A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器有限公司)，HH-4型数显恒温水浴锅(国华电器有限公司)

1.2试剂苯酚(天津市北联精细化学品开发有限公司，批号20160711)，5%葡萄糖(成都维克奇生物科技有限公司，批号H5102634)，苯(四川科伦药业股份有限公司，批号2015312)，98%浓硫酸(河南升宏化工产品有限公司，批号20161212)。

1.3药材库尔勒香梨2016年9月购于新疆库尔勒市，经新疆医科大学药学院帕丽达·阿不力孜教授鉴定为蔷薇科梨属植物白梨(PyruscommunisL.)的果实。收集库尔勒香梨的果皮，自然风干，用研钵研成粗粉，置于干燥处储存备用。

2 方法与结果

2.1对照品溶液的制备称取葡萄糖对照品10.00 mg，并将它放入100 mL容量瓶中，用蒸馏水定容，配置成浓度为0.1 mg/mL的对照品，备用。

2.2样品溶液的制备取库尔勒香梨果皮，自然风干，用研钵研成粗粉，称取样品1.00 g置于250 mL圆底烧瓶中，加入蒸馏水60 mL，回流提取2次，每次180 min，将2次的提取液合并后倒入100 mL容量瓶，用蒸馏水定容至刻度，吸取1.5 mL于10 mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，备用。

2.3标准曲线的制备分别吸取“2.1”项下对照品溶液0.20、0.30、0.40、0.50、0.60 mL置于10 mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度配制成浓度分别为0.002、0.003、0.004、0.005、0.006 mg/mL 的溶液，各吸取2.00 mL置于试管中，加入5%苯酚溶液1.00 mL，浓硫酸5.00 mL，放置30 min，测定490 nm处吸光度，以浓度为横坐标(X)，吸光度值为纵坐标(Y)，绘制标准曲线，得回归方程：Y=15.45X-0.057 8(R=0.996 7)，在0.018 5～0.058 9 mg/mL浓度范围内线性关系良好。

2.4加样回收率试验吸取“2.2”项下样品溶液9份，每份3.86 mL，置于10 mL容量瓶中，分别加入“2.1”项下照品溶液50、150、350 μL各3份，置于容量瓶中，按“2.3”项下方法测定，按公式：加样回收率/%=测定值-本底值/加入值×100%计算，库尔勒香梨果皮中多糖的加样回收率为100.2%，RSD为6.2%，见表1。

表1 加样回收率试验结果(n=3)

2.5稳定性试验吸取150 μL样品溶液，置于10 mL容量瓶，按“2.3”项下方法分别在1、2、3、4、5、6 h测定490 nm处吸光度，经计算RSD为5.8%，表明试验在6 h内稳定性良好，见表2。

表2 稳定性试验结果(n=3)

2.6精密度试验吸取“2.1”项下对照品溶液2.00 mL，共6份，按“2.3”项下方法测定，对照品的RSD为1.2%，表明方法精密度良好，见表3。

表3 精密度试验结果(n=6)

2.7样品含量的测定取“2.2”项下样品溶液2.0 mL，按“2.3” 项下方法测定，以2.0 mL蒸馏水按同样方法测定为空白，经计算库尔勒香梨果皮中多糖的含量为3.45 mg/g，见表4。

表4 库尔勒香梨果皮中多糖含量(n=3)

3 讨论

本研究采用苯酚-浓硫酸为显色剂，可见分光光度法[7-12]测定库尔勒香梨果皮中多糖含量，测定前苯酚-浓硫酸溶液需要现配现用，冰箱中避光储存，对照品和样品显色时间要保持一致，减少测定误差。本实验方法操作简便，测定结果准确，适用于库尔勒香梨果皮中多糖的含量测定，为库尔勒香梨的质量控制和副产品研发提供了理论依据。