ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中行微柱凝胶技术的应用研究

庞朕方　李明月

【中图分类号】R722.18 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2018）07--01

新生儿于妊娠分娩过程中可存在母源性IgG抗体输入，当输入的IgG抗体是针对新生儿的溶血性抗体时，可引发新生儿溶血病（hemolytic disease of newborn，HDN）。HDN可引发新生儿黄疸、贫血、肝脾肿大及水肿等病症，严重者可诱发胆红素脑病，致使新生儿智力发育障碍，甚至死亡[1]。故而，对HDN进行准确，及时地诊断对保证新生儿的生命健康具有重要意义。微柱凝胶技术是一种新型免疫学检测技术及改良抗体球蛋白试验技术，因高灵敏度、高准确度、操作简便、标本用量少及结果保存时间长等优点已逐渐被认为是临床血型免疫学检验的金标准[2，3]。

目前已被应用到了ABO及Rh血型的鉴定、新生儿溶血病的血清学检查、交叉配血、不规则抗体的鉴定及筛选、血小板同种抗体筛选等多种血清学检测中[4]。本研究探讨了ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中行微柱凝胶技术的应用，旨在为临床HDN的及时诊治提供数据参考，取得了较好的效果。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2014年1月至2015年12月我院疑似母婴血型不合HDN的黄疸患儿及其母亲血标本240例，其中男性患儿129例，女性111例；患儿年龄在2h～12d。临床表现为贫血、黄疸、血红蛋白降低，伴有新生儿溶血病的临床症状和体征。

1.2 仪器与试剂 FYQ免疫微柱孵育器及TD-3A血清学多用离心机均购于长春博研科学仪器有限公司；6%牛蛋白标准血清及新生儿溶血病微柱凝胶检测卡均购于长春博迅生物技术有限责任公司，ABO红细胞由上海血液生物医学有限责任公司提供。

1.3 检测方法

1.3.1 直抗实验 将待检红细胞用生理盐水配成悬液（0.8%），取50μl依次加入新生儿溶血病检测卡1内，TD-3A血清学多用离心机900r/min离心2min；1500r/min离心3min，判定结果。

1.3.2 游离实验 取新生儿溶血病检测卡2，分别加入患儿血浆50μl于1、2、3孔，再分别加入0.8%A、B、O标准红细胞悬液50μl。

1.3.3 放散实验 各加入患儿50μl放散液于新生儿溶血病检测卡2的4、5、6孔，再加入分别0.8%得A、B、O标准红细胞悬液50μl，15min37℃孵育，TD-3A血清学多用离心机900r/min离心2min；1500r/min离心3min，判定结果。

1.4 统计学处理 数据整理分析采用SPSS19.0，计数资料比较使用2检验，以p<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 检测结果 240例疑似为母婴血型不合黄疸患儿中，确诊为ABO-HDN 188例，其中母/婴血型为O/A组合91例（48.40%），O/B组合97例（51.60）。血清学检测结果见表1，放散阳性188例（78.33%），直抗阳性56例（23.33%），游离阳性106（44.17%）。

2.2 黄疸患儿直抗与HDN的关系 56例直抗阳性患儿中均确诊为HDN（100.00%），184例直抗阴性患儿中确诊为HDN 123例（66.85%），两者差异有统计学意义（2=24.892，p<0.05），

2.3 三项检测结果HDN构成情况 188例HDN中，以放散实验单项阳性比例最高（40.96%），其次为游離实验阳性加放散实验阳性（29.26%），而直抗实验阳性加放散实验阳性比例最少（2.66%）。

3 讨论

新生儿溶血病是由产妇体内含有与胎儿红细胞不合的IgG抗体而诱发的免疫疾病。现阶段已知血型血性系统中，ABO血型系统最为常见。A、B血型抗原物质广泛存在于自然界的一些寄生虫、植物及细菌微生物中，O型血产妇常于怀孕前就已接触过A、B血型抗原物质，体内产生相应的抗A、抗B的IgG抗体，于第一胎即可发病，故而ABO新生儿新生儿溶血病临床较为常见[5，6]。新生儿溶血的发病机理主要是母体IgG抗体经胎盘屏障进入胎儿血液循环系统，破坏胎儿的红细胞，造成新生儿贫血、溶血、黄疸及高胆红素血症等病症，还可诱发死胎、流产及死产等，新生儿可出现严重贫血、智力低下及胆红素脑病等后遗症，严重者还可出现新生儿死亡[7，8]。因而，采用可靠、敏感的实验检测手段对HDN进行及时、准确的诊断对提高新生儿溶血的治疗效果具有重大意义。

现临床主要根据红细胞抗球蛋白试验、血清游离抗体试验及抗体放散实验并结合临床特点进行综合分析对新生儿溶血病做出诊断[9]。但新生儿是生长发育的特殊阶段，新生儿血型虽与新生儿溶血病关系密切，但其血型抗原位点较少、抗体及抗原的表达水平较低，特别是出生3个月左右时IgG水平仅为成人的30%左右[10]。因而血型血清学的检测难度系数较高，先前常采用的酶处理红细胞技术、盐水抗球蛋白试验等常规测定方法，操作复杂，周期较长且需要显微观察，主观因素掺杂，误差大，准确率不高[11]。本研究采用微柱凝胶技术是一种新型免疫学检测技术，具有准确度、灵敏度高、操作简便、结果保存时间长及易标准化等优点，正确运用微柱凝胶技术可为临床提供准确、快速的检测报告，有利于临床医师对新生儿溶血进行早期诊断和治疗[12，13]。本研究探讨了ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中行微柱凝胶技术的应用，旨在为临床HDN的及时诊治提供数据参考。

本研究结果发现240例疑似为母婴血型不合黄疸患儿中，确诊为ABO-HDN 188例，其中母/婴血型为O/A组合91例，O/B组合97例；56例直抗阳性患儿中均确诊为HDN，184例直抗阴性患儿中确诊为HDN 123例，两者差异有统计学意义；188例HDN中，以放散实验单项阳性比例最高，其次为游离实验阳性加放散实验阳性，而直抗实验阳性加放散实验阳性比例最少。上述结果说明微柱凝胶技术检测新生儿溶血病有较高的灵敏度和准确率，具有临床应用价值。

微柱凝胶技术利用了微柱凝胶的分子筛作用和相应抗体与抗原的免疫特异性反应[14]。该技术的主要原理是微柱凝胶卡孔填充物是大分子葡聚糖，其间隙十分微小，通过抗原抗体特异性反应作用和微柱凝胶的微孔过滤作用，低速离心后，抗原抗体凝集反应可形成大分子物质而阻滞凝胶上层（呈阳性），但单个细胞具有变形性，在穿过微孔值凝胶底部后可呈阴性反应[15]。该技术不需要用显微镜观察且省去了抗人球蛋白试管法的反复洗涤的操作，结果可反复观察，各梯度凝集强度清晰，较传统方法可更准确地检测产妇血液中的IgG抗体及效价。

综上所述，ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中行微柱凝胶技术，能准确及时地为临床诊治提供依据，值得在临床上推广应用。

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