荧光分光光度法测定斯达舒中铝的含量

王堃　陈瑾　赵春晓　郭爱玲

【摘 要】 目的：建立测定斯达舒中铝含量的新方法。方法：以萘甲醛席夫碱为络合剂，采用荧光分光光度法，在醋酸铵-醋酸（pH=7）的缓冲溶液中测定斯达舒中铝的含量。结果： 在激发波长为437 nm，发射波长为525 nm处，用荧光分光光度法对浓度0～6 μmol/L范围内铝离子标准溶液进行荧光强度的测定，结果表明荧光强度和浓度具有较好的线性关系，平均加样回收率为99.02%～102.03%，准确度较好。结论：该方法选择性好、灵敏度高、响应时间短、操作简便，适合于胃药斯达舒中铝含量的测定。

【关键词】 铝；荧光分光光度法；斯达舒

【中图分类号】R914.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2018）08-0034-03

Abstract：Objective To establish a new method for the determination of aluminium in Si Dashu. Method The content of aluminum in Si Dashu was determined in ethanoic acid-ammonium acetate cushion fluid （ pH=7） with naphthalene formaldehyde Schiff base as complexing agent by fluorescence spectrophotometry. Result The calibration curve of aluminum ion with good linearity was obtained over the range of 0-6 μmol/L at the excitation wavelength of 437 nm and the emission wavelength of 525 nm. The recovery rate was 99.02%～102.03% with good accuracy. Conclusion The method has the advantages of high sensitivity， selectivity， short response time and simple operation. The method was suitable for determining the aluminum content in Si Dashu.

Keywords：Aluminum； Fluorescence Spectrophotometry； Si Dashu

鋁是地壳中含量最丰富的金属元素，约占地壳的70%，在许多药物、食品添加剂、混凝剂等中都含有铝。铝是一种对人体和生态都有害的物质，虽然快速进入人体不会导致急性中毒，但是长期过量的摄入铝会对中枢神经、肝、肾、骨、造血细胞都有损坏，导致痴呆，引起贫血、骨质疏松等疾病[1]。所以，建立一种灵敏、快速的分析方法用来检测铝的含量具有一定的实际意义。目前，测定铝的方法有原子吸收光度法[2]、化学法[3]、紫外分光光度法[4]等。而荧光光度法因具有操作简单快速、样品用量少、灵敏度高、选择性好等优点，被广泛地应用于铝的含量测定[5]。在前期研究中，以2-氨基苯酚和2-羟基萘甲醛为原料，合成了萘甲醛席夫碱（HPIN），并通过荧光分光光度法测定了白术、防风、黄芪、连翘等中药中铝的含量[6-7]。本文探索以HPIN为络合剂，采用荧光分光光度法测定胃药斯达舒中铝的含量，为复方制剂中铝含量的测定提供了一种新的方法，为斯达舒质量控制的检测方法提供参考。

1 仪器与材料

1.1 材料 斯达舒片（批号：160808、161104、161110、160113，修正药业集团股份有限公司），HPIN由山西中医药大学基础化学实验室提供。甲醇、乙酸、乙酸铵、氯化铵、氨水、硝酸铝、乙酸钠、盐酸等试剂都是分析纯。

1.2 仪器 CP214万分之一天平（奥豪斯仪器有限公司），UV-6100S型紫外可见分光光度计（上海元析仪器有限公司），F97pro型荧光光谱仪（上海棱光技术有限公司），pHS-3C pH计（上海精密科学仪器有限公司）。

2 方法与结果

2.1 样品溶液的制备

2.1.1 铝标准溶液的制备 精密称取0.0188 g Al（NO3）3·9H2O，用适量蒸馏水溶解，定容至50 mL容量瓶，配制成1 mmol/L的铝储备液。精密移取该溶液1.0 mL于100 mL容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，配制为10 μmol/L的标准铝溶液，备用。

2.1.2 HPIN标准溶液的制备 精密称取HPIN固体0.0132 g，用适量甲醇溶解，定容至50 mL容量瓶中，配制成1 mmol/ L的HPIN储备液。精密移取该溶液1.0 mL于100 mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，配制成10 μmol/L的标准HPIN溶液，备用。

2.1.3 缓冲溶液的制备 pH为3、4、5、6的标准缓冲溶液由NaAc与HAc配制， pH为7的标准缓冲溶液由NH4Ac和HAc配制，pH为8、9、10的标准缓冲溶液由NH4Cl与NH3·H2O配制，并经pH计校准。

2.2 紫外吸收光谱 在10 mL比色管中，依次加入1.0 mL 10 μmol/L标准铝溶液，HAc-NH4Ac标准缓冲溶液（pH=7）3.0 mL，10 μmol/L标准HPIN溶液1.0 mL，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，静置40 min，以试剂空白作参比，在300～600 nm范围进行吸收光谱扫描。结果显示，HPIN与铝离子的络合物在437 nm处有最大吸收。所以，选择437 nm作为荧光测定的激发波长。

2.3 荧光发射光谱 准确移取1.0 mL的标准HPIN溶液，置于10 mL比色管中，依次加入3.0 mL 的HAc-NH4Ac标准缓冲溶液（pH=7）、1.0 mL 的10 μmol/L的标准铝溶液，加水稀释至刻度，摇匀，静置40 min，以437 nm为激发波长，在470～680 nm范围进行荧光光谱扫描。结果显示，在525 nm处有最大的荧光强度。所以选择525 nm作为荧光测定的发射波长。

2.4 标准曲线的绘制 取7个10 mL比色管，分别加入1.0 mL的标准HPIN溶液和3.0 mL pH=7的HAc-NH4Ac标准缓冲溶液，依次加入0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL的标准铝溶液，用蒸馏水稀释至刻度，静置40 min，固定437 nm为激发波长， 525 nm为发射波长，测定荧光强度F。以F与标准铝溶液的浓度作回归分析，可得回归方程：F=23.39C+11.444，r=0.9985，说明铝离子在0～6μmol/L浓度范围内具有良好的线性关系。

2.5 缓冲溶液的选择 按“2.4”项方法操作，分别测定pH为3、4、5、6、7、8、9、10的标准缓冲溶液中的荧光值，结果显示pH为7的HAc-NH4Ac标准缓冲溶液中荧光强度最大。同时分别测定标准缓冲溶液为1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL中的荧光值，发现用量为3.0 mL时，荧光最强。因此实验采用3.0 mL pH为7的HAc-NH4Ac标准缓冲溶液进行测定。

2.6 络合时间的选择和稳定性实验 在10 mL的比色管中，依次加入1.0 mL的标准HPIN溶液、3.0 mL的HAc-NH4Ac标准缓冲溶液、1.0 mL的标准铝溶液，按“2.4”项方法操作，每隔5 min测定荧光强度，结果表明在40 min内络合反应基本完成，荧光强度达到最大值，并在1 h内基本稳定。因此络合时间选取40 min。

2.7 精密度实验 精密移取标准铝溶液1.0 mL，按“2.4”项方法操作，连续重复测定6次，计算出RSD为0.98%，表明该仪器精密度良好。

2.8 重复性实验 选择斯达舒片（批号1601104）粉末6份，每份1.0 g，制备贮备液，分别精密移取10 μL，按“2.4”项方法测定荧光值，计算出RSD 为0.76 %，表明该方法重复性良好。

2.9 加样回收率 选择已知含量的斯达舒片（批号1601104）粉末9份，每份0.5 g，精密稱定，制备贮备液，分别精密移取10 μL，每三份分别按照样品中铝含量的50%，100%和150%加入标准铝溶液，按2.4项方法测定荧光值，计算出平均加样回收率为99.02%～102.03%，RSD为1.08%～1.89 %。

2.10 共存离子的影响 1 μmol/L铝离子溶液作为测试对象，在测量的过程中加入共存的离子，测定值的相对误差小于或等于±5%，进行离子干扰试验，结果见表1。大量NO3-、Na+、K+、SO42-离子（共存倍数超过10000倍）存在下不影响铝离子含量的测定，Fe3+在邻菲罗啉作为掩蔽剂的情况下最大共存量为600 μmol/L，其他离子（共存倍数超过200倍）也不影响铝离子含量的测定。

2.11 样品含量测定 取斯达舒片，研磨，准确称取0.0150 g置于烧杯中，加入2 mol/L盐酸，溶解，过滤，洗涤，合并滤液置于100 mL容量瓶中，蒸馏水定容至刻度，即得样品贮备液。取10 μL样品贮备液置于10 mL比色管中，按“2.4”项方法连续测定其荧光值3次，然后根据标准曲线计算样品中铝离子含量，结果见表2。

3 讨论

铝是一种慢性神经性毒性物质，长期摄入过量会使神经系统发生缓慢改变，从而诱发老年痴呆等疾病。斯达舒的主要成分为氢氧化铝、维生素U、颠茄提取物，同时含有淀粉、硬脂酸镁等辅料。用于缓解胃酸过多引起的胃痛、胃灼热感（烧心）、反酸，也可用于慢性胃炎。其中，氢氧化铝对胃部已经存在的胃酸起中和或缓冲作用，既是药物的有效成分，又不能过量摄取，测定斯达舒中铝离子的含量具有一定的实际意义。2015版《中国药典》[8]中氢氧化铝的含量测定方法是采用过量的EDTA与铝离子发生反应，再用锌滴定液滴定剩余的EDTA，根据锌滴定液的消耗量，确定氢氧化铝的含量，操作过程相对繁琐。研究采用的萘甲醛席夫碱荧光分光度法，取样量少，选择性好，灵敏度高，其它离子的干扰少，可以直接测定，操作简单。斯达舒每片含氢氧化铝140 mg，即标准含铝量应为48 mg。实验以萘甲醛席夫碱为络合剂，采用荧光分光光度法测定斯达舒中铝含量的平均值在48 mg以上，达到标准，说明该方法可靠、准确。同时对四批样品中铝含量的平均值进行了统计分析，得出斯达舒中含铝量的范围为（49.51±0.93）mg/片，即48.58～50.44 mg/片。综上，本文所建立的荧光分光光度法可以用于检测斯达舒中铝的含量，可为含铝药物的质量控制检测方法和质量标准的制定提供参考。

参考文献

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[6] 郭爱玲， 陈瑾， 张淑蓉， 等， 萘甲醛席夫碱荧光分光度法测定中药中铝的含量[J]. 广东化工， 2016， 43（16）： 62-63.

[7] Ailing Guo， Ruitao Zhu， Yuehong Ren， et al.A “turn-on” fluorescent chemosensor for aluminum ion and cell imaging application[J].Spectrochimica Acta Part A：Molecular and Biomolecular Spectroscopy，2016，153：530-534.

[8] 国家药典委员会，中华人民共和国药典（二部）[M]. 北京：中国医药科技出版社，2015，768-769.

（收稿日期：2018-03-06 编辑：刘 斌）