基于ACQUITY Arc液相色谱系统同时检测酱腌菜中5种添加剂的方法建立

□ 鞠中杰 烟台市食品药品检验检测中心

酱腌菜是我国的传统食品，也是日常的大众消费食品，但由于市场准入门槛低，酱腌菜行业存在着生产者多而杂，生产规模小，质量隐患多等问题[1-3]。酱腌菜的国家标准是GB 2760-2014《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》，其允许添加乙酰磺胺酸钾、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸5种常见添加剂[4]，因此有必要开发出能够快速同时检测以上5种食品添加剂的方法。

本实验使用沃特世ACQUITY Arc液相色谱系统，采用CORTES C18色谱柱，选用甲醇:0.02mol/L乙酸铵(5:95)作为流动相，采用外标法定量建立针对酱腌菜样品，同时测定乙酰磺胺酸钾、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸的方法，旨在为酱腌菜中5种添加剂的同时检测及提升检测速度提供参考。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

仪器：高效液相色谱仪Acquity Arc，沃特世公司；电子天平（SQP），德国赛多利斯公司。

试剂：乙酰磺胺酸钾标准品（1000μg/mL）、脱氢乙酸标准品（1000μg/mL），来自农业部环境保护科研检测所；苯甲酸标准品（1000μg/mL）、山梨酸标准品（1000μg/mL）、糖精钠标准品（1000μg/mL），来自中国计量科学研究所；乙酸铵(色谱纯)，天津市科密欧化学试剂有限公司；甲醇（色谱纯），德国默克公司。

1.2 试验方法

1.2.1 标准使用液的制备

标准使用液：准确吸取5种添加剂标准品（1000μg/mL）0.05mL、0.10mL、0.20mL、0.50mL、1.00mL于10mL容量瓶中，用纯水定容至刻度，得到浓度 为 5.00mg/L、10.00mg/L、20.00mg/L、50.00mg/L、100.00mg/L的混合标准工作溶液。

1.2.2 样品的制备

准确称取粉碎均匀的酱腌菜样品2.000g于50mL比色管中，加入30mL 20g/L碳酸氢钠溶液，超声提取30min，加纯水定容至50.0mL，5000r/min离心5min，取上清液过0.22μm滤膜，备用。

1.2.3 色谱工作条件

色谱柱：CORTES C18（4.6mm×100mm，2.7μm）；流动相:甲醇＋0.02mol/L乙酸铵（5＋95）；色谱柱温：30℃；流速:1.0mL/min；检测器：PDA检测器；进样量：2μL；保留时间定性，峰面积外标法定量。

2 结果与分析

2.1 混合标准品的分离效果

本实验采用沃特世A c q u i t y A r c液相色谱系统，该系统适用于高效液相色谱平台的方法并可模拟原始方法中的延迟体积和混合行为，获得超高效液相色谱性能[5]。同时采用2.7 μ m微粒色谱柱改善色谱性能，从而缩短分离时间得到较好的分离效果。混合标准品色谱图见图1。

图1 5种添加剂标准品混合液的色谱图

2.2 标准曲线和线性范围

通过用色谱峰面积-质量浓度绘制曲线得到线性回归方程，5种添加剂线性方程相关系数r均大于0.9999，可判定以本方法测定5种添加剂的含量，样液浓度在5.00～100.00mg/L线性关系良好。

表1 回收率与精密度试验结果

2.3 回收率与精密度试验

样品中加入0.5g/kg的5种添加剂标准品，平行测定6次，计算平均回收率和相对标准偏差（RSD），结果如表1所示。平均回收率为95.9%～104.3%，RSD为0.54%～2.01%，结果满足分析要求。

3 结论

本方法运用A C Q U I T Y A r c液相色谱系统同时测定酱腌菜中的5种添加剂，极大的节约了试剂和分析时间，提升了试验效率。方法操作方便，分离效果好，精密度和回收率均满足定量分析要求，适合大批量酱腌菜样品的测定。