老年胃癌患者EGFR、MMP-9、STC2蛋白表达及与临床病理的关系

吕士红 刘 磊 李美姗 史春静

(牡丹江医学院第二附属医院消化内科，黑龙江 牡丹江 157000)

胃癌的发病较为隐匿，早期症状类似于胃部炎症，易被忽视，目前尚未发现有效的临床早期诊断技术〔1〕。相关研究提出生物标志物具有极其重要的作用〔2〕。在胃癌细胞中表皮生长因子受体(EGFR)相互作用，同时能促进侵袭转移。基质金属蛋白酶(MMP)-9作为肿瘤细胞穿透基底膜所必需的蛋白水解酶，能影响肿瘤迁移扩散调节〔3〕。斯钙素(STC)作为糖蛋白激素，能促使肾对磷酸盐的吸收，防止血钙过高，有利于钙磷动态平衡的维持，相关研究提出STC的表达和人类肿瘤发生发展过程密切相关〔4〕。本文拟分析老年胃癌患者EGFR、MMP-9、STC2蛋白表达及与临床病理的关系。

1 资料与方法

1.1临床资料 选取2015年3月至2016年2月牡丹江医学院第二附属医院收治的88例胃癌术后胃癌组织标本，均通过病理证实为胃癌，在术前未经过放化疗等治疗，均为首次手术治疗。患者年龄63～85〔平均(72.14±2.76)〕岁；女31例，男57例；浸润深度：T1～T2 16例，T3～T4 72例；23例无淋巴结转移，65例伴有淋巴结转移；68例低度分化，20例中/高度分化；34例Ⅰ、Ⅱ期，54例Ⅲ期。另选择同期行胃镜检查室内活检，提示为正常胃组织的64例视为对照组，无重度不典型增生者。其中女11例，男53例；年龄61～83〔平均(71.65±2.68)〕岁。两组年龄、性别等方面差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2方法 德国Leiac公司提供sT501o自动染色机和RM2245病理切片机，由北京市中山生物制品技术公司提供鼠抗人EGFR单克隆抗体、鼠抗人MMP-9单克隆抗体、鼠抗人STC2单克隆抗体，浓缩性二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒由乌海博士德生物公司提供。样本切片3张，采取免疫组化方法予以染色，并检测样本中EGFR、MMP-9、STC2表达。选取5个不同视野的切片，观察及记录视野中100个细胞的阳性细胞数，细胞核或细胞质染成黄色或棕黄色为阳性，5次阳性细胞个数的平均值作为最终数目，然后算出平均阳性细胞率。仅细胞质着色或不存在阳性着色细胞，同时阳性细胞率<5%为阴性。

1.3统计学处理 应用SPSS11.5软件进行t检验、χ2检验及Pearson相关性分析。

2 结 果

2.1两组EGFR、MMP-9、STC2阳性表达分析 胃癌组EGFR、MMP-9、STC2阳性表达率显著高于对照组(P<0.001)，见表1。

2.2胃癌组EGFR、MMP-9、STC2蛋白表达和临床病理的关系 不同性别EGFR、MMP-9、STC2表达差异无统计学意义(P>0.05)，但不同肿瘤直径、浸润程度、淋巴转移、分化程度、临床分期患者EGFR、MMP-9、STC2表达差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表1 两组EGFR、MMP-9、STC2阳性表达对比〔n(%)〕

表2 胃癌组EGFR、MMP-9、STC2蛋白阳性表达和临床病理的关系(n)

2.3胃癌组EGFR、MMP-9、STC2蛋白表达相关性 EGFR和MMP-9、EGFR和STC2、MMP-9和STC2表达均呈正相关性(r=0.674、0.724、0.582，均P<0.05)。

3 讨 论

胃癌发生、发展、转移及迁徙和多节段、多因素、多基因的参与有关，涉及多种抑癌基因失活、肿瘤基因激活及多种因子调节〔5〕。当前在诊断和治疗胃癌的难点主要是因为早期症状不明显，诊断时间较晚，肿瘤易从胃部经过血管、淋巴等向人体内其他器官、组织内扩散和迁移，抗肿瘤效果不明显。

近年来，已发现较多的肿瘤影响基因、因子，主要包括EGFR、MMP-9、STC-2〔6〕。MMP-9被称为明胶原或Ⅳ型胶原酶，作为MMPs的一员，是机体内参与降解细胞外基质(ECM)众多酶中的关键酶〔7〕。ECM降解作为肿瘤细胞向正常组织侵袭扩散的前提，此过程依赖多种酶的共同参与，MMP-9作为肿瘤细胞穿透基底膜所需的蛋白水解酶〔8〕，不但有降解作用，同时能促进肿瘤血管的生成，能上调肿瘤血管化的程度。相关研究表明，食管癌、胃癌、大肠癌等上皮细胞来源的恶性肿瘤均伴有EGFR蛋白表达乃至过表达情况，从中促使癌细胞的血管生成、增殖、侵袭及转移，阻碍癌细胞的凋亡〔9〕。相关研究使用DNA甲基化检测发现EGFR启动子甲基化可能为胃癌发生、发展的表观遗传学生物标志〔10〕。相关研究提出多种肿瘤的发生、发展及演进过程和STC家族密切相关〔11〕。相关研究发现在乳腺癌细胞系中STC2作为视黄酸信号通路和雌激素的下游靶标，持续的STC2表达会阻碍细胞的生长及活力〔12〕。相关研究显示，神经母细胞瘤细胞通过STC2转染后，会提高浸润能力，同时增强MMP-2的活性，加大肿瘤细胞出血和转移的风险〔13〕。STC2在肾癌中的表达上升，同时和肾癌侵袭力有关，缩短患者总生存期。相关研究在mRNA水平通过检测癌旁和胃癌组织，得到相似的STC2表达结果〔14〕，提示STC2表达增强作为胃癌侵袭转移过程的重要分子事件，有可能会加大胃癌的恶性程度。

相关研究显示，EGFR、MMP-9、STC2在子宫癌、食道癌、乳腺癌等恶性肿瘤中的表达上调〔15〕。本研究结果EGFR、MMP-9、STC2三者之间的表达可能和胃癌的发生发展密切相关。另外EGFR、MMP-9、STC2表达水平和肿瘤的扩散程度呈正相关，EGFR的过度激活对胃癌组织中恶性细胞的演进过程及胃黏膜正常细胞的转化过程发挥极其重要的作用。

综上，EGFR、MMP-9、STC2蛋白在胃癌组织中的表达上升，其表达和临床病理特征密切相关，通过检测三者的表达对诊治胃癌有一定指导价值。