解脲型、人型支原体与高危型HPV相关性研究

陈青 许继芹 洪颖

【摘要】目的：研究高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染与解脲型支原体（Uu）、人型支原体（Mh）及混合性支原体感染之间相关性。方法：回顾性分析2015年8月至2017年7月就诊于南京大学附属鼓楼医院共301名患者，利用杂交捕获二代测序方法对301例患者进行HPV-DNA检测，同时通过荧光定量PCR法对301例患者进行支原体检测。结果：301例患者中，高危型HPV感染者33例，HPV阴性者268例，支原体阳性者163例，总感染率为44.19%，解脲支原体阳性者135例，感染率为44.85%，人型支原体阳性者57例，感染率18.94%，解脲支原体及人型支原体同时感染者”例，感染率为9.63%。解脲支原体感染与高危型HPV感染差异有统计学意义（X2值为4.664，P<0.05），人型支原体感染与高危型HPV感染差异无统计学意义（X2值为2.567，P>0.05），支原体感染与高危型HPV感染差异有统计学意义（X2值为6.149，P<0.05）。解脲型支原体DNA负荷量与高危型HPV感染差异有统计学意义（X2值为4.335，P<0.05）。结论：解脲型支原体感染，混合型支原体感染与高危型HPV感染具有相关性，解脲型支原体是高危型HPV感染的高危因素。

【关键词】宫颈癌；高危型人乳头瘤病毒；解脲型支原体；人型支原体

在世界范围内女性所患癌症中，宫颈癌的发生率及死亡率均占第四位，而在欠发达地区，宫颈癌的发生率居于第二位，仅次于乳腺癌。目前己证明多数宫颈癌的发生与高危型人乳头瘤病毒（HPV）的持续性感染有关。支原体是一类缺乏细胞壁、具有高度多行性原核细胞型微生物。有研究发现，而在新生儿和成人单核细胞中，其中解脲支原体分离物可通过促炎CC趋化因子和基质金属蛋白酶-9促进炎症反应。

1 材料与方法

1.1 标本来源

随机选取2015年8月至2017年7月就诊于南京大学附属鼓楼医院共301例患者，年龄在17-62岁之间，平均年龄为32.48岁，并对所有患者进行高危型HPVDNA及支原体检测。

1.2 支原体检测

使用內窥器暴露出阴道及宫颈，用专用棉拭子擦拭宫颈管分泌物标本。按照试剂说明书提取支原体DNA，采用PE9700荧光定量PCR仪进行荧光定量检测。检测结果以支原体DNA负荷量≥1×103/ml时认为阳性（中山大学达安基因有限公司）。

1.3 高危型HPV检测

利用HC2-HPV-DNA专用取样刷采集宫颈脱落细胞，利用杂交捕获二代测序方法对高危型HPV-DNA进行检测，严格按照说明书进行操作（QIAGEN公司）。

1.4 统计学分析

采用SPSS 17.0统计软件，对分类资料采用卡方检验，P<0.05时认为差异具有统计学意义。

2 结果

（1）在301例就诊的患者中，解脲支原体感染数135例，高危型HPV阳性患者为21例，Uu阴性患者中高危型HPV阳性者有11例，其感染与高危型HPV感染相比较，差异有统计学意义（X2值为5.329，P<0.05）。人型支原体感染数57例，高危型HPV阳性患者为8例，其感染与高危型HPV感染比较，差异无统计学意义（X2值为0.857，P>0.05），同时感染Uu及Mh的患者有29例，其感染与高危型HPV感染比较，差异有统计学意义（X2值为6.149，P<0.05），见表1。

（2）将Uu DNA负荷量进行分组比较，其中解脲支原体DNA负荷量>10000患者有89例，高危型HPV阳性患者有18例，两组进行比较，差异有统计学意义（X2值为4.335，P<0.05），见表2。

3 讨论

支原体对人类造成感染的支原体主要有4种以上，其中最常见的是解脲支原体和人型支原体。由于支原体无细胞壁，对如青霉素类等多种药物无效，初始症状较轻，使其容易造成慢性或反复感染。当人体抵抗力低下等原因时，其通过不同的作用机制使粘附于粘膜细胞表明受体上的支原体造成组织损伤，从而使炎症加重，还可通过上行性感染途径引起女性盆腔炎、胎膜早破等，严重危害女性的健康。

人乳头瘤病毒属于双链环状DNA病毒，目前发现的型别超过150种。长期感染HPV后可使病毒基因整合宿主基因中，使宿主基因发生DNA甲基化，基因表达异常等，影响正常的细胞周期、凋亡过程，协同过早性生活、吸烟等环境因素及宿主遗传易感性等原因，使正常宫颈组织经过癌前病变后最终发展为浸润性宫颈癌。

本文就301例患者解脲支原体、人型支原体及HC2感染情况进行统计分析，发现解脲支原体感染与HPV感染有统计学差异，表明解脲支原体可协同促进HPV感染，这与Camporiondo MP研究相一致[6]。人型支原体感染与HPV感染之间无统计学差异，而同时感染解脲型支原体及人型支原体与HPV感染有统计学差异，由于本次随机抽取患者中人型支原体感染数较少，需进一步扩大样本量进行验证人型支原体对HPV感染宫颈是否起到促进作用。对解脲支原体DNA负荷量进行统计发现，其负荷量与HPV感染有统计学差异，进一步证明解脲支原体感染与HPV感染密切相关。目前对于宫颈不同类型感染与高危型HPV感染之间相互关系研究较多，努尔比亚·阿布拉等针对生殖道HPV与其他病原体感染关系的研究发现，HVP感染与解脲支原体感染密切相关，而与衣原体、阴道毛滴虫、假死酵母菌及细菌性阴道病无相关性，说明解脲支原体是HPV感染的高危因素。因此，通过进一步对患者生殖道病原体感染与HPV感染相关性分析，有效防治可促使HPV感染的高危性因素，从而降低HPV的感染，对于降低由HPV引起的良恶性病变具有重要意义。

（通讯作者：洪颖）

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