PCR技术在食品微生物检测中的应用

张昳

摘要：本文介绍了PCR方法的几种原理，主要就PCR技术的各种特性、检测速度、准确性、在食品微生物检测中的应用等进行分析讨论。

关键词：微生物检测;PCR;食品

聚合酶链反应就是常说的PCR技术，是由美国学者提出的一种特定DNA片段扩增的方法。因为该技术存在其特殊的性质特征，又不断应用于食品微生物检测工作中，因此，该技术的运用不但可以让食品微生物的检出率不断提高，更重要的是可以让微生物一些导致人类患病的安全隐患问题排除。

一、关于食品微生物的PCR检测技术

PCR的通用检测。PCR检测技术的原理非常简单，在DNA模板与其对应引物的混合物质当中添加适当的聚合酶，利用催化的DNA片段逐渐进行扩增，在此过程中主要是按照DNA模板来进行，并且需要通过各个周期，在这些周期内均会创造出各有差别的DNA片段，聚合酶链式反应的产物在此过程中会不断增加。其实，早在几十年前就有研究人员对沙门氏菌的基因进行设计，而研究过程也就是对PCR检测技术进行使用，在检测过程中，检测出的菌类极多，其检出率大约可达到99.5%左右。由此可知，PCR检测方式是可以大幅度推广的^[1]。

PCR的多重检测。PCR多重检测技术和以往的PCR检测技术具有较为相似的大量构成，在此当中，综合的反应体系应该由大量的引物构成，混合物内的引物主要呈现出互补关系。在反应罐内添加进种类各异的DNA片段，不仅能够令以往检测的特征仍然存在，还能够简化检测的流程，对更多的基因进行检测。不过，这种检测方式也存在一定缺点，比如敏感度、检测效率等，因此，需要较为客观的对问题进行分析。

在多年的发展中，各类学者以及专家都对其检测方式进行了研究，而其中最有典型意义的菌种就是沙门氏菌以及大肠杆菌。通过研究数据可以看出，其检测率大约在63%，具有一定的可行性。

RT-PCR。逆转录聚合酶联反应是其全称，原理是对细胞中的RNA进行提取并作为模板来进行CDNA获取，分析并作为模板来对PCR进行扩增，以较好地表示基因。大量的实验数据表明，该措施可以令检测的灵敏度有效增强，甚至还可以提高更多的数量级，使RNA样品的研究工作更加精确。RT-PCR检测方式在进行过程当中，大多数的检测对象都是动物的粪便或者是河流当中的样品，而经过检验可以得知，其中的菌体之间存在较多的区别。因此，在检测菌体情况的时候，特别容易识别噬菌体的属性究竟为阳性或是阴性。

二、PCR技术应用于食品微生物检测的优势

操作简便。微生物的检测工作涵盖多个领域，比如，微生物生长应用的培养基、微生物的生长环境PH值和生长温度等不同的因素，由于微生物的种类各异，为了对微生物和生理特性进行彻底观察，需要耗费过多的物力、人力以及财力，尽管有大量的时间和人力资源，但很难提高工作效率。而PCR技术就可以很好地解决这些问题。

检测快捷。用传统自动化检测技术检测微生物一般需要48小时96小时，甚至会达到7天或更久。但如果检测时间较久，总是会出现食品进入市场流转以致不能准确辨别检测结果等现象，给我国的食品实际生产造成滞后的后果，也对我国的经济发展和社会稳定造成一定影响。使用高自动化检测技术PCR就可以避免这一弊端，在短时间内就可以得到检测结果，通常仅仅需要几小时，较长的也仅仅需要一天便能结束。因此，高自动化检测技术PCR对我国的食品行业有着重大意义^[2]。

结果精准。食用微生物很难辨别，其中活性薄弱的细菌最难检测出来，并且通常情况下不仅检测不出，还很难培养。然而利用高自动化检测技术PCR能够详细地将食品微生物的种类检测出来，为我国的食品安全提供较大保障。

发展空间巨大。传统检测技术的生产效率落后，而PCR在现阶段属于高自动化技术，在各个方面都比传统的食品检测技术优势明显，对于我国的食品行业和食品市场都有重要意义。

三、结论

经过以上论述可知，高自动化检测技术PCR不光是对检测效率的提高，更重要的是可以让其中的精准度提高，从而让食品安全更有保障。笔者相信，随着时代的不断发展，我国的微生物检测技术还会不断提高、不断发展，并在生物学、免疫学等学科之中进行应用。

参考文献：

[1]陈诺，唐善虎，岑璐伽，等.多重PCR技术在食品微生物检测中的应用进展[J].中国畜牧兽医，2010，37（10）：72-75.

[2]李勤，盛占武，孙志高.实时荧光定量PCR技术在食品微生物检測和研究中的应用[J].食品与发酵科技，2006，42（5）：9-12.