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莲威阿那其颗粒剂抗炎镇痛作用的实验研究

2018-09-10夏尔巴提吾马尔金小越

世界中医药 2018年5期
关键词:镇痛抗炎实验研究

夏尔巴提?吾马尔 金小越

摘要目的:研究莲威阿那其颗粒剂对小鼠抗炎及镇痛作用。方法:采用小鼠热板法和醋酸扭体法,检测莲威阿那其颗粒剂的镇痛作用。采用小鼠耳廓肿胀法观察莲威阿那其颗粒剂的抗炎作用。小鼠随机分为5组,即空白对照组、莲威阿那其颗粒剂高、中、低剂量组、阿司匹林组。每组小鼠连续灌胃给药7 d后,观察莲威阿那其颗粒剂的抗炎、镇痛作用。结果:莲威阿那其颗粒剂能明显抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀,中、高剂量明显提高小鼠的痛阈,对小鼠醋酸扭体法和热板法致痛反应有较好的止痛作用。结论:莲威阿那其颗粒剂有明显的抗炎、镇痛疗效。

关键词莲威阿那其颗粒剂;抗炎;镇痛;小鼠;耳廓肿胀法;实验研究

Experimental Study on Antiinflammatory and Analgesic Effects of Lianwei Anaqi Granules

Xiaerbati·Wumaer1, Jin Xiaoyue2

(1 School of Pharmacy, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, China; 2 Department of Pharmacy,

the Sixth Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830002, China)

AbstractObjective:To investigate the antiinflammatory and analgesic effects of Lianwei Anaqi granules. Methods:The analgesic effect of Lianwei Anaqi granules was determined by hot plate test and acetic acid writhing test in mice. The antiinflammatory effect of Lianwei Anaqi granules was observed by ear swelling test in mice. Mice were divided into 5 groups randomly, namely blank control group, Lianwei Anaqi granules at high, medium and low doses groups, and Aspirin group. The antiinflammatory and analgesic effects of Lianwei Anaqi granules were observed after every group mice were orally given correspondence durg (ig) for 7 days. Results:Lianwei Anaqi granules could inhibit ear swelling caused by Xylene in mice markedly, and the high and medium doses of Lianwei Anaqi granules could increase pain threshold significantly. In the acetic acid writhing test and hot plate test, Lianwei Anaqi granules showed greater analgesic effects. Conclusion:Lianwei Anaqi granules have significant antiinflammatory and analgesic effects.

Key WordsLianwei Anaqi granules; Antiinflammatory; Analgesic;Mice;Ear swelling test;Experimental study

中图分类号:R2855文献标识码:Adoi:10.3969/j.issn.1673-7202.2018.05.039

莲威阿那其处方来源于新疆医科大学第六附属医院中医科,是我院传统中药自制制剂,主要针对“炎性反应”而立意组方,由雪莲、肉苁蓉、桑椹、阿那其根、骨碎补、鹿衔草、淫羊藿等12味药材组成,具有补骨通络、活血化瘀、祛风止痛之功效,可用于治疗各种原因引起的骨关节炎、椎间盘突出、外界损伤性炎性反应和肿胀。莲威阿那其处方以汤剂的剂型临床应用十几年来,疗效确切,取得了很好的治疗效果。本研究采用小鼠熱板法和醋酸扭体法考察了莲威阿那其颗粒剂的体外镇痛作用,并通过莲威阿那其颗粒剂对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀的影响考察了莲威阿那其颗粒剂的抗炎作用,为该药的临床科学用药提供安全性依据和药理试验研究基础。

1材料与方法

11材料

111动物健康昆明种小白鼠,雌雄兼用,体重(20±2)g,由新疆维吾尔自治区实验动物研究中心提供。饲养温度20~25 ℃,给予充分的标准饲料和饮用水。

112药物莲威阿那其颗粒剂:由新疆医科大学附属第六医院中医科制剂室提供,生产批号:150301;阿司匹林,由拜耳医药保健有限公司提供,生产批号:BJ32261,规格100 mg,人体临床用量:1片/次,1次/d。

113试剂与仪器乙酸:天津市致远化学试剂有限公司提供,生产批号:160701;二甲苯:天津市致远化学试剂有限公司提供,生产批号:160810。智能热板测痛仪、打孔器(6 mm)、计时器、AB135S电子天平(MettlerTeledo)。

12方法

121分组与模型制备冰醋酸扭体试验与耳廓肿胀法试验均选取健康,体重(20±2)g的小鼠50只,雌雄各半,随机分为5组,每组10只。热板痛阈试验筛选合格的雌性小鼠50只,随机分为5组,每组10只。

122给药方法根据《中药药理研究方法学》中计量换算方法计算试验中的小鼠给药剂量。在正常饲养基础上,每组灌胃给药1次,连续给药1周。第1组为空白对照组,灌胃生理盐水,20 mL/(kg·d);第2组为阿司匹林组,给药剂量为004 g/(kg·d);第3组委莲威阿那其颗粒剂高剂量组,给药剂量为81 g/(kg·d);第4组为莲威阿那其颗粒剂中剂量组,给药剂量为27 g/(kg·d);第5组为莲威阿那其颗粒剂低剂量组,给药剂量为09 g/(kg·d)。

123检测指标与方法

1231莲威阿那其颗粒剂对冰醋酸扭体法小鼠扭体次数影响试验于未测给药后1 h,各组小鼠腹腔注射11%冰醋酸001 mL/(g·d)。观察并记录20 min内小鼠扭体反应次数(表现为腹部内凹、躯干与后腿伸展、臀部高起)并计算扭体抑制率(%)。扭体抑制率=疼痛抑制率=(空白对照组扭体次数-给药组扭体次数)/空白对照组扭体次数×100%[12]。

1232莲威阿那其颗粒剂对热板痛阈时间影响试验5组雌性小鼠,分别放在(55±05)℃热板上测小鼠痛阈值(注:热板用前预热10 min)。痛阈值=自小鼠放在热板上至出现添足后所需时间(s)[34]。

1233莲威阿那其颗粒剂的小鼠耳廓肿胀法抗炎、镇痛作用试验末次给药后60 min,每鼠左耳正、反两面均匀涂抹二甲苯02 mL,致炎后60 min脱颈椎处死小鼠,沿耳廓基线剪下左右耳。用直径9 mm打孔器在左右耳相同部位打孔,于分析天平上立即称其质量(mg),以左、右耳片重量差为肿胀度,并计算小鼠耳片肿胀率。肿胀度=左耳耳孔片重-右耳耳孔片重,肿胀抑制率=(空白对照组肿胀度-给药组肿胀度)/空白对照组扭体次数×100%。

13统计学方法采用SPSS 210统计软件进行数据处理,计量资料用均数±标准差(±s)表示,采用t检验,以P<005为差异有统计学意义。

2结果

21莲威阿那其颗粒剂对冰醋酸扭体法小鼠扭体次数影响试验结果冰醋酸扭体实验结果表明,莲威阿那其颗粒剂能减少因冰醋酸引起的扭体反应,且随着计量的增加其作用增强,存在一定的量效关系。与空白对照组比较,莲威阿那其颗粒剂大、中,低剂量组差异有统计学意义(P<005),表明莲威阿那其颗粒剂有一定的镇痛作用。见表1。

表1莲威阿那其颗粒剂对醋酸诱发的小鼠

扭体反应的影响(±s,n=10)组别剂量20 min扭体次数扭体抑制率(%)空表对照组等容量4540±26阿司匹林組004 g/kg1130±33*7511高剂量组81 g/kg1450±350*6806中剂量组27 g/kg1750±322**614低剂量组09 g/kg2350±224**4823注:与空白对照组比较*P<005,**P<001

22莲威阿那其颗粒剂对热板痛阈时间影响试验结果在测定时间内,阿司匹林组,莲威阿那其颗粒剂高、中剂量组小鼠痛阈值随观察时间而发生变化,给药30 min后,莲威阿那其高、中剂量组镇痛作用表现明显(P<005),痛阈值明显延长,90 min内均有镇痛作用,60 min左右出现作用高峰期,与空白对照组比较30 min、60 min差异有统计学意义(P<005)。见表2。

23莲威阿那其颗粒剂对二甲苯胺所致的小鼠耳廓肿胀的影响试验结果莲威阿那其颗粒剂能抑制二甲苯致炎性反应引起的小鼠耳肿胀作用,莲威阿那其颗粒剂高、中剂量组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<005),但中、高剂量组疼痛抑制作用较阿司匹林弱,阿司匹林组疼痛抑制作用与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<001),结果表明莲威阿那其颗粒剂能抑制二甲苯致炎性反应引起的小鼠耳肿胀作用,对急性炎性肿胀具有抑制作用。见表3。

3讨论

莲威阿那其处方临床用于治疗椎间盘突出,骨关节的软骨、韧带等软组织的变形、退化、外界损伤性炎性反应和疼痛以及各种原因引起的骨关节炎的治疗[7],而这些病症都会出现不同程度的炎性反应和疼痛症状,运用《中华人民共和国药典》相关质量标准规定和现代药理学研究已经可以证实莲威阿那其处方中的多种中药成分具有较强的抗炎和镇痛作用,如处方中天山雪莲、桑葚、阿那其根、淫羊藿、诱骨草等药材在有效成分基础上具有补肾通络、活血化瘀、祛风止痛等功效[811],其中天山雪莲、阿那其根在维医药临床治疗中抗炎、镇痛作用明显。方中天山雪莲、桑葚、阿那其根、肉苁蓉等药材同时含有黄酮类、多糖和生物碱类成分,而多糖和芦丁等黄酮类化合物具有良好的抗炎、镇痛和活血化瘀作用[1214]。

小鼠热板法和醋酸扭体法是镇痛药物外周镇痛效果的评价和筛选中常用的经典模型,分别属于物理致痛法和化学致痛法,使用于观察药物对急性非特异性炎性反应的抗炎及镇痛作用,二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀试验观察外周镇痛药物对炎性反应早期的渗出和肿胀的影响。本研究中莲威阿那其颗粒剂的抗炎、镇痛药理学研究使用小鼠热板法和醋酸扭体法观察莲威阿那其颗粒剂的镇痛作用,以二甲苯作为小鼠耳廓致炎因子,观察了小鼠炎性反应早期的耳廓肿胀情况[1517]。

本研究中莲威阿那其颗粒剂的低剂量组的剂量是由人的常用剂量折算出来的小鼠给药剂量,其抗炎镇痛效果低于中、高剂量组,研究结果显示,莲威阿那其颗粒剂对化学致痛和物理致痛具有良好的镇痛效果,莲威阿那其颗粒剂高、中、低剂量组镇痛抑制率分别为6806%、614%和4823%,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<005),并且镇痛作用和剂量之间存在量效依赖性关系,中、高剂量能明显提高小鼠的痛阈值。小鼠耳廓肿胀试验结果表明,莲威阿那其颗粒剂中、高剂量对小鼠耳廓肿胀程度有良好的抑制作用,肿胀抑制率分别为4831%和2359%,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<005),抑制耳廓肿胀效果随剂量的增加而增强,但高剂量组的抑制作用相对阿司匹林组弱,能有效地对抗急性炎性反应引起的肿胀。

莲威阿那其颗粒剂的小鼠膜性实验结果对莲威阿那其颗粒剂的中医治疗理论上的抗炎、镇痛作用提供了试验研究基础,为该药的临床应用提供了药理学依据和指导。中药复方制剂成分多,成分之间的相互作用比较复杂,难以定性和定量,指令控制是一个难题,并且作用部位不一致,通过主要活性成分的药效研究也不能完全说明问题,莲威阿那其颗粒剂的抗炎、镇痛作用机制缺乏完整的依据。因此莲威阿那其颗粒剂的抗炎、镇痛作用和机制还需要进一步的去研究和探讨。

参考文献

[1]Pinto L,Borrelli F,Bombardelli E,et al.Antiinflammatory,Analgesic and Antipyretic Effects of Glaucine in Rats and Mice[J].Pharmacy & Pharmacology Communications,2011,4(10):502505.

[2]沙爱龙,段秀华,瓦依提,等.小新塔花水提物抗炎镇痛作用的试验研究[J].黑龙江畜牧兽医,2011,35(22):104105.

[3]Valério DA,Cunha TM,Arakawa NS,et al.Antiinflammatory and analgesic effects of the sesquiterpene lactone budlein A in mice:inhibition of cytokine productiondependent mechanism[J].Eur J Pharmacol,2007,562(12):155163.

[4]钟璐,纪宏宇,王树圆,等.乳癖消颗粒抗炎镇痛作用实验研究[J].中国药师,2015,18(1):149151.

[5]Mota MA,Landim JS,Targino TS,et al.Evaluation of the antiinflammatory and analgesic effects of green tea(Camellia sinensis)in mice[J].Acta Cir Bras,2015,30(4):242246.

[6]梁生林,梁瓊,钟卫华,等.荭草提取物抗炎镇痛作用实验研究[J].中草药,2014,45(21):31313135.

[7]金小越,帕提古丽·玉苏普,王华洋,等.莲威阿那其处方药材水提工艺优化[J].中国药房,2015,26(25):35513553.

[8]杨浩,佳娜提·达吾列提,金小越.阿那其根醇提取物对小鼠抗炎镇痛作用的实验研究[J].北方药学,2016,13(10):125125.

[9]翟科峰,段红,邢建国,等.天山雪莲提取物纯化前后各部位抗炎镇痛作用[J].中国医院药学杂志,2010,30(5):374377.

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