利肺片治疗稳定期支气管哮喘的临床疗效及对血清基质金属蛋白酶9表达的影响

魏恩垚 张文斌 李世川 陈果

（重慶市中医院呼吸内科，重庆，400011）摘要目的：观察利肺片治疗稳定期支气管哮喘的效果，并研究其对基质金属蛋白酶9（Matrix Metalloprotein9，MMP9）的干预效应。方法：选取2015年1月至2016年12月支气管稳定期患者60例，随机分为对照组和观察组，每组30例。2组患者均接受口服氨茶碱片，01 g/次，3次/d。观察组在此治疗基础上加用利肺片，2片/次，3次/d，2组均以20 d为1个疗程，疗程结束后比较2组患者中医证候积分、肺功能、哮喘指标复常时间以及血清MMP9。结果：2组单项及总的中医证候积分均较治疗前下降（P<005），观察组改善更明显（P<005）；观察组临床总有效率9000%，对照组临床总有效率7666%，差异有统计学意义（P<005）；3观察组患者哮喘指标的复常时间较对照组缩短，差异有统计学意义（P<005）；2组治疗后第1秒用力呼气肺容积（FEV1）、呼气峰流量（PEF）及第1秒用力呼气容积/用力肺活量（FEV1/FVC）均较治疗前改善（P<005），其中观察组改善得趋势更明显，与对照组比较，差异有统计学意义（P<005）；2组治疗后MMP9水平有所下降，与对照组比较，观察组治疗后MMP9水平更低（P<005）。结论：常规治疗基础上，利肺片可进一步缓解支气管哮喘病情，安全性高。

关键词呼吸道疾病；支气管哮喘；稳定期；利肺片；中医证候积分；肺功能；基质金属蛋白酶9；气道重塑

Clinical Curative Effects of Lifei Tablets on the Stabilization of Bronchial Asthma

and the Changes of Serum Level of MMP9

Wei Enyao， Zhang Wenbin， Li Shichuan， Chen Guo

（Department of Respiratory Medicine， Chongqing Traditional Chinese Medicine Hospital， Chongqing 400011， China）

AbstractObjective：To observe the effects of Lifei tabled on the stable phase of bronchial asthma， and to study the intervention effects on matrix metalloproteinases 9 （matrix metalloproteinMMP of 9） concentration.Methods：A total of 60 patients with bronchial in the stable phase who treated in our hospital included into the study， were randomly divided into the control group and the observation group， with 30 cases in each group.Two groups of patients both received aminophylline tablets， 01 g/time， 3 times/day.The observation group had Lifei tables based on the treatment on the basic treatment， 2 tablets/times， 3 times/day.Both groups had 20 days for a course of treatment.After treatment， TCM syndrome integrals， pulmonary function， asthma indexes and the changes of serum concentration of MMP – 9 of two groups were compared.Results：1） The single and general TCM syndrome integrals decreased in the two groups of patients than before treatment （P<005）， and the improvement of the observation group was more significantly （P<005）； 2） The clinical total effective rate of the observation group was 90%， and 7666% in the control group.The differences were with statistically significant （P<005）； 3） The recovery time of patients with asthma in the observation group was shortened than the control group， with statistically significant differences （P<005）； 4） forced expiratory volume （FEVl）， peak expiratory flow （PEF） and 1st second forced expiratory lung forced vital capacity （FEVl/FVC） improved in the two groups after treatment （P<005）， and the improved trend of the observation group was more obvious.The control group were with statistically significant differences （P<005）； 5） Detected by ELISA test， MMP9 levels decreased after treatment in the two groups of children， and the observation group had lower levels of MMP9 after treatment compared with the control group （P<005）.Conclusion：Based on conventional treatment， the Lifei tablets can further relieve state of bronchial asthma， with high safety， which is recommended in the clinical application.

Key WordsRespiratory disease； Bronchial asthma； Stable phase； Lifei tablets； TCM syndrome integral； Lung function； MMP9； Airway remodeling

中图分类号：R2895；R562文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2018.05.030

支氣管哮喘是临床常见的呼吸科疾病，其病因与发病机制目前尚无统一定论，多发于季节交替阶段。目前现代医学治疗该病的主要手段主要是支气管扩张剂及糖皮质激素，虽然此类药物在一定程度可缓解病情，但亦存在不良反应、激素依赖等劣势[12]。支气管哮喘属于中医学“哮病”范畴，以辨证论治为核心原则对支气管哮喘患者进行个体化治疗，具有效果显著、安全性高的优势。传统中医认为痰气搏结，壅堵气道，肺络不通是本病的主要病因，长期发作则痰热灼伤肺肾津阴，由实致虚，故肺肾两脏摄纳失司而成本病，在长期临床病历研究中我们亦证实肺肾两虚型哮喘是发病率最高的哮喘中医证型，因此补肺益肾应为治疗本病之核心原则[3]。

利肺片是百部、百合、五味子、枇杷叶、白及、牡蛎、甘草、冬虫夏草、蛤蚧，具有补肾纳气，益肺化痰之功效。此药用于哮喘乃秉承补虚不忘邪实，虚实同治的病机特点，治疗哮喘稳定期的经典组方。活化的基质金属蛋白酶9（Matrix Metalloprotein9，MMP9）主要由中性粒细胞及巨噬细胞分泌合成，是气道炎性反应过程的重要参与者[4]，现代医学认为支气管哮喘是气道慢性炎症发生发展过程。利肺片治疗支气管哮喘（肺肾两虚型）的疗效是否MMP9相关。基于此，我们对本院60例支气管哮喘进行治疗观察。

1资料与方法

11一般资料选取2015年1月至2016年12月门诊患者60例，随机分为对照组和观察组，每组30例。观察组中男16例，女14例，年龄38～66岁，平均年龄（5052±1252）岁，病程35～20年，平均病程（1451±799）年。对照组中男17例，女13例，年龄40～65岁，平均年龄（4927±1301）岁，病程4～18年，平均病程（1501±763）年。2组患者在年龄、性别、病程等一资料比较，差异无统计学意义（P>005），具有可比性。

12诊断标准

121西医诊断标准参照2008年中华医学会呼吸病学分会哮喘学组颁布的《支气管哮喘指南》中关于哮喘的诊断标准：1）反复发作的喘息、气急、胸闷或咳嗽，多与接触变应原、冷空气、化学性刺激、病毒性上呼吸道感染、运动等有关；2）发作时双肺可闻散在或弥漫性的，以呼气相为主的哮鸣音，呼气相时间延长；3）喘息、气急、胸闷或咳嗽等相关症状可自行缓解或经一定干预措施治疗后缓解；4）排除其他疾病导致的喘息、气急、胸闷或咳嗽等症状；5）临床症状不典型者（如无明显喘息或体征），应至少具备以下1项试验阳性：支气管激发试验或者运动试验阳性；支气管舒张试验阳性（FEV1增加≥12%），且FEV1增加绝对值≥200 mL；呼气流量峰值（PEF）日内（或2周）变异率≥20%。具有1）至4）或4）5）者即可诊断为支气管哮喘[5]。

122中医诊断标准参照《中医内科学》中关于肺肾两虚型哮喘的诊断标准：1）面白，气短神疲，动则气喘，自汗怕冷；2）眩晕耳鸣，腰膝酸软；3）舌淡，苔薄腻，脉弱或濡[6]。

13纳入标准1）符合12诊断标准者；2）年龄25～75岁者；3）对本研究知情同意并签署知情同意书。

14排除标准1）合并心脑、肾、肝脏等重大脏器病变者；2）近3个月内参与其他研究项目者；3）有全身严重感染疾病者；4）处于妊娠或哺乳期妇女。

15脱落与剔除标准1）在治疗过程中因故中途退出者；2）随访中自然脱落者；3）治疗过程出现明显不良反应者；4）依从性差者。

16治疗方法2组患者均口服氨茶碱（杭州民生药业集团有限公司，国药准字号H33021655），规格：01 g/片，01 g/次，3次/d。观察组在此治疗基础上加用利肺片（长春海外制药集团有限公司，国药准字Z22021032），2片/次，3次/d。2组均20 d为1个疗程。

17观察指标

171中医证候积分参考《中药新药临床研究指导原则》关于哮喘疗效评定方法相关泪光，采用积分的方式对对哮喘各类症状进行评价，每个症状分4级（无、轻、中、重），每级分别对应0、1、2、3分。

172肺功能检测应用肺功能仪（型号：Sensor Medics Ros System，荷兰飞利浦公司）检测肺功能相关指标，包括第1秒用力呼气容积（FEV1）、呼气峰流量（PEF）及第1秒用力呼气容积/用力肺活量（FEV1/FVC）。

173哮喘指标复常时间观察2组患者喘息、气急、胸闷、咳嗽、哮鸣音等症状体征的恢复时间。

174外周血MMP9水平采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对MMP9水平进行检测，具体步骤如下：将稀释的样品01 mL加入反应孔中，置于37 ℃下孵育60 min，用PBS冲洗，同时设置空白孔、阴性对照孔及阳性对照孔。随后于各孔中加入酶标抗体01 mL，置于37 ℃下孵育60 min，用PBS冲洗。表12组中医证候积分比较（±s，分）组别气短神疲眩晕耳鸣腰膝酸软总积分对照组（n=30）治疗前218±037238±062231±0272755±624治疗后124±023*167±029*135±031*1219±322*△观察组（n=30）治疗前214±039231±059228±0382861±591治疗后112±018*△104±011*△113±018*△1917±419*△注：与本组治疗前比较，*P<005；与对照组治疗后比较，△P<005

随后将TMB底物溶液加入各孔进行反应，置于37 ℃下孵育30 min。后于酶标仪中测定塑胶盘中的吸光度（A值），以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。

18疗效判定标准将临床疗效分为治愈、显效、有效、无效4个级别，其中治愈：治疗后哮喘相关症状6个月内未发作或与往年同期相比未复发者；显效：治疗后哮喘相关症状6个月内发作次数减少2/3者；有效：治疗后哮喘相关症状6个月内发作次数减少1/3者；无效：治疗后哮喘相关症狀没有缓解，甚至恶化者[7]。

19统计学方法治疗结束后将被研究收集的所有数据输入计算机，采用SPSS 180统计软件进行分析处理。符合正态分布的计量资料用（±s）表示，并用t检验；不符合正态分布的资料行秩和检验，计数资料组间比较用χ2检验，以P<005为差异有统计学意义。

2结果

212组中医证候积分比较2组患者总积分及单项积分均较治疗前下降（P<005），观察组改善更明显（P<005）。见表1。

22临床总有效率比较观察组临床总有效率高于对照组临床总有效率，差异有统计学意义（P<005）。见表2。

23哮喘指标的复常时间比较观察组患者喘息、气急、胸闷、咳嗽、哮鸣音等症状体征的复常时间较对照组短，差异有统计学意义（P<005）。见表3。

242组肺功能比较2组治疗后FEV1、PEF及第1秒用力呼气FEV1/FVC均较治疗前改善（P<005），其中观察组改善更明显，差异有统计学意义（P<005）。见表4。

252组外周血MMP9比较2组患者治疗后MMP9水平有所下降，与对照组比较，观察组患者治疗后MMP9水平更低（P<005）。见图1。

3讨论

支气管哮喘属于中医学“哮病”，是一种发作时喉中有哮鸣音伴呼吸急促的气喘性疾病。痰是本病的主要病理产物，痰伏于肺，诱发而作，痰气搏结，拥堵气道，遏制肺气升降，气机不通而发为此病。久病迁延不愈耗伤肺肾之阴，疾病由实证转虚，故多数稳定期支气管患者存在面白，气短神疲，动则气喘，自汗怕冷；眩晕耳鸣，腰膝酸软等肺肾两虚的症状，因此治疗时因以补肺益肾为根本。而这一治疗原则与元代医家朱丹溪的“未发以扶正气为主，既发以攻邪气为急”理念一致。

本研究对60例支气管哮喘稳定期患者进行治疗，对照组患者均接受常规扩张支气管药物治疗，虽病情在一定程度可缓解，但是加用利肺片的观察组患者不论是在降低中医证候积分、改善肺功能等方面均明显优于单纯使用西药的对照组，这说明利肺片可明显改善肺肾两虚型支气管哮喘稳定期患者的病情，与西药具有促进协同效应。利肺片是由百部、百合、五味子、枇杷叶、白及、牡蛎、甘草、冬虫夏草、蛤蚧组成的具有补肾纳气，益肺化痰之功效的经典中成药。方中冬虫夏草是君药，该药首载于清代医家吴仪洛《本草丛新》一书，认为其具有补肺益肾，化痰止咳之功，是治疗久病虚喘之要药。现代药理学研究发现冬虫夏草含有核苷类物质、氨基酸等物质，可作用于机体免疫系统，发挥消炎、抗氧化的功能，同时还可直接作用于支气管平缓肌，通过舒张支气管平滑肌达到缓解哮喘的目的。有研究通过动物实验发现，冬虫夏草提取物可有效抑制COPD模型大鼠气道腔中被激活的炎性细胞，减轻气道壁血管通透性，减少炎性分泌物数量，缓解气道痉挛[89]。蛤蚧是利肺片中臣药，具有补肺益肾，定喘止嗽，其对肺气虚衰疗效理想，正如《本草衍义》中提到：“补肺虚劳嗽有功”。李时珍在《本草纲目》中视蛤蚧功同人参，有补肺止渴之作用。在利肺片中与冬虫夏草合用共奏补肺益肾、纳气平喘。方中五味子味酸，即可上敛肺气又可下纳肾气，可实现重新肺肾两虚而致的哮喘患者宣发肺气，收纳肾气。与冬虫夏草及蛤蚧合用，可加强肺肾两脏气机宣通，止咳定喘。方中白及乃敛肺止血之要药，百部可温润肺气，止咳平喘，正如《药性论》称其“治肺家热、上气咳逆，主润益肺”。现代药理学研究发现百部有镇咳祛痰之功效，对支气管平滑肌有松弛的效应[10]。百合有滋阴润肺之功，根据脏腑特点，肺脏有“肺喜润而恶燥”之特性，故加用百合可迎合肺脏之特性而发挥治疗效果。枇杷叶有清肺止咳，和胃利尿，止渴的功效作用，《本草经解》中明确指出，枇杷叶入手太阴肺经，可化顽痰，散喘息，对肺系疾病有良好的治疗的效果，现代药理学亦发现，枇杷叶有显著的抗菌消炎作用，并可减轻气道壁血管通透性，减少炎性分泌物而有效治疗哮喘。牡蛎为本方的重镇之品，即可安神又可软坚散结，痰乃哮证的主要病理产物，常伏于肺，使用牡蛎可消散哮喘患者体内老痰，正合肺肾两虚型哮喘患者夹杂宿痰的特点[11]。甘草可缓解诸药药性，又可补益和中，润肺止咳。全方虚实兼顾，扶正固本，与肺肾两虚型哮喘稳定期“虚症为主，夹杂顽痰”的疾病特点相呼应。

在对作用机制的进一步分析中我们对2组患者外周血MMP9水平进行检测，结果发现经过一定干预措施治疗后，2组患者MMP9均有不同程度下降，其中观察组下降的趋势更为明显。MMP9属于MMP家族重要的明胶酶，广泛参与机体平滑肌细胞增殖等过程，且在气道重塑环节中亦有重要地位。有研究显示，MMP9分布于多种肺内组织及炎性细胞，MMP9可通过活化相关细胞因子的前体而促进平滑肌增厚，从而诱导平滑肌细胞增殖，导致气道重塑[1214]。因此降低MMP9是抑制气道重塑的有效途径。基于此，我们认为利肺片有效抑制了支气管哮喘稳定期患者MMP9水平，这可能是该药发挥治疗效果的有效机制之一。

参考文献

[1]汤壮飞，刘俊，林才毓.扎鲁司特联合布地奈德治疗支气管哮喘急性发作80例[J].中国药业，2012，21（5）：7980.

[2]莫永跃，沈瑛，周旭明，等.布地奈德混悬液雾化吸入治疗支气管哮喘急性发作的疗效观察[J].中国医药指南，2013，11（9）：224225.

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[4]王萍，秦晓群.基质金属蛋白酶9与支气管哮喘[J].医学临床研究，2007，24（3）：507509.

[5]中华医学会呼吸病学分会哮喘学组.支气管哮喘防治指南（支气管哮喘的定义、诊断、治疗及教育和管理方案）[J].中华结核和呼吸杂志，2003，26（3）：132138.