探讨血细胞分析仪计数血小板的影响因素
2018-08-24龚凤
龚凤
(内江骅康医院 四川 内江 641100)
血细胞分析仪提高了临床检验效率,在检测大量实验参数的基础上,还能保证检验结果的准确性。然而,通过血细胞分析仪计数血小板,仍然会受到多种因素的影响,造成检验结果不准确。我院用显微镜、血细胞分析仪两种方法计数血小板,并比较了计数结果,以期为临床诊断提供科学的参考依据,现做出如下报告。
1.材料与方法
1.1 材料
全自动血细胞分析仪XS-500i(希森美康医用电子上海有限公司生产)及其配套试剂。干扰标本96份,平均分为A、B、C三组。
1.2 方法
根据血细胞分析仪的计数原则,将96份干扰标本进行如下分组:A组、B组、C组标本的后峰翘起始处分别是>25fl、20~25fl以及<20fl。分别应用血细胞分析仪与显微镜对三组标本进行血小板计数,比较计数结果以及正常、异常血小板直方图的血小板情况,包括大血小板、血小板聚集、显微镜计数以及血细胞仪计数。
1.3 统计学方法
本研究应用SPSS19.0统计学软件进行处理,计量资料以(±s)表示,组间比较采用t检验,计数资料以率(%)表示,组间比较进行χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1 血细胞分析仪与显微镜计数血小板结果比较,见表1
表1 血细胞分析仪与显微镜计数血小板结果比较(×109/L,±s)
表1 血细胞分析仪与显微镜计数血小板结果比较(×109/L,±s)
计数方法 A组(n=32)B组(n=32)C组(n=32)血细胞分析仪 155.13±40.86 208.15±49.63 256.98±61.27显微镜 152.27±39.64 177.28±41.54 168.54±45.65 t 1.2383 17.5692 17.1847 P>0.05 <0.05 <0.05
2.2 正常、异常血小板直方图的血小板情况比较,见表2
表2 正常、异常血小板直方图的血小板情况比较
3.讨论
3.1 影响血小板计数的因素分析
3.1.1 小红细胞对血小板计数的影响 A组标本的后峰翘起始点>25fl,在血小板计数体积的范围之外,所以分析仪无法将标本中的小红细胞计入血小板中。B组、C组后峰翘起始点分别是20~25fl和<20fl,虽然分析仪通过浮动界标区分标本的红细胞与血小板,然而标本内的小红细胞数量明显多于血小板,纵然血小板中混入了很小一部分小红细胞,同样会影响血小板计数,而且后峰的左移程度越明显,后峰翘越高,对血小板计数的影响就越大[1]。
3.1.2 试剂质量对血小板计数的影响 如果溶血素、稀释液没有按照要求过滤,或者受到污染,则会增加血小板计数的假性。在使用血细胞分析仪进行本底检测时,若发现本底较高,则应彻底清洗,让本底保持正常范围。
3.1.3 药物对血小板计数的影响 资料显示[2]:患者输注了脂肪乳后,会对血小板计数产生影响,因为血小板的直径与脂肪乳剂的脂肪乳颗粒直径十分相似,所以输注后会造成血小板假性升高现象。如果对使用了脂肪乳剂患者进行血小板计数,尽量在5~6h检测,若计数水平仍然过高,要在第一时间联系临床医生,并经过血片观察后,再报告血小板计数结果。
3.1.4 标本溶血对血小板计数的影响 溶血现象破坏了红细胞,使其计数减少。遭到破坏后,红细胞会形成大小不一的碎片。分析仪会把碎片判断成血小板,导致血小板计数增加。
3.1.5 弥散性血管内凝血(DIC)对血小板计数的影响 对DIC患者实施手工计数、仪器计数,其结果差异很大。后者计数高于前者。主要是因为溶血后形成的红细胞碎片,会对分析仪计数血小板造成正向干扰[3]。血小板直方图显示血小板的低鉴别线度数与分布宽度均高于规定值。DIC患者早期便会出现血管溶血现象,而血小板计数是临床诊断DIC的重要参考指标[4],对于疑似DIC患者的血液标本应采用手工方法计数血小板。
3.1.6 抗凝剂对血小板计数的影响 血细胞分析仪使用的抗凝管中是定量的ED-TA-K2水溶液[5],一旦采集血液量不标准,就会破坏血液和抗凝剂之间的比例。如果血液量太少,那么水溶液则会稀释血液,导致血小板计数减少。反之,血浆内会出现凝集,不仅造成血小板计数减少,而且会使之凝聚。此外,采集血液后没有充分摇晃抗凝管,导致凝块出现,同样会影响血小板计数结果。特别是对于体积小,不容易发现的凝块,因为分析仪会选择性的吸入血浆多的血液[6],所以血细胞一旦减少,血小板计数也会减少,与之有关的参数也会发生变化。因此,采集血液标本后,应立刻摇晃抗凝管,不能使用草酸盐抗凝剂,否则会造成血小板聚集,影响白细胞的形态,从而影响血小板计数,也不便于白细胞分类。肝素则会使血小板与白细胞聚集减少,使用肝素后,如果标本放置时间过长,同样会凝固。由此认为:肝素、草酸盐会降低血小板计数,都不适合用于血细胞分析。
3.2 加强血细胞分析仪计数血小板的质量控制
3.2.1 检测前 加强检验科工作人员的培训,学习标本采集方法、仪器的校正和鉴定方法、质量控制方法等。血小板直方图之所以会出现异常,根本原因是不合格的血液标本造成的[7]。在血小板计数过程中,合格的血液标本是提高计数准确度的重要因素。检验人员应和临床护理人员积极沟通,明确告知对血液样本的要求。
(1)采集标本时,抽血要流畅,保证准确的抗凝剂与血液比例;当血液注入硅管后,应充分颠倒,摇晃均匀,以免血液凝集。(2)采集血液时,指导患者统一姿势。(3)止血带压迫止血的时间应<1min[8]。(4)在临床检查、治疗前进行采血。(5)对于输液患者,应采集非输液手臂的静脉血。
3.2.2 检测中 严格按照规范标准操作仪器,在仪器运转过程中,仔细观察运转状态及各个环节,减少外界环境对仪器造成的干扰,避免病理因素影响血细胞分析仪的正常使用。每天检测仪器的精密度、准确度。
3.2.3 检验后 加强检验人员工作责任心的培养,保证完成复核程序后再报告计数结果。对于肿瘤放化疗、白血病患者普遍存在血小板减少的情况,在使用分析仪检测后,必须用显微镜再次检测和计数。若患者没有血液疾病,但表现为血小板直方图异常,血小板计数减少,则应告知护理人员,重新采集标本复查。