基层医院孕妇血型鉴定与抗体检测分析

李小红

(濮阳市妇幼保健院输血科，河南 濮阳 457000)

血型抗体存在 “天然抗体”和免疫性抗体两种。输血、妊娠是产生同种免疫抗体的主要原因。在临床上，除了ABO、Rh血型抗体外，其他如Kell、Duffy、Kidd等血型系统也有报道，但不常见。孕妇比较容易产生血型抗体，它常引起免疫溶血性输血反应(HTR)和新生儿溶血病(HDN)的发生。本文通过分析濮阳地区血型ABO正反不一致、不规则抗体及弱D等情况以探讨在基层妇幼医院围产期孕妇血型鉴定与抗体检测的重要性，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源 选取2013年至2016年在本院门诊及入院待产孕妇为研究对象，根据知情同意原则分别采集不抗凝血3ml和EDTA抗凝血2ml。

1.2 主要试剂 ABO红细胞、抗-A、抗-B、抗-D血清、抗球蛋白试剂、抗体筛选红细胞及鉴定谱细胞（上海血液生物医药有限责任公司）；抗球蛋白微柱凝胶卡（长春博讯生物技术有限公司）；所有试剂都在有效期内。

1.3 方法 血型ABO正反定型、RhD血型、ABO血型亚型确认试验、不规则抗体筛选与鉴定试验、间接抗人球蛋白试验及吸收放散试验，依照文献[1]，严格按试剂说明书操作。

2 结果

2.1 ABO血型正反定型不一致6例，其原因分布见表1。

2.2 检出112例RhD阴性，确认2例弱D，共检出19例不规则抗体阳性。其中抗-D14例 （73.7%），抗-E 4例（21.1%），抗-C 1例（5.2%）。

3 讨论

ABO定型错误将造成严重的输血后果，可能威胁患者的生命。只有正确进行ABO血型的定型，才可能保障输血的有效性和安全性。排除人为因素，出现ABO血型正反定型结果不一致的原因可能是技术问题或是被检者自身ABO抗原或抗体存在问题。如表1中，均由于正反定型不一致而发现的问题，并进一步查找原因。如果抗体只是减弱，反定型可以通过增加反应时间或加大血清量并在4℃下放置5～10min后再进行试验。由于ABO亚型的红细胞抗原性减弱，抗-A或抗-B的实际有时不能检出其抗原性，造成定型的困难。吸收放散试验是敏感的血清学方法，可以用来检测抗原，也可以用于检测抗体，在条件有限的基层医院，灵活运用吸收放散试验鉴定ABO血型。血型正反定型不符的原因可以是亚型引起，也可以是由IgM性质的不规则抗体（如抗-M，-N，-P）。表1中，病例编号4，6分别是抗-M和冷凝集素引起的正反定型不一致。抗M抗体是MN血型系统中的一种血清抗体。在血型鉴定正反不合以及交叉配血不符合时常被发现[2，3]。当怀疑存在冷自身抗体时，要把患者红细胞用温盐水洗涤3遍，然后再做常规ABO血型正反定型检测[4]。冷凝集素是冷反应性红细胞抗体[5]，一般置37℃温育均能散开。

表1 6例血型正反定型不一致血清学结果及原因分析

当工作中遇到正反定型不符时，考虑亚型还是不规则抗体引起，可根据反定型中O细胞和患者的血清反应格局做出初步判断，当O细胞和患者的血清无凝集时考虑是亚型，反之则考虑不规则抗体。同时做自身红细胞做对照，以确定自身抗体的干扰。

不规则抗体是指红细胞ABO血型抗-A、抗-B和抗-AB以外的其他血型抗体，多为IgG抗体，是临床输血引起免疫性溶血性输血反应和新生儿溶血病的重要原因之一[6]。本调查中19例检测出Rh系统的抗体，这19例孕妇分娩前备血必须选用红细胞不含相应抗原的血液。大量研究表明，红细胞血型不规则抗体是输血无效及溶血性输血不良反应的主要原因[7，8]。她们分娩的新生儿高度警惕发生Rh-HDN。Rh-HDN是由Rh血型系统抗体引起的，Rh血型抗体是由妊娠或输血产生的同种异型免疫抗体。在临床工作中，孕妇做抗体筛选非常有必要，有妊娠史(包括流产史)、输血史的母亲再次妊娠时，应该特别注意Rh-HDN[9，10]。Rh血型系统能够引起HDN的除D外还有C、c、E、e，以D抗原不合最为常见。实验室常规检测中，当在盐水介质中反应为阴性，间接抗人球蛋白试验（IAT）为阳性时可认为弱D表现型（包括弱D和部分D），但其不能区别弱D或部分D[11]。本文中2例弱D或部分D，其备血或输血都以RhD阴性对待。RhD阴性孕妇一般在整个孕期要定期检测不规则抗体及抗体效价，对已有不规则抗体产生者，为了避免胎儿在母体继续遭受侵害，需择期住院，尽早分娩。有研究表明，体血液循环中胎儿红细胞的出现率为6-7%，晚期可达30%，在这种情况下，大约有5%-7%的RhD阴性孕妇产生抗体，妊娠次数的增加在抗-D抗体的产生中具有相当重要的意义[12，13]。本文中抗-E产生的比例也不低，这与文献相一致的[14]，我国人群中Rh(E)阴性频率远远高于Rh(D)阴性的频率，而Rh(E)抗原又是Rh血型系统中除Rh（D）之外最强的抗原，Rh(E)阴性者因妊娠接受Rh(E)抗原刺激后容易产生抗-E[15]。故抗体筛查应列入常规检查项目。

产科出血大多为大量急骤性的出血，如果失血量达到一定程度时，发生弥漫性血管内凝血、休克等严重并发症。一旦发生产科出血，除采取积极有效的治疗措施，科学有效地对产科大量出血患者实施输血，以提高患者生存率和生存状态是至关重要的。故孕妇正确的血型抗体鉴定在孕期开展并记录，以避免分娩时紧急输血配血困难。实验室采用多种法进行抗体筛查，保证血型抗体的检出率。对于正反定型不符必须引起重视，检验人员应当做好记录、分析原因、通过相关试验准确及时鉴定ABO血型以确保临床用血安全。实验室制定并严格遵守血型正反定型不一致、不规则抗体筛查等标准操作流程，条件相对薄弱的地区医院也可将标本送至上一级血型参比实验室检测。尽可能避免血型抗体漏检，减少医疗事故的发生。