肉鸡球虫病疫苗喷雾免疫

朱金平 福建圣农有限公司 福建光泽 354100

关健词 喷雾免疫 卵囊 预防

由于近年来鸡球虫病越来越严重，造成巨大损失，当前主要防治球虫病有化学合成和抗生素两大类药物。但随之而来的是越来越多球虫耐药性、药物残留、费用增加、生态环境污染等问题。所以，不得不寻求新的有效方法来预防鸡球虫病。使用鸡球虫病疫苗不仅能解决球虫的耐药性问题，而且对减少药物残留、改善鸡肉品质均有重要作用。

在福建圣农有限公司挑选两个平养肉鸡饲养场做球虫病疫苗试验，试验一场用某上市公司球虫病疫苗，做肉鸡1日龄喷雾免疫试验，试验二场用另一家上市公司球虫病疫苗，做4日龄拌料免疫试验。每个场随机选取两栋（每栋3万羽），在免疫完成5 d后开始指定人员采集鸡粪，每两天采集一次，2周龄内每份至少50 g，2周龄以上每份至少100 g，或至少50～100坨粪便；要求随机、新鲜、完整(包含各种粪便类型)、干净（少或无垫料），以保证采样具有代表性为原则，鸡粪采集好，用冰袋冷藏好送至实验室检测。姚惠娟等试验表明，球虫病疫苗在4℃条件下保存12个月，仍保持较高的活性和免疫力；在低温冷冻和高温条件下，球虫病疫苗的卵囊活性和免疫力都受到不同程度的破坏，尤其是低温冷冻，免疫力几乎丧失[1]。

1 材料与方法

1.1 材料 生物显微镜、100 mL量筒、分析天平、麦克马斯特计数板、移液器、药匙、饱和盐水。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 将粪便搅拌混合均匀，成糊状,用分析天平准确称取5 g粪便,加入到45 mL水中（稀释10倍），混合均匀；立即用移液器取1 mL粪水加至4 mL饱和盐水中（稀释5倍），混合均匀；立即用移液器取粪液，加入改良麦克马斯特计数板的计数池,静置5 min；在生物显微镜10×10倍镜下，观察计数板每个小格中的球虫卵囊数，总计100个小格的卵囊数 （A）；计数池容积为1×1×0.15=0.15 mL；0.15 mL 内含粪便[5/（50×5）]×0.15=0.003 g；则每克粪便中的卵囊数为：OPG=A/0.003=A×333。

1.2.2 试验方法

1.2.2.1 免疫方法 免疫前，先检查疫苗外观，记录批号及有效期，检查合格的疫苗才可使用，禁止使用结冰的疫苗。用专用喷雾机器喷射均匀且细小的雾滴，使免疫覆盖率达到100%（用胭脂红染料染色检验），由于球虫卵囊比水重，容易沉于水的底部，因此，喷雾时必须将虫卵搅拌均匀以保证免疫质量。待对雏鸡喷雾免疫完毕，及时将鸡移至明亮度达到100 Lux以上的区域，让雏鸡在强光照射的刺激下，相互间啄食羽毛上的球虫病疫苗，进一步完成球虫免疫过程；如此让小鸡相互啄食约30～40 min。等待雏鸡羽毛完全干燥后，再将雏鸡装车运送至饲养场。拌料免疫用喷雾器喷洒，将疫苗与饲料搅拌均匀，然后加入开食盘内供鸡群采食，同时多次赶动鸡群，促使鸡群采料，确保鸡群能均匀地采食疫苗。

1.2.2.2 饲养场管理 垫料的湿度对球虫的繁殖发育非常重要，垫料的最佳湿度应保持在25%～30%，判断方法是用手抓一把垫料，把手松开，手心感觉有点潮[2]。垫料太干，易导致球虫卵囊不能孢子化，不能均匀、持续地对鸡群进行免疫，导致不能建立免疫力，后期易感染球虫引发球虫病。垫料太湿，球虫卵囊孢子化过多，可能因鸡群还未建立免疫力而引发球虫病。在免疫期间，如果垫料过干，可以带鸡喷雾消毒，既满足消毒防疫又满足湿度要求；如果垫料过湿，可以适当翻动垫料，保证垫料疏松无结饼现象，必要时可添加干燥、干净垫料，满足球虫适宜的繁殖发育要求，使鸡群能良好而快速地建立免疫力。饲养前3周内禁止使用抗球虫药，防止免疫失败。

2 试验结果

试验一场7月8日进鸡，由表1可见，两栋鸡舍均有波浪形排卵高峰期，H1栋OPG最高峰值在20日龄，H2栋OPG最高峰值在26日龄，随后排卵数迅速下降。在23日龄，两栋鸡舍均发现有血便，进鸡舍检查，一个来回有10～12坨血便。根据采食、饮水、鸡群状况、死淘率等因素综合评定，该现象为个别现象，没有用药，后期也没有因球虫病而出现的高死亡现象。

表1 试验一场OPG检测情况

试验二场7月8日进鸡，由表2可见，两栋鸡舍均有波浪形排卵高峰期，OPG最高峰值均在27日龄，随后排卵数也迅速下降。在24日龄发现30%死淘鸡有肌肉苍白、盲肠出血现象。为防止球虫病导致的损失，有使用球虫药进行预防治疗。

3 分 析

表2 试验二场OPG检测情况

鸡球虫的繁殖发育包括孢子生殖、裂子生殖和配子生殖三个阶段。球虫感染过程是卵囊在适宜的温度和湿度下，经过1～2 d发育成为具有感染性的孢子化卵囊；被鸡采食后，子孢子游离出来，钻入肠道上皮细胞内发育成裂殖子，裂殖子在肠道上皮细胞内进行有性生殖和无性生殖，损害了肠道上皮细胞，引起鸡体发病，肠道出血，并随粪便排出。球虫卵囊的繁殖率极高，1个卵囊经1周左右的时间就可产生数十万个卵囊[3]。球虫卵囊对外界环境及常用消毒剂有极强的抵抗力，一般消毒剂不易破坏，在土壤中可存活4～9个月[4]。因此，鸡舍内球虫卵囊很难清除干净，等到环境适宜其繁殖发育的条件时便侵袭鸡群。

试验一场与试验二场饲养管理要求、饲养设施基本一样，最大的区别在于试验一场有控制给料而试验二场没有。试验一场有血便可能是因为该场有控制给料，且控料时间较长，鸡群由于饥饿，啄食垫料，感染的机会增加，发病率提高[5]；也可能是由于个体差异，每羽鸡的采食量不同，摄入的孢子化卵囊必然也不一样，如果采食的虫卵过多，便容易引发球虫病。试验二场球虫病压力较试验一场大，可能是因为试验二场鸡舍内较湿，环境适合球虫的繁殖发育，从而导致球虫卵囊排出量较多，增加了球虫的致病率。

4 结 论

本次喷雾免疫测试结果，卵囊数较少，可能与鸡舍较干燥有关。从饲养期鸡群状态、肠道粪便观察及死淘量等综合情况分析，本批鸡喷雾免疫试验取得良好的效果。根据OPG检测结果可以看出，鸡群在免疫后均会产生波浪形排卵，鸡龄越大，卵囊数量就越高，主要是由于球虫在大鸡中比在小鸡中更易脱囊，同时鸡的日龄大，肠道也大，为球虫生存提供的上皮细胞也多，从而导致大鸡产卵量更多[6]。根据球虫卵囊的排放规律，说明鸡群有循环采食球虫卵囊，因为一次人工接种不可能使鸡群获得坚强的免疫力，但通过不断循环摄入排出的子代卵囊，其免疫力逐渐加强，通过两个肉鸡场的对比验证可以看出，喷雾也能起到预防球虫病的目的。