基因重组传染性囊病疫苗对白羽肉鸡腔上囊发育-免疫功能及生产成绩的影响

朱应民， 苗春玉， 董杰丽， 徐文彬，杨志强，许海军

(1.烟台市畜牧兽医工作站， 山东 烟台 264001 ； 2.北京康牧兽医药械中心， 北京 海淀 100085)

传染性囊病(IBD)是由传染性囊病病毒(IBDV)引起的一种危害青年鸡的烈性、高度传染性疾病。Hirai等发现，IBDV感染能降低疫苗体液免疫反应[1]。IBDV早期感染雏鸡后不仅抑制疫苗的体液反应，并使鸡只对马立克病，传染性支气管炎等更易感。免疫接种是控制IBD的主要方法。市场上可供选择的IBDV疫苗有活疫苗、油佐剂灭活疫苗，基于生物技术进步的IBD亚单位疫苗、表达多聚蛋白或者VP2片段的DNA疫苗以及表达IBDV免疫基因重组活病毒载体疫苗。目前，关于IBDV免疫基因重组载体疫苗对家禽腔上囊发育及生产效益的报道较少。本试验利用基因重组传染性囊病疫苗，研究其对白羽肉鸡的免疫功能和生产成绩的影响，旨在为基因重组疫苗的应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 所用疫苗为基因重组传染性囊病疫苗，以火鸡疱疹病毒(HVT)为载体、携带传染性囊病病毒VP2 基因片段，购自北京康牧兽医药械中心，商品名为立克法。

1.1 试验方法 试验选择1日龄白羽肉鸡，随机分为2组。对照组白羽肉鸡为田间免疫，14日龄饮水免疫IBD活疫苗；基因重组传染性囊病疫苗组(试验组)白羽肉鸡在孵化场于1日龄颈部皮下注射基因重组传染性囊病疫苗。

1.2 指标测定 在14、21、28、35日龄，在试验组和对照组随机抓取8～10只鸡，现场剖检，并观察腔上囊的发育情况。

计算肉鸡出栏时的存活率、平均体重、料重比、欧洲生产指数和鸡只利润。

分别在鸡群1、14、21、35日龄进行采血，用ELISA Plus试剂盒检测鸡群IBD VP2抗体水平。

1.3 数据统计 数据采用Excel 2007进行整理与统计。

2 结果

2.1 腔上囊发育情况 免疫基因重组传染性囊病疫苗和常规IBD活疫苗后，观察腔上囊发育的大小，由于基因重组传染性囊病疫苗对腔上囊没有损伤，腔上囊发育良好，确保鸡只免疫功能的完整。如中插彩版图1所示，14、21日龄2组鸡的腔上囊大小、重量相似；28、35日龄试验组的腔上囊明显大于IBD活苗免疫组；这充分说明21日龄后基因重组传染性囊病疫苗免疫组鸡只的腔上囊没有任何损伤，其重量随日龄增加而增加；但IBD常规活疫苗免疫组的腔上囊明显受到损伤，其重量随日龄增加反而降低。

2.2 生产成绩 第一批试验生产成绩如表1所示：与对照组鸡群相比，试验组鸡群的存活率提高了1.68%；平均体重提高了0.08 kg；料重比降低了0.031；欧洲生产成绩指数提高了11；每只鸡多赢利0.686元。

表1 第1批肉鸡出栏生产成绩

第2批试验生产成绩见表2，与对照组鸡群相比，试验组鸡群的存活率提高了1.94%；平均体重提高了0.034 kg；料重比降低了0.033；欧洲生产成绩指数提高了17；每只鸡多赢利0.77元。生产成绩对比结果显示，基因重组传染性囊病疫苗免疫能明显提高肉鸡生产成绩。

表2 第2批肉鸡出栏生产成绩

2.3 抗体水平 抗体水平检测结果见图2，结果表明，试验组鸡群免疫后产生抗体较早，为鸡群提供更早更好的保护。试验组和对照组鸡群的IBD VP2 抗体滴度在21日龄左右均降到最低，但最低值不同。试验组的抗体滴度在4 000以上，而对照组只有2 000左右，试验组明显高于对照组。这说明21日龄前基因重组传染性囊病疫苗就能诱导机体产生抗体，从而快速弥补了母源抗体的衰退，而常规IBD活苗免疫组则尚未产生抗体，所以母源抗体继续下降。

图2 IBD ELISA Plus VP2抗体滴度

3 结论与讨论

本试验所用基因重组传染性囊病疫苗是以火鸡疱疹病毒(HVT)为载体、携带传染性囊病病毒VP2 基因的载体疫苗。疱疹病毒具有实现神经系统基因投递，建立无症状的潜伏感染，携带多个或较大基因等优点[2]。VP2基因随着载体疫苗病毒株的复制而表达并产生免疫保护力，可抵抗传染性囊病病毒，包括经典毒株、变异毒株和超强毒株[3]。该疫苗具有预防马立克病和传染性囊病的双重作用。同时，由于基因重组传染性囊病疫苗中没有传染性囊病活病毒也就不可能损伤腔上囊，而载体HVT本身也不会伤害腔上囊，这样就保持了鸡腔上囊的功能完整。该疫苗在白羽肉鸡上的田间试验结果验证了其安全性，在孵化场对1日龄雏鸡颈部皮下接种后，评估鸡群腔上囊的外观、大小，表明基因重组传染性囊病疫苗对腔上囊没有伤害。

传染性囊病主要侵害3～6周龄的鸡只，发病突然、病程短、死亡率高。但是，近年来蛋鸡和10周龄以上的雏鸡也时有发生，一年四季均可发病[4]。1972年Allan等[5]发现，早期感染传染性囊病病毒(IBDV)可导致免疫抑制。雏鸡感染IBDV后，腔上囊、脾脏的浆细胞明显减少，脾脏B细胞抗体生成功能降低，体液免疫功能和细胞免疫功能显著减弱[6]。马立克病病毒可侵袭腔上囊、胸腺及脾脏等免疫器官，从而造成严重的免疫抑制[7]。本研究发现，试验组提高了白羽肉鸡的存活率和欧洲生产成绩指数，给企业带来更高的效益。这可能是因为基因重组传染性囊病疫苗的使用能够使鸡群建立起强壮的免疫系统，提高机体对其他疫苗的免疫应答，降低呼吸道等疾病的发生，从而使饲料的能量主要用于生长而非抵抗疾病。

以HVT为载体的基因重组传染性囊病疫苗接种后可以在鸡体内系统性复制，长时间刺激机体产生免疫反应，同时不受母源抗体干扰，胚内或1日龄即可注射免疫反应产生时间早[8]。在3～5周龄传染性囊病田间病毒感染最关键的时期基因重组传染性囊病疫苗可避免免疫空白期的发生，而常规活毒疫苗则在17～24日龄时存在免疫空白期[9]。本研究结果亦表明相较于常规疫苗，重组传染性囊病疫苗在白羽肉鸡21日龄前便能诱导抗体的产生，有效地抵抗了IBDV的早期感染，为鸡群提供更强的保护。

综上所述，在白羽肉鸡中使用基因重组传染性囊病疫苗可提高鸡群免疫性能和生产成绩。为重组疫苗在实际生产中的应用提供了试验数据。