酵母细胞壁多糖在鲫鱼鳃出血防治中的应用

邓龙钊

摘 要：鲫鱼，为我国大宗淡水养殖水产品，年产量超过260万吨，癌水产养殖业中占据重要地位。当前，在鲫鱼养殖发生的诸多疾病中，出血病是一种较为严重的疾病，具有发病急、防治困难的特点，会为养殖户造成很大的损失，所以必须对不同地区与不同鲫鱼种类患有出血病的防治加以重视。免疫多糖作为一种重要的免疫促进剂，具有高效、低毒、无残留的特点，符合绿色饲料发展的需求。本文对免疫多糖在鲫鱼鳃出血防治中的应用进行了研究。

关键词：鲫鱼；鳃出血；酵母细胞壁多糖；应用

近些年来鲫鱼出血病的发病几率较高，会对水产养殖户的利益造成很大的损害，需要养殖户十分注意。酵母细胞壁多糖作为一种环保型绿色饲料添加剂，能够提高鲫鱼自身的免疫能力，提升对病毒、真菌、寄生与细菌等的抵抗力，并且能够降低对鲫鱼早成的不良应激反应，从而使动物的生产性能得以提高。将酵母细胞壁多糖应用在一些水产动物中，能够起到低毒性、无残留且高效等的作用，确保整个养殖产业更加健康的发展。

一、 发病原因

鲫鱼鳃出血病主要由CyHV-2（疱疹病毒）致使感染，鳃动脉血管发生病变所到孩子，主要的发病原因共有6项，包括内容：

1.当水温达到26至28℃时可使疾病爆发，若问题>30℃、小于22℃也可导致该疾病发生。

2.鲫鱼品种质量的退化、免疫力下降，具有较差的抗病能力。

3.养殖鲫鱼的水质中的硫化氢、氨氮或亚硝酸盐等的指标超标，水质差；鱼塘不及时清理、淤泥较厚，滋生病原体。

4.喂养鲫鱼的饲料质量差，或是未对鲫鱼进行科学、合理的投喂。

5.相关药物的盲目使用。

6.饲养鲫鱼的放养密度较大。

二、发病症状

鲫鱼出血病属于一种具有传染性疾病，多因病毒、细菌侵袭所引起，其中以细菌性致病最为常见，鲫鱼在发病后的症状通常表现为不集群、游动无力、颜色变黑，又被称之为黑头，全身发红，鲫鱼的胸部、侧鳞处尤为明显，且鳃丝明显肿胀，在鱼体跳跃、鳃盖张合的过程中鲫鱼的鳃部会有鲜红的血液流出。在鲫鱼病死后其鳃盖处的淤血症状明显，并伴有组织器官出血、充血，脾肾脏肿大以及肝脏糜烂等的症状。

三、酵母细胞壁多糖在鲫鱼鳃出血防治中的应用研究

1.材料

（1）研究用鱼。选择两个鱼塘中的鱼作为研究对象，要求两个鱼塘中鱼苗品种、养殖规格、养殖饲料均完全相同，没有显著差异。对两个鱼塘中的鱼进行血清免疫指标检验。

（2）菌株。以患病鲫鱼为菌株获取对象，在病鱼体内分离攻毒的嗜水气单胞菌，明确鉴定后保存于-20℃环境中，备用。

2.方法

（1）投喂饲料。一口养鱼塘，在投放商品饲料前混入酵母细胞壁多糖，饲料与酵母细胞壁多糖比例为10：4，另一口鱼塘投喂与第一口鱼塘等量正常饲料。4月上旬、8月下旬各4个星期。

（2）培养菌液。取出保存的嗜水气单胞菌菌种，予以活化培养，置于固体培养基上，于37℃持续培养18h。采集单菌落，将其加入到200mL液体培养基中进行培养，150rpm条件下持续培养12h，并扩大培养。

（3）获取研究对象。

分别于两口鱼塘随机选取20尾鲫鱼作为嗜水气单胞菌攻毒试验对象。

死亡率（%）=[（初期鱼体尾数-末期鱼体尾数）/初期鱼体尾数]×100

免疫保护率（%）=（1-试验组病死率/对照组病死率）×100。

（4）测定免疫指标。在投喂前1星期，投喂后第1星期、第2星期、第3星期、第4星期各时间段选取5条鲫鱼用于实验，对各个时间段两组鱼塘中的鱼予以抽血测定碱性磷酸酶（AKP）、超氧化物歧化酶 。

3.结果

（1）攻毒感染结果分析。

攻毒感染结果如表1，研究发现鲫鱼出血病症状为主要表现。

（2）免疫指标的测定。

免疫后检测结果显示：投喂后血清AKP、SOD活性明显下降，停止停喂则有所升高，实验组与对照组相比，AKP水平差异无统计学意义（P>0.05），SOD差异显著（P<0.05）。投喂后，AKP、SOD在第2星期达到峰值，后下降至基础水平。

（3）鳃出血发病率、发病程度。

分析表2，整体自养养殖塘口数相差不大的情况下，鲫鱼精养、混养模式，公司2017年度鲫鱼鳃出血发病率、发病程度均远低于2016年。横向对比也优于周边养殖户鲫鱼鳃出血防治效果，（P<0.05）。

四、讨论

免疫多糖，用于鱼苗投喂中，具有增强鱼体免疫反应作用，能够提升鱼对各种病毒的抵抗能力，因此可以有效降低各种疾病的發生，在鱼类病防治当中应用效果良好。马淑芳曾以当归多糖喂点带石斑鱼，分析当归多糖的影响作用，予以当归多糖可提高点带石斑鱼自身免疫力，降低发病率、死亡率。本次试验结果显示酵母细胞壁多糖喂养组鲫鱼感染率、发病程度均较低，应用价值理想，这符合马淑芳的分析，证实了本次研究的科学性。另外，扩大酵母细胞壁多糖的使用范围，更能够优化使用效果。由此判断在水产养殖过程中，能够以投喂酵母细胞壁多糖方式提升水产动物的抗病能力，可有效提升水产养殖效益。

碱性磷酸酶（AKP）为各种动物体内普遍存在的一种酶，参与免疫反应。超氧化物歧化酶，可帮助鱼类有效清除体内的自由基（SOD），而SOD是影响生物免疫功能的重要指标。刘畅认为黄芪多糖（APS）有助于提升鲫鱼血清中AKP、超氧化物歧化酶活性，因此能够提升鲫鱼的自身免疫力。陈昌福认为免疫多糖（酵母细胞壁）可有效提升银鲫自身免疫应答能力，其中超氧化物歧化酶活性有明显上升表现。本次研究中超氧化物歧化酶活性的变化情况与上述研究相吻合，但AKP变化差异较大，这可能与不同鱼类免疫特性、免疫多糖来源有所差异有关。总之，实际养殖中应分析病因，应该“防治结合、预防为主”。

（1）清塘消毒：①生石灰清塘：完成池塘修整后，应在进行苗种选择前的3个星期内，在晴天使用生石灰对清塘进行消毒，使用量为75kg/亩，若池塘的淤泥较少，则可使用50kg/亩。②使用生石灰带水进行清塘：对于并不靠近湖或河的池塘，在清塘前若池水无法向池外排出、排出后难以补入的，使用邻池进行蓄水进行交相灌注，以此增加了病原传播的可能性，这样便失去了进行清塘、疾病防治的目的。所以可使用生石灰带水清塘，生石灰的使用量为125至150kg/亩，平均水深为1米。③使用漂白粉清塘：漂白粉中通常含有约30%左右的氯，具有较强的杀菌、漂白作用，使用量为13.5kg/亩，平均水深为1米，20g/m2。清塘后>5d再将鲫鱼放入池塘中，以保证鱼的安全。

（2）严格的苗种把关：水产养殖户必须对鲫鱼苗种进行检疫，千万不可将带有病毒的苗种带入到养殖池塘中。

（3）无污染水源：在进水前，养殖户要对水源水质进行检测，以减少鲫鱼病毒感染的几率。

（4）投喂合理性：在越冬后，鲫鱼的体质会逐渐变弱、免疫力也会变差，很容易受到病毒和细菌的侵袭，所有养殖户应在开春后对鲫鱼进行饲料投喂，以便更好的增加鲫鱼的免疫力、体质。

（5）预防性用药：养殖户应对水体实施经常性消毒，并且应在养殖高峰期内投喂一些具有抗病毒、肝胆保护的中药材。

五、结语

综上所述，本文通过在饲料中添加酵母细胞壁多糖对鲫鱼进行免疫投喂的实验结果显示：投喂酵母细胞壁多糖饵料后鲫鱼血清AKP与SOD活力明显升高，非特异性免疫力得到改善与提高。同时，免疫投喂的实验结果表明，酵母细胞壁多糖可以增强鲫鱼对嗜水气单胞菌的抵抗能力，提高自身免疫力，增强抗病毒能力。

参考文献：

[1]马丹丹，汪雯翰，贾薇，等. 食用菌多糖作为添加剂在养殖业中的应用[J].上海农业学报，2017，（3）.

[2]丁德明，佘响娥，彭金球，等.免疫多糖的生物学功能及其在克氏原螯虾饲料中的应用[J].江西饲料，2016，（2）.

[3]李晶晶，冀國珍，高爱武，等.获得最大酵母多糖提取率的破壁方法研究[J].中国畜牧兽医，2017，（3） .

[4] 孙红岩，刘文青，赵宝华.鱼类造血器官坏死病病毒检测及其防控研究进展[J]. 动物医学进展. 2014（05）.

[5] 彭小云.鲫鱼大红鳃病的防治方法[J]. 渔业致富指南. 2015（11）.

[6] 黎俊龙，王持标.鲫鱼大红鳃病的危害与诊治[J]. 科学种养. 2012（04）.