液相阻断ELlSA在口蹄疫病毒抗体水平检测中的应用

2018-07-28

中国畜牧兽医文摘 2018年6期

（吉林省蛟河市动物疫病预防控制中心，吉林蛟河 132500）

口蹄疫并在猪、牛、羊养殖过程中经常出现，是一种具有急性、接触性、热性的传染病，病发后会为养殖人员造成严重的经济损失。所以近些年，我国相关研究人员也致力于免疫疫苗的研制，但通过大量的实验发现，选择阴性生物进行疫苗在病毒抗体中的水平，准确性更高，为此，文章选择了不同类型阴性动物的血清进行了实验，分析出通过液相阻断ELISA法能够使血清在病毒抗体中的水平显著得到提升。

1 实验材料与实验方法分析

1.1 实验材料

本次实验针对某免疫地区的猪、牛、羊进行实验，其中共选择了猪血清92份、牛血清156份、羊血清47份，实验中使用到的血清都来自于免疫口蹄疫地区的已免疫动物。另外还要准备20份已免疫的Asia-Ⅰ型牛血清和20份已免疫的O型牛血清，免疫前要对所有血清进行液相阻断检测，其中发现两种血清类型的抗体水平均低于6.30%。通过感染的方式，让其中血清类型为Asia-Ⅰ型的六头猪和六头羊以及四头血清类型为O型的牛感染口蹄疫病，这些生物感染之前也需要做液相阻断检测，并记录检测性质[1]。

1.2 实验方法

本次试样主要是为了检测血清抗体水平，所以必须使用液相阻断检测方法，并将检测的40分血清样品与NSP 3ABC-ELISA（口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体）进行对比验证。

选择20头牛进行口蹄疫O型液与Asia-Ⅰ型液注射。在注射后的21d进行液相阻断方法检测，检测其血清的抗体水平[2]。

选择六头猪和六头羊用已受口蹄疫病毒侵害的Asia-Ⅰ型血清进行攻毒，在攻毒一周后，使用液相阻断方法进行检测，检测其体内的血清抗体水平；并选择四头牛，用已受口蹄疫病毒侵害的O型血清进行攻毒，在攻毒一个月后用液相阻断方法进行检测，检测其体内的血清抗体水平。

2 实验结果分析与讨论

2.1 实验结果分析

本次实验过程中用液相阻断方法检测了295份健康猪、牛、羊生物的血清，其中仅有15份血清不属于阴性范围，对剩余的280份血清进行检测发现，牛羊生物的ELISA抗体水平均在16以下，猪的ELISA抗体水平在4以下，同时也表明该检测方法主要适用阴性动物检测[3]。经过与NSP3ABC-ELISA对比验证的40份血清检测结果与液相阻断方法一致。

其中接种口蹄疫免疫疫苗21d后，牛的血清抗体水平监测结果为表所示。从表中可以看出接种疫苗牛体内血清抗体水平要高于未接种疫苗的阴性动物体内的血清抗体水平。

通过液相阻断检测方法选择的六头阴性猪和六头阴性羊在进行Asia-Ⅰ型血清攻毒一周后，血清的抗体水平如表2所示；用液相阻断检测方法选择的四头牛进行O型血清攻毒一个月后，血清的抗体水平如表2所示。

2.2 实验结果谈论

通过检验结果可以发现，40头接种口蹄疫疫苗的牛在接种后21天进行血清抗体水平检测，结果普遍都有了升高，抗体滴度均≥128；而且通过使用不同类型血清对隐性猪、羊进行攻毒一周后，再进行血清抗体水平检测发现，其抗体滴度也有了明显的提升，这就说明本次检测方法以及使用的原理对于阴性口蹄疫动物的抗体检测准确性较高。