血清FFA、GP73水平变化与慢性乙型肝炎患者病情程度的关联性及临床意义探讨*

林 召 党小军 侯智辉 刘发全

(1. 东莞市大岭山医院检验科，广东 东莞 523820； 2. 陕西省人民医院检验科，陕西 西安 710068；3. 深圳市中医医院检验科，广东 深圳 518033)

慢性乙型肝炎(CHB)为常见慢性传染性疾病，其治疗主要为对症治疗和抗病毒治疗，临床常用谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)等生化指标以及肝组织穿刺活检是评价患者病情和指导用药，但肝功能生化指标诊断CHB无法准确反映肝脏损伤情况，也难以区别其他原因所致慢性肝炎；而肝组织穿刺活检则具有创伤性，操作时风险较大且患者耐受性差，不利重复展开，故临床急需一项准确性和重复性较好的CHB评估指标[1-2]。近年来研究发现，血清游离脂肪酸(FFA)和高尔基体蛋白73(GP73)在各种急、慢性肝脏病变中表达水平较高，且随患者病情进展变化明显，在肝组织不同程度病理分级的患者中差异显著[3-4]。本研究主要研究血清FFA、GP73水平变化与慢性乙型肝炎患者病情程度的关联性及临床意义。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2013年8月—2017年8月我院和陕西省人民医院CHB患者172例，其中男性126例，女性46例，年龄21～73岁，平均(54.29±8.73)岁，根据《慢性乙型肝炎防治指南(2015)》中相关诊断标准[5]，按患者肝组织损伤程度，将所选病例分为轻度(63例)、中度(71例)和重度(38例)。纳入标准：①所选病例均符合CHB以及HBV-C诊断标准；②血清HBV DNA>1.0x103copies/ml；③经影像学检查、血生化检查以及肝组织活检确诊；④年龄18～80岁；⑤患者知情同意。排除标准：①合并感染其他类型肝炎病毒者；②合并其他原因所致肝组织损伤者；③合并其他严重基础疾病者；④妊娠或哺乳期女性；⑤此前6个月曾服用干扰素等免疫调节药物者。

另选我院同期健康体检者50例，男34例，女16例，年龄19～71岁，平均(52.74±9.05)岁；HBV携带者(HBV-C)50例，男性33例，女性17例，年龄22～70岁，平均(53.62±9.41)岁。

1.2检测方法 分别于上午8点取受试者空腹外周静脉血3 ml×2管，其中一管加入抗凝剂，室温放置1 h后离心后取上清冷冻保存，采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清GP73水平，所用酶标仪为伯乐860型(美国BIO-RAD公司生产)，试剂盒来自北京热景生物技术有限公司；另一管室温放置20 min后离心取上清，采用全自动生化仪检测血清ALT、AST、FFA水平，所用仪器为贝克曼AU680全自动生化仪，试剂由宁波美康提供。

2 结 果

2.1各组ALT、AST、FFA和GP73水平比较 分析发现，CHB患者ALT、AST、FFA和GP73水平均明显高于健康人群(P<0.05)，随着病情加重，各项指标变化明显，各组之间差异显著(P<0.05)。

表1 各组ALT、AST、FFA和GP73水平比较

注：a表示与健康者相比，P<0.05；b表示与HBV-C相比，P<0.05；c表示与轻度CHB相比，P<0.05；d表示与中度CHB相比，P<0.05。

2.2不同炎症程度CHB患者FFA和GP73水平分析 FFA、GP73水平随CHB患者炎症活动程度增高而升高，各分级之间差异有统计学意义(P<0.05)；相关性分析结果显示，CHB患者炎症活动分级与FFA(r=0.729，P<0.05)和GP73(r=0.743，P<0.05)均呈显著正相关。

表2 不同炎症程度CHB患者FFA和GP73水平分析

注：a表示与G1相比，P<0.05；b表示与G2相比，P<0.05；c表示与G3相比，P<0.05。

2.3不同肝纤维化分期CHB患者FFA和GP73水平分析 血清FFA、GP73水平随CHB患者肝纤维化分期增加而升高，各分期之间差异有统计学意义(P<0.05)；相关性分析结果显示，CHB患者肝纤维化分期与FFA(r=0.695，P<0.05)和GP73(r=0.704，P<0.05)均呈显著正相关。

表3 不同肝纤维化分期CHB患者FFA和GP73水平分析

注：a表示与G1相比，P<0.05；b表示与G2相比，P<0.05；c表示与G3相比，P<0.05。

3 讨 论

FFA又称为非酯化脂肪酸，主要由脂肪组织中性脂肪分解而来，生理情况下多见于肝糖原耗尽时，是参与机体能量代谢的重要物质[6]。FFA主要与白蛋白结合而进行运输，在肝脏氧化分解从而维持动态平衡，因此肝脏病变导致其对FFA氧化和酯化减少，可引起血液中FFA浓度明显升高[7]。杨蕊旭等[8]研究发现，CHB患者血清FFA水平明显高于健康人群，且随病情加重显著升高。

GP73是一种由高尔基体合成释放的具有Ⅱ型拓扑结构的跨膜蛋白，在正常人群血液中含量较低，但在各种原因引起的肝脏病变中表达水平显著升高，研究表明，血清GP73水平与肝脏中GP73含量密切相关，因此通过简单安全的检测外周血中GP73水平即可较好的反映肝脏病损情况[9]。张文昭等[10]研究乙肝患者血清中GP73水平发现，在HBV感染阶段，干细胞发生炎症反应，可导致血清GP73水平上升，因此GP73对HBV-C和各期CHB患者均具有一定诊断价值。

本研究发现，健康人群、HBV-C和CHB患者血清FFA、GP73表达水平均具有显著差异，且随着CHB患者肝脏损伤程度加重明显升高，但两者升高原因有所不同，其中FFA是因肝脏炎症反应导致其对FFA代谢能力下降，从而引起血清FFA升高，而FFA具有较强的细胞毒性，可作用于肝细胞导致细胞膜稳定性下降和功能异常，从而使肝细胞变性死亡，加重肝脏损伤，进一步减弱肝脏对FFA氧化分解能力[4]；而GP73是一种病毒反应性蛋白，表达水平升高主要是因为受病毒感染刺激后合成和释放增加，另外肝炎可导致肝脏细胞膜通透性增加[11]，从而使GP73入血量增多也可导致血清GP73水平上升，因此血清FFA主要反映肝细胞发生损伤而GP73则提示病毒感染发生。

经肝组织穿刺活检证实，CHB患者血清FFA和GP73水平与患者肝组织炎症反应和肺纤维化程度加重而升高，采用炎症获得分级和纤维化分期量化后进行Pearson相关性分析发现，FFA和GP73水平均与患者肝组织炎症分级呈正相关，与患者肝纤维化分期呈正相关，表明FFA和GP73水平均可用来评估患者病情进展、指导临床用药和监测治疗效果。若能进一步研究明确其作用机制，FFA和GP73水平将可获得更广泛的临床使用价值。

综上所述，CHB患者血清FFA和GP73表达水平显著升高，且随病情加重变化明显，与肝炎活动分级和纤维化分期呈明显正相关，因而可用于评估患者病情、指导临床用药和监测治疗效果。