不同产地罗布麻叶脂溶性成分的比较分析
2018-07-05回瑞华侯冬岩李铁纯刁全平
回瑞华,侯冬岩,李铁纯,刁全平
(鞍山师范学院 化学与生命科学学院,辽宁 鞍山 114007)
罗布麻(Apocynum.venetumL.)属野生草本宿根植物[1],最早发现于新疆罗布泊而命名为罗布麻.罗布麻主要分布于我国东北、华北、西北和黄河流域.罗布麻耐旱、耐寒、耐暑热、抗盐碱能力强,在盐碱荒地、沙漠边缘、海岸及戈壁滩等自然条件恶劣的环境生长,对环境适应性强.罗布麻叶含有丰富的萜类、黄酮、氨基酸、生物碱、有机酸等多种活性成分,具有清火平肝、安神定痛、止咳平喘、祛痰、预防和治疗高血压、延缓衰老等作用[2~4],卫生部定其为保健兼食品的天然产物.近年来,国内外相关研究人员对罗布麻叶的萜类、黄酮等活性成分研究较多[5~9],而对罗布麻叶脂溶性成分的研究少见报道.研究表明,罗布麻叶的脂溶性成分对于其药效活性具有一定的相关性.本研究对不同产地罗布麻叶脂溶性成分进行分析,为进一步研究和开发罗布麻叶提供实验依据.
1 实验部分
1.1 主要仪器与试剂
所用仪器和试剂见表1.
1.2 样品及前处理
罗布麻叶样品:新疆罗布泊罗布麻叶、新疆伊犁罗布麻叶、辽宁罗布麻叶.粉碎后过0.6 mm筛,备用.
1.3 石油醚作溶剂提取脂溶性成分
分别称取10.00 g 3个产地的罗布麻叶粉末,用滤纸包好,置于索氏提取器中,加入150 mL石油醚,提取至索氏提取器中溶剂变为无色,提取时间为8 h,用旋转蒸发器回收溶剂,得油状物.
表1 实验所用仪器和试剂
1.4 乙醚作溶剂提取脂溶性成分
分别称取10.00 g 3个产地的罗布麻叶粉末,用滤纸包好,置于索氏提取器中,加入150 mL乙醚,提取至索氏提取器中溶剂变为无色,提取时间为8 h,用旋转蒸发器回收溶剂,得油状物.
1.5 酯化处理
由于罗布麻叶的脂溶性提取物沸点较高,需将其进行酯化处理后再进行GC/MS分析.分别取1.3和1.4脂溶性提取物各1.0 mL,加入正己烷8.0 mL、氢氧化钠甲醇溶液(0.5 mol/L)2.0 mL,70 ℃水浴回流20 min,取出冷却后移至刻度试管中加水12 mL,超声振荡、离心、取上层清液待做GC/MS分析.
1.6 气相色谱/质谱测定条件
1.6.1 气相色谱条件 弹性石英毛细管色谱柱:HP-5,25 m×0.25 mm×0.25 um;柱温:初始温度100 ℃,以5 ℃/min升至260 ℃(保持4 min);汽化室温度280 ℃;进样量0.3 μL;载气(He)流量1 mL/min;分流比:40∶1;溶剂延迟3 min.
1.6.2 质谱条件 电子轰击离子源;离子源温度200 ℃;四极杆温度150 ℃;倍增器电压1 345 V;电子能量70 eV;发射电流34.6 μA;接口温度220 ℃;质量扫描范围20~500 m/z.
1.7 测定方法
分别取经1.5酯化处理后的样品0.3 μL进样,进行GC/MS分析.由GC/MS所得的质谱信息,对其化学成分进行鉴定,并测得各组分在总组分中的相对含量,总离子流量图见图1~图6.
图1 新疆罗布泊罗布麻叶乙醚提取脂溶性成分的总离子流图
图2 新疆伊犁罗布麻叶乙醚提取脂溶性成分的总离子流图
图3 辽宁罗布麻叶乙醚提取脂溶性成分的总离子流图
图4 新疆罗布泊罗布麻叶石油醚提取脂溶性成分的总离子流图
图5 新疆伊犁罗布麻叶石油醚提取脂溶性成分的总离子流图
图6 辽宁罗布麻叶石油醚提取脂溶性成分的总离子流图
2 结果与讨论
2.1 不同产地罗布麻叶脂溶性成分分析
由不同产地罗布麻叶脂溶性成分GC/MS总离子流量图1~图6可知,乙醚作溶剂提取脂溶性成分分离效果较好.本实验采用乙醚作溶剂提取脂溶性成分,鉴定出的脂溶性成分见表2.
表2中A、B、C分别代表新疆罗布泊罗布麻叶、新疆伊犁罗布麻叶和辽宁罗布麻叶样品.
表2 不同产地罗布麻叶脂溶性成分鉴定结果
实验结果由表2可知,新疆罗布泊罗布麻叶中鉴定出18种脂溶性成分:脂肪酸12种,占总量的60.99%;醇类1种,占总量的15.06%;黄酮类1种,占总量的0.30%;烷烃类4种,占总量的16.43%,总检出率为92.78%.
新疆伊犁罗布麻叶中鉴定出18种脂溶性成分:脂肪酸11种,占总量的53.63%;醇类2种,占总量的9.71%;黄酮类1种,占总量的0.30%;烷烃类4种,占总量的17.09%,总检出率为94.05%.
辽宁罗布麻叶中鉴定出15种脂溶性成分:脂肪酸8种,占总量的54.43%;醇类2种,占总量的25.98%;黄酮类1种,占总量的0.70%;烷烃类4种,占总量的12.12%,总检出率为93.23%.
2.2 结果讨论
由不同产地罗布麻叶脂溶性成分的分析可知,不同产地罗布麻叶均含有脂肪酸、醇类、黄酮类和烷烃类脂溶性成分.但不同产地罗布麻叶中,上述脂溶性成分相对含量不同.新疆罗布泊罗布麻叶中不饱和脂肪酸相对含量最高.
新疆伊犁罗布麻叶中鉴定出β-草烯.β-草烯属萜类化合物,通常存在于樟科植物的挥发油中,在罗布麻叶中检出β-草烯未见报道.
辽宁罗布麻叶中醇类化合物相对含量高达25.98%,其中羽扇醇是一种三萜类化合物,通常存在于草莓、芒果、葡萄、橄榄等水果之中.近年来研究证实,羽扇醇在动物实验中有抗氧化、抗炎症、促进皮肤愈合等作用,对乳腺癌、前列腺癌以及小鼠的黑色素瘤有一定的抑制作用.
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(2005年版一部)[S].北京:化学工业出版社,2005:146-147.
[2] 杨信芳.罗布麻化学成分与药用价值研究进展[J].首都医药,2011(10):100-103.
[3] 张志琴,朱双雪.槲皮素的药理活性与临床应用研究进展[J].药学研究,2013,1(7):400-403.
[4] 张素琼,燕虹,李青山.罗布麻叶有效部位降血脂及抗动脉粥样硬化的研究[J].中西医结合心脑血管病杂志,2007,5(9):831-872.
[5] 王佳,谢健,陈岳明,等.罗布麻叶总黄酮提取物对抑郁模型大鼠抗抑郁作用的研究[J].浙江医学,2016,38(1):14-16.
[6] 石秋梅,邓翻云,吴敏言.HPLC法同时测定新疆产2种罗布麻叶中芦丁、金丝桃苷及异槲皮苷含量[J].中草药,2014,45(9):1326-1329.
[7] 冯春艳,卿德刚,倪慧,等.2种罗布麻叶中芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷含量比较研究[J].新疆农业科学 2017,54(7):1291-1297.
[8] 尤努斯江·吐拉洪,吐尔洪·买买提.岁布麻叶中多酚的提取工艺和抗氧化活性的研究[J].时珍国医国药,2012,23(4):818-820.
[9] 韩利文,侯晋军,李云兰,等.高效液相色谱法比较不同种属和产地罗布麻叶中金丝桃苷的含量[J].中国现代应用药学,2006,23(5):392-394.