金黄色葡萄球菌检测辅助手段——HM43葡萄球菌乳胶凝集试剂盒

◎ 王东玉

（锡林郭勒职业学院，内蒙古 锡林浩特 026000）

金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aurens）是一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属（Staphyloccocus），呈革兰氏阳性。金黄色葡萄球菌广泛存在于自然界中，与人类生活相关的空气、灰尘、水等自然界中均能检测到金黄色葡萄球菌[1]。在世界各个国家中，由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒在细菌性食物中毒中均占较大比例，已成为世界性的公共卫生问题[2-3]。

根据国家标准GB 4789.10-2010金黄色葡萄球菌检验中的方法，约需78 h方可出结果，此方法存在耗时长、工作量大的缺陷，很难适应现在快速检验要求。目前，金黄色葡萄球菌检测在日常微生物检验工作中所占比重越来越大，所以选出一个简便、快捷并准确的方法变得十分有必要。本文研究了HM43葡萄球菌乳胶凝集试剂盒对金黄色葡萄球菌检验的作用，将结果进行分析研究，旨在探求一种适应食品微生物实验室检测要求的快速准确的方法，为提高今后金黄色葡萄球菌检测效率提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要培养基与试剂

TSA平板（青岛高科园海博生物技术有限公司），Baird-Parker平板（北京路桥技术股份有限公司），HM43葡萄球菌乳胶凝集试剂盒（广东环凯微生物科技有限公司）。

1.1.2 试验菌株

金黄色葡萄球菌（CMCC26003），表皮葡萄球菌（CICC10294），粪肠球菌（ATCC29212），藤黄球菌（CMCC28001）。

1.1.3 仪器设备

分析天平，生物安全柜，生化培养箱，高压灭菌锅。

1.2 试验方法

将4株纯化好的试验菌株分别划线于Baird-Parker平板，培养48 h后待用。根据HM43葡萄球菌乳胶凝集试剂盒说明书，先滴一滴测试液于测试片上，然后挑取单个菌落混匀于测试液中，晃动2 min左右，观察凝集现象。根据上述方法，挑取60株金黄色葡萄球菌、20株表皮葡萄球菌、20株粪肠球菌、20株藤黄球菌分别进行乳胶凝集试验，观察凝集现象。

2 结果与分析

120株分离菌株在HM43葡萄球菌乳胶凝集试剂上的试验结果见表1。60株金黄色葡萄球菌在2 min内均出现明显凝集反应；20株表皮葡萄球菌均未出现凝集反应；20株藤黄球菌均未出现凝集反应；20株粪肠球菌均出现凝集反应，但凝集现象不明显。

表1 120株分离菌株在葡萄球菌乳胶凝集试剂上的凝集结果表

通过试验结果分析可知，HM43葡萄球菌乳胶凝集试剂在金黄色葡萄球菌检测中灵敏度为100%，特异性为66.6%。

在试验过程中发现，接种量的多少会影响凝集现象产生的快慢。接种量少，凝集产生慢且不明显，接种量多，凝集产生快且明显，但均不影响试验结果的判断。

3 结论与讨论

Baird-Parker法需在接种后48 h观察平板，并挑取可疑菌落转种到BHI肉汤中，再经18～24 h培养后做血浆凝固酶试验进行证实[4]。一般耗时约需78 h，操作步骤繁琐、耗时长、工作量大。而在Baird-Parker法接种平板48 h后，可利用HM43葡萄球菌乳胶凝集试剂，通过有无凝集现象来快速初步判断是否为金黄色葡萄球菌。由于HM43葡萄球菌乳胶凝集试剂在金黄色葡萄球菌检测中灵敏度高，但特异性不强，所以在出现凝集反应后，需按照国家标准GB 4789.10-2016进行后续证实试验，如未出现凝集反应，在保证菌落纯度高的前提下，在应急检测中可不做后续证实试验。

在金黄色葡萄球菌检测占日常微生物检验工作比重越来越大的今日，HM43葡萄球菌乳胶凝集试剂盒可作为一种简便、快捷的辅助手段，来实现实验室金黄色葡萄球菌快速检测的要求，尤其在食物中毒等应急检测方面更显其使用方便的优越性，值得在微生物实验室日常检测中推广应用。

[1]赵永胜.两种不同培养基分离金黄色葡萄球菌的比较[J].河南预防医学杂志，2017（11）：834-835.

[2]李自然，施春雷，宋明辉，等.上海市食源性金黄色葡萄球菌分布状况[J].食品科学，2013（1）：268-271.

[3]陈广全，张惠媛，曾 静.微生物检验[M].北京：中国标准出版社，2010：351-352.

[4]梁景涛，谢 翊，林秋芬，等.3种食品中金黄色葡萄球菌检测方法的比较研究[J].中国卫生检测杂志，2010（4）：790-791.