用不同的角膜刮片法对单纯疱疹病毒性角膜炎患者进行PCR检测的效果对比

刘立春

（唐山市眼科医院，河北 唐山 063000）

单纯疱疹病毒性角膜炎是眼科常见的感染性疾病，其发病率居角膜病之首。此病患者的病情可反复发作，若未得到有效的治疗可显著增加视力丧失的发生率[1]。在临床上，主要采用角膜刮片PCR检测法诊断单纯疱疹病毒性角膜炎。本次研究主要分析采用不同的刮片法对单纯疱疹病毒性角膜炎患者进行PCR检测的临床效果。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究的对象为2016年2月至2017年5月唐山市眼科医院收治的62例单纯疱疹病毒性角膜炎患者。按照刮片方法的不同将这些患者分为观察组与对照组。在观察组31例患者中，有女12例，男19例；其年龄为21～72岁，平均年龄为（51.02±2.15）岁。在对照组31例患者中，有女10例，男21例；其年龄为24～73岁，平均年龄为（52.73±2.08）岁。两组患者的一般资料相比较差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

为对照组患者采用常规肉眼下角膜刮片取样法进行PCR检测，检测方法是：将盐酸奥布卡因滴眼液滴入患者眼球的表面进行局部麻醉，间隔5 min滴眼一次，共滴眼2次。在肉眼直视下从其角膜病变处取少量的组织，置于经无菌处理、装有0.5 ml生理盐水的离心管中进行PCR检测。为观察组患者采用裂隙灯显微镜下角膜刮片取样法进行PCR检测，检测方法是：将盐酸奥布卡因滴眼液滴入患者眼球的表面进行局部麻醉，间隔5 min滴眼一次，共滴眼2次。在裂隙灯显微镜的辅助下，用角膜刀从患者角膜病灶的边缘刮取少许的上皮组织，将组织样本置于经无菌处理、装有0.5 ml生理盐水的离心管中进行PCR检测。在对两组患者进行PCR检测时若发现HSV-1 DNA，可判定检测结果呈阳性。

1.3 统计学分析

采用SPSS22.0统计软件对本研究中的数据进行分析，计量资料用（）表示，采用t检验，计数资料用%表示，采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

经PCR检测，在观察组患者中有19例患者检出HSV-1 DNA，其检测结果的阳性率为61.29%；在对照组患者中有7例患者检出HSV-1 DNA，其检测结果的阳性率为22.58%。与对照组患者相比，观察组患者进行PCR检测结果的阳性率较高，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。

表1 两组患者检测结果阳性率的对比

3 讨论

研究发现，及早确诊单纯疱疹病毒性角膜炎患者的病情并积极对其进行治疗，是改善其预后的重要手段[2]。进行角膜刮片PCR检测是诊断单纯疱疹病毒性角膜炎的重要方法。PCR是一种用于体外快速扩增DNA的技术，在检测病毒基因方面的特异性、敏感性均较高，近年来被广泛应用于生物学和医学研究领域[3]。

在采用角膜刮片PCR检测法诊断单纯疱疹病毒性角膜炎时，必须刮取到含有单纯疱疹病毒的角膜上皮组织，才能保证检测的准确性。研究发现，与采用常规肉眼下角膜刮片取样法相比，为此病患者采用裂隙灯下显微镜下角膜刮片取样法进行PCR检测可更准确地诊断其病情[4]。在裂隙灯显微镜下进行角膜刮片取样时，能够准确地分辨发生病变的角膜上皮组织，确保取样的准确性[5]。在显微镜下对单纯疱疹病毒性角膜炎患者的病灶进行观察，可准确地判断其病变角膜的大小和深度，并可降低对其患眼的损伤[6]。单纯疱疹病毒性角膜炎患者的角膜上皮细胞在受到病毒的侵袭后可发生增殖或变性，进而可导致角膜上皮缺损，其病灶边缘的组织中病毒的增殖更为活跃。因此，在对此病患者进行角膜刮片取样时，应从其患眼病灶的边缘组织刮取样本。

本次研究的结果显示,与对照组患者相比，观察组患者进行PCR检测结果的阳性率较高，差异有统计学意义（P＜0.05）。可见，与采用常规肉眼下角膜刮片取样法相比，采用裂隙灯显微镜下角膜刮片取样法对单纯疱疹病毒性角膜炎患者进行PCR检测可显著提高其病情的检出率。

[1] 张蕾,虞卫,周文璇,等.不同刮片方法在单纯疱疹病毒性角膜炎PCR诊断中应用的比较研究[J].护士进修杂志,2013,28(4):331-332.

[2] 吴年浪,赵江浩,张惠成.单纯疱疹病毒性角膜炎治疗中应用定量PCR技术的研究[J].医学研究杂志,2013,42(6):133-136.

[3] 马君鑫,王林农,周如侠,等.实时荧光探针定量PCR法在坏死性基质型单纯疱疹病毒性角膜炎病原检测中的应用[J].中华实验眼科杂志,2015，33(5):446-450.

[4] 徐欣,张樱楠,潘志强,等.单纯疱疹病毒性角膜炎角膜组织病毒潜伏感染的PCR检测分析[J].眼科,2013，12(1):45-48.

[5] Kowalski RP，Thompson PP，Cronin TH.Cell culture isolation canmiss the laboratory diagnosis of HSV ocular infection[J].Int J Oph-thalmol，2010，10(11) : 2045 － 2048.

[6] 王林农.单纯疱疹病毒性角膜炎的实验室检查现状及进展[J].国际眼科杂志,2013，13(12):2414-2417.