结核分枝杆菌耐药基因芯片检测在结核性脑膜炎中的应用
2018-06-22张廷娟
张廷娟
结核性脑膜炎(Tuberculous meningitis,TBM)是由结核分枝杆菌引起的中枢神经系统感染性疾病,损伤脑膜﹑大脑实质﹑脊髓及脊膜,进而引发头痛﹑呕吐﹑视乳头水肿等症状,严重者可导致肢体残疾,甚至死亡[1]。结核性脑膜炎治疗的关键在于早期确诊。而现阶段临床常用的ELISA检测,其早期检出率不足20%,且操作繁琐,时间较长,延误了疾病的最佳治疗时机,已不能满足临床的需求[2]。我院采用结核分枝杆菌耐药基因芯片和ELISA检测脑脊液在诊断结核性脑膜炎患者中进行对比,旨在为结核分枝杆菌耐药基因芯片检测在结核性脑膜炎诊断中应用和推广提供数据支持。
1 资料与方法
1.1 一般资料
以我院2015年9月—2017年9月诊治的结核性脑膜炎疑似病例139例为研究对象,采用随机数字表将其分为观察组和对照组:(1)观察组(70例):男42例,女28例;平均年龄(36.2±3.8)岁;(2)对照组(69例):男43例,女26例;平均年龄(36.5±4.2)岁。所有研究对象均有明显的发热﹑头痛﹑呕吐及脑膜刺激征表现,以结核性脑膜炎疑似病例收治;病例病程均小于14 d[3];所有病例均符合《研究知情同意原则》和医学伦理学原则[4]。就其一般资料进行组间比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2 方法
1.2.1 对照组检测 对照组:采用ELISA法进行检测,各项操作均按临床常规操作进行。
1.2.2 观察组检测 观察组:采用结核分枝杆菌耐药基因芯片法检测(应用亚能生物技术深圳有限公司试剂盒及配套试剂)。检测包括脑脊液处理﹑核酸提取﹑PCR扩增﹑芯片杂交﹑芯片扫描和检测结果判读等环节,具体操作均按照试剂盒说明书进行操作。
1.3 观察项目及标准
(1)阳性率:分别统计两组阳性病例数,阳性率=阳性病例数/研究病例数×100%[5];(2)准确性:所有研究对象均行PCR检测,并以检测结果作为分组研究准确性的判定标准,评定结果一致病例为准确,不一致病例为错误。准确率=准确病例/研究病例×100%。准确率越高,准确性越高[6]。
1.4 统计学处理方法
采用SAS 22.1统计学软件对研究数据进行分析,计量资料以(±s)表示,采用 t检验,计数资料以(%)表示,采用χ2检验;当P<0.05时,差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 阳性率
观察组阳性病例13例,阳性率为18.6%,对照组阳性病例12例,阳性率为17.4%,观察组高于对照组(χ2=0.046,P>0.05)。
2.2 准确性
两组准确率分别为95.7%和85.5%,观察组高于对照组(P<0.05),即观察组的准确性高于对照组。具体数据如表1。
表1 两研究组诊断准确性比较表(%)
3 讨论
结核性脑膜炎的发病率占结核病的7%~10%,已成为临床常见的结核疾病,加之其较高的致残和死亡率,使得结核性脑膜炎诊断和治疗的研究成为临床研究的重点和热点。但因结核性脑膜炎的临床表现复杂﹑不典型,早期影像学检查无特异性改变,而赖以诊断颅内感染的脑脊液生化﹑细胞学检查结果往往与其它类型颅内感染有所重叠,进而导致其早期确诊率仅为10%。因此对结核性脑膜炎诊断方法及价值的研究,对结核性脑膜炎的诊治及患者的预后均具有重要的价值。
结核分枝杆菌耐药基因芯片检测技术以聚合酶链式反应(PCR)和反向点杂交(RDB)相结合的基因芯片技术为基础。将各种耐药基因探针固定在芯片上,随后与待检测样本的DNA或RNA进行杂交,通过检测各个探针分子的杂交信号强度获取样品分子的序列信息和数量。因芯片上含有大量基因探针,可以迅速获取结核菌株对常用多种抗痨药物的药敏结果[7]。因此结核分枝杆菌耐药基因芯片检测技术用于结核性疾病的诊断及药物耐受度的检测中具有重要的价值[8]。
研究结果显示,结核分枝杆菌耐药基因芯片检测组的准确率高于ELISA检测组,从而为结核分枝杆菌耐药基因芯片检测的临床应用提供了支持。研究采取了文献循证﹑病例筛选﹑随机分组﹑统计学分析等措施,确保了研究的科学性和数据的准确性,因此研究数据及结论真实有效。
综上,结核分枝杆菌耐药基因芯片检测用于结核性脑膜炎诊断具有准确性高,依从性高,快捷简便等优势。
[1] 陈小可,周一平,高秋霞,等. 结核杆菌耐药基因芯片在结核性胸膜炎中的应用[J]. 临床肺科杂志,2014,19(7):1282-1285.
[2] 甘靖,叶少林,罗蓉,等. 近10年国内外儿童结核性脑膜炎研究论文的可视化研究[J]. 中国当代儿科杂志,2016,18(5):415-420.
[3] 吕燕华,王海英,庄严,等. 结核性与化脓性脑膜炎患者血浆及脑脊液生化指标检测结果对照研究[J]. 中华医院感染学杂志,2017,27(7):1483-1486.
[4] 胡晓红,向启云,韩宇,等. 基因芯片技术在宜昌地区结核分枝杆菌耐药情况监测中的应用[J]. 中国病原生物学杂志,2015,28(4):351-354.
[5] 李自超,葛朝明,蔡宏斌,等. 耐药性结核性脑膜炎研究进展[J].现代生物医学进展,2016,16(31):6192-6196,6161.
[6] 吴国兰,陈晓红,翁丽珍,等. 基因芯片技术在鉴定分枝杆菌属及早期诊断耐药结核中的价值分析[J]. 中国医刊,2016,66(5):44-47.
[7] 李晓非,梁桂亮,普冬,等. 基因芯片技术在分枝杆菌菌种鉴定和结核耐药性检测中的应用及评价[J]. 中国实验诊断学,2015,(2):204-207.
[8] 黄海滨,张海晴,刘成永,等. 基因芯片技术检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药水平和katG、inhA、oxyR-ahpC以及rpoB基因突变位置的关联性分析[J]. 北京医学,2016,52(11):1247-1249.