甘蔗试管苗光合自养生根技术研究
2018-05-30何为中范业赓刘丽敏刘红坚余坤兴翁梦苓
何为中 范业赓 刘丽敏 刘红坚 余坤兴 翁梦苓
摘 要:为了简化甘蔗组织培养流程,降低生产成本,该文以甘蔗品种GT44和B9无根试管苗为材料,先经叶片喷施植物生长调节剂处理,然后炼苗24 h,接着把处理后的试验苗移植于沙土混合栽培基质中,研究其在日光温室条件下完成不定根的形成和生长过程;同时比较了无根试管苗和有根试管苗的移栽存活率和生長情况。试管苗生根率调查时间为试管苗移植后第3天开始至第10天结束,成活率的调查时间为试管苗移植后的第30天。结果表明:经吲哚丁酸(IBA)和ABT2号生根粉处理的无根试管苗的移栽成活率分别为96.3%和97.7%,接近传统生根试管苗的移栽成活率,且其单株试管苗生根成本为传统生根方法的1/28。甘蔗品种GT44和B9试管苗首次出现可见根的时间均发生在试管苗移栽后的第4天。试管苗根的再生可以在有菌的沙土基质栽培和日光温室条件下完成,而不需要在无菌的MS生根培养基和培养室中进行生根;基因型和试管苗素质是影响甘蔗试管苗光合自养生根的关键因素;甘蔗试管苗光合自养生根技术比传统试管苗培养基生根技术拥有更多优势,且操作简单、程序简化、生根率和成活率高、省工、节省能源和生产成本、效率高,替代传统的试管苗生根技术,应用于商业化生产。
关键词:甘蔗试管苗,植物生长调节剂,叶片导入,沙土基质,光合自养生根
中图分类号:Q945
文献标识码:A
文章编号:1000-3142(2018)10-1298-12
Abstract:The purpose of the study on photoautotrophic rooting of sugarcane microshoots was to simplify the process of sugarcane tissue culture and reduce the production cost. In this experiment,the sugarcane variety GT 44 and B9 rootless microshoots,were used as test materials. The microshoots were first treated with leaves and sprayed with plant growth regulator and then hardened for 24 hours. Then the treated microshoots were transplanted into mixture of soil and sand,the adventitious root formation and growth process were completed under sunlight greenhouse conditions. Meanwhile,the survival rate and growth of rootless and rooted microshoots were compared during transplanting in the green house. The rooting rate of microshoots was measured from the third day after microshoots transplantation to the end of the tenth day. The investigation of survival rate was on the 30th day after microshoots transplantation. The results showed that the survival rate of rootless microshoots treated with indole butyric acid(IBA) and ABT2 rooting powder was to 96.3% and 97.7%,respectively,which was close to the survival rate of traditional rooting microshoots. The rooting cost of microshoots by the developed root technique was only 1/28 of that by the traditional rooting method. The first visible roots of sugarcane variety GT44 and B9 were appeared on the fourth day after transplanting of the microshoots. The regeneration of microshoot roots could be done in the sandy soil substrate and solar greenhouse instead of rooting in sterile MS rooting medium and culture room. The genotype and the quality of microshoots were the factors that affect photosynthetic autotrophic root of the key factors. The photoautorophic rooting of microshoots present more advantages over the traditional rooting technique such as simple operation,simplified protocol,the high rooting rate and survival rate,labor saving,energy saving and lower production costs and high efficiency,and it can replace the traditional root technology for commercial production.
Key words:sugarcane microshoots,plant growth regulator,leaf introduction,soil-sand substrate,photoautotrophic rooting
甘蔗组织培养技术广泛应用于甘蔗新品种快速繁殖、脱毒健康种苗生产和转基因甘蔗研究等方面,目前该项技术已在国内外甘蔗生产区广泛使用。传统的植物组织培养技术包括四个阶段,即初代培养(培养物建立)、继代增殖、生根培养和移栽苗圃。前面三个阶段都在无菌的、人工控制环境的室内进行,且操作步骤繁琐、人工需求量大、成本高,导致植物试管苗生产成本居高不下。以生产甘蔗健康种苗为例,目前甘蔗健康种苗的售价一般每株为0.6~1.0元,以每亩种植1 800~2 000株计算,每亩种苗成本为1 080~2 000元,为使用种茎种植成本的4.5~8.33倍,蔗农生产成本高,且无利可图,难以接受,从而制约了甘蔗试管苗的普及种植。试管苗瓶外生根技术是近年研究成功的一项先进的组培生根技术,是植物试管苗简化生产技术的重要组成部分。该技术的主要特征是将植物组织培养过程中的组培继代增殖苗进行处理后在温室自养条件下直接进行自养生根,它的主要特点是将试管苗生根阶段中的生根和驯化结合起来,使传统的培养室条件下的异养生根转变为温室条件下的自养生根,省去了复杂的、成本极高的试管苗瓶内生根传统程序。该技术的应用不仅减少了一次无菌操作步骤,节约了培养室空间,又简化了健康种苗生产程序,降低了生产成本,提高了生产效率(Kim et al,1998;徐振华等,2002;Almeida et al,2005;黄卓忠等,2007;付艳华等,2009;刘敏等,2010;严华兵等,2010;何为中等,2011)。试管苗瓶外生根可使试管苗的生产成本降低35%~75%(徐振华等,2002;吴国智等,2010)。
甘蔗试管苗光合自养生根技术是本课题组在甘蔗试管苗瓶外生根技术基础研制而来,它是将无根增殖试管苗喷施植物生长调节剂后,在日光温室环境下先炼苗24~48 h,然后按常规方法种植于普通日光温室进行光合自养生根。本研究采用该项技术后,甘蔗组织培养技术由传统的四个步骤简化为三个步骤,即初代培养(培养物建立)、继代增殖和移栽苗圃生根生长。这样省去了培养室内生根这一环节,简化了甘蔗试管苗生产程序,降低生产成本在50%以上,对促进甘蔗健康种苗大规模生产应用有积极作用。
1 材料与方法
所用甘蔗品种GT44和B9试管苗由广西农业科学院甘蔗研究所提供,是通过培养基MS + 6-BA + NAA連续多次继代培养而成。试验处理开始第一步是对完成继代培养的试管苗叶片喷施植物生长调节剂(ABT2号生根粉或者IBA),植物生长调节剂浓度及处理方法采用刘红坚和何为中(2015)、何为中(2015)报道的专利技术方法,接着在日光温室炼苗24 h,炼苗过程中温室环境变化不受人工控制,湿度变化范围为60%~70%,温度范围为20~40℃ 和光照强度范围为2 000~4 000 lx 。处理好的试管苗经清水清洗后,将试管苗浸没于消毒液中10 min,消毒液为500倍(v/v)亮盾[先正达(中国)公司产品]溶液或0.6%的高锰酸钾溶液。消毒期间可翻动试管苗1~2次,随后将试管苗种植于日光温室大棚,栽培基质为新鲜河沙与充分风化黄泥的混合物,混合比例为1∶1(v/v),生根过程中温室环境变化不受人工控制,湿度变化范围为70%~100%,温度范围为20~40 ℃ 和光照强度范围为2 000 ~15 000 lx,以散射光为主。
1.1 存活率比较试验
光合自养生根技术和传统生根试管苗温室移栽存活率比较试验所用试管苗为甘蔗品种B9试管苗,设计2个处理,即分别用ABT 2号生根粉(北京艾比蒂生物科技有限公司产品)溶液(200 mg·L-1)和IBA 200 mg·L-1 + 6-BA 10 mg·L-1 混合物溶液喷施继代无根试管苗,植物生长调节剂浓度及处理采用刘红坚和何为中(2015)、何为中(2015)的专利技术方法,日光温室炼苗24 h; 对照为生根试管苗,继代试管苗在生根培养基MS + NAA 10 mg·L-1 +蔗糖 50 g·L-1 上于培养室培养15 d。无根和生根试管苗同时移栽于沙土栽培基质中,种植盆规格为6孔×9孔 。无根试管苗种植后一段时间内调查生根率和存活率。
试管苗存活率于移栽后30 d调查,处理和对照每个重复为一个种植盆,即6孔×9孔,重复3次,统计存活植株穴数量,即每穴有1株以上存活植株计入存活统计。生根率调查从移栽后4 d开始至移栽后10 d止,每个品种每次取样10穴,调查不可分割个体数量总数和生根个体数量。用微软Excel 2007进行数据统计分析,试管苗存活率和生根率按以下公式计算:
存活率=存活植株穴数量调查植株穴数量×100%;
生根率=生根植株数量调查植株数量×100%。
1.2 单株试管苗生根成本比较试验
选择生长基本一致、每瓶苗数量大致相等(目测)的GT44增殖继代试管苗作为材料,其中99瓶按照传统方法进行生根培养,培养15 d后练苗,并种植于日光温室;另120瓶进入光合自养技术生根流程,即继代试管苗在日光温室内开瓶盖,并喷施生根诱导溶液,成份为ABT 2号生根粉200 mg·L-1+D脯氨酸60 mg·L-1+吐温0.2%,炼苗24 h,清洗消毒后移栽于日光温室大棚中生根。试管苗种植基质均为沙土混合物,混合比例为1∶1(v/v);移栽30 d后统计存活植株数量,有1片以上(含1片)完全展开叶片的植株计入存活植株数量。
2 结果与分析
2.1 生根试管苗与无根试管苗移栽存活率比较
表1结果显示,两个处理试管苗的存活率都很高(96%以上),喷施IBA+6-BA处理的存活率达到97.7%,与有根试管苗的移栽存活率无显著差异(P> 0.05)。在传统的甘蔗试管苗生产工艺中,甘蔗试管苗都是先经培养室生根培养诱导试管苗生根,然后再将生根试管苗移栽苗圃驯化;但甘蔗试管苗光合自养生根技术可使无根试管苗在普通日光温室移栽条件下诱导生根,无需配制生根培养基和创造无菌培养条件,存活率与有根试管苗的移栽存活率接近。
2.2 甘蔗试管苗光合自养生根过程生根率变化
GT44和B9甘蔗试管苗移栽日光温室后第3天调查没有发现试管苗出现可见根,第4天后即可观察到可见根出现,生根率为30%~40%,至第8天后两个品种生根率接近100%。观察结果发现第一次出现可见根的时间品种间是有差异的,如GT49首先出现可见根的时间为移栽后第9天,生根率接近20%;直到第20天生根率才达到100%,虽然GT44、B9和GT49生根快慢不同,但地上部分叶片转青和新叶生长是同步,未发现肉眼观察到的差异。
2.3 甘蔗试管苗光合自养生根技术与传统的试管苗生根技术比较
2.3.1 采用甘蔗试管苗光合自养生根技术简化了试管苗生产流程 传统的甘蔗试管苗生产工艺流程由培养物建立、继代增殖、生根培养和苗圃驯化移栽等四个步骤组成,其中前三个步骤无菌培养室内进行,所有流程均要求无菌操作,苗圃驯化移栽在日光温室中进行。采用甘蔗试管苗光合自养生根技术后,新的甘蔗试管苗生产工艺流程由三个步骤组成(图2),比传统的试管苗生产流程更简化。在传统的甘蔗试管苗生产工艺流程中,试管苗增殖继代和生根培养过程都在室内完成,都要求无菌操作,两个步骤竞争培养室和组织培养室内设施设备,因此试管苗增殖继代和生根培养工作有冲突,不可同时进行,制约了试管苗的增殖继代数量,从而影响试管苗生产数量;而在简化了的甘蔗试管苗生产工艺流程中,增殖继代培养和试管苗生根分别在培养室和日光温室中进行,增殖继代培养在封闭和无菌环境下进行,而试管苗生根在开放的、有菌的日光温室中进行,增殖继代培养和试管苗生根工作不会产生冲突,可同时进行,组织培养室内设施设备可全部用于甘蔗试管苗继代增殖,这一改变可大幅度增加试管苗继代次数和产量,理论上,甘蔗试管苗继代增殖工作不会被试管苗生根流程所打断,试管苗增殖继代时间大幅度延长,在不增加组织培养室和室内设施设备建设投入的情况下,试管苗生产量将会按增殖系数的几何级数增加。
2.3.2 甘蔗试管苗光合自养生根技术流程比传统的试管苗生根流程更简化 在传统的甘蔗试管苗生根流程里,试管苗生根培养和操作流程都是在实验室或无菌培养室内完成,试管苗是放在盛有根培养基的培养容器中进行生根,生根环境特点是环境密闭,透气性差;光照强度弱(<2 000 lx),恒温(30 ℃)和高湿度(达到100%)。而甘蔗试管苗光合自养技术操作步骤及环境与传统试管苗生根技术完全不同(图3),甘蔗试管苗光合自养生根技术操作步骤少,简单;操作环境为普通日光温室大棚,有菌开放,透气性好;光照强度高(>2 000 lx),温度波动幅度大和湿度波动幅度处于70%~100%之间;生长素通过喷施叶片导入试管苗,生根基质为新鲜河沙与黄泥或充分氧化田园土的混合物,试管苗在生根期间内并不一直浸泡培养基和生长素溶液中。
2.3.3 甘蔗试管苗光合自养生根技术与传统生根技术成本比较 按图3所示两种试管苗生根技术工艺流程,分别选取99瓶GT44试管苗进行传统的异养培养生根和120瓶试管苗进行光合自养生根,移栽苗圃后统计结果见表2,并以表2平均每瓶存活植株数量和平均每孔存活植株数的计算结果为基础分别计算了甘蔗试管苗光合自养生根方法和传统试管苗生根方法的单株试管苗成本,它们分别是每株0.002 85元和每株0.081 1元,甘蔗试管苗光合自养生根方法的单株试管苗生根成本为传统生根方法的1/28(表3)。如果采用甘蔗试管苗光合自养生根技术,甘蔗试管苗单株成本每株可降低0.083 95元。由于试管苗细小,又是丛生,数量统计难度,目测法选取试验材料有一定的误差,传统生根方法选取99瓶试管苗种植了511孔,而光合自养生根方法120瓶,只种植了459孔,误差也有可能是丛栽种植时分苗不均匀所致,虽然有这样的误差存在,但试验结果还是能充分说明甘蔗试管苗光合自养生根方法的单株试管苗生产成本远远低于传统的试管苗生根方法的单株成本。
2.3.4 甘蔗试管苗光合自养生根方法与传统试管苗异养培养生根方法比较 通过对甘蔗试管苗叶片喷施外源生长素和炼苗24 h,使外源生长素对试管苗产生持续生根诱导效果,启动试管苗不定根发育进程,在有菌的沙土栽培条件和一定光照、温度和湿度条件下完成不定根根原基发育和伸长,试管苗和根的生长质量均高于传统的无菌培养生根方法,苗圃移栽存活率在96%以上,与有根试管苗的移栽存活率无显著差异。甘蔗试管苗光合自养生根技术是一项新型的试管苗生根技术,与传统的培养基异养生根技术比(表4),具有显著优势,该技术操作简单、简化试管苗生产流程、投入大幅度减少和生产效率高,可完全替代传统试管苗生根技术。
3 讨论
3.1 外源植物生长调节剂处理方法与不定根的发生发育
本研究的独特之处是将外源植物生长调节剂溶液喷施甘蔗试管苗叶片和植株,然后在日光温室内炼苗24 h,接着种植日光温室内在光照和植物激素的共同作用下诱导不定根发生、根原基形成和伸长并突破表皮,而传统的植物试管苗生根方法是将外源植物生长调节剂预先加入到培养基中,培养消毒灭菌后,再接种试管苗于培养基上诱导生根;或者将植物试管苗先在一定濃度的植物生长调节剂(无菌)中浸泡或培养一段时间,然后转入无植物生长调节剂的培养基中进行培养(巩振辉和申书兴,2007;邱运亮等,2010)。在植物试管苗瓶外生根试验研究方面,一般采用植物苗基部浸泡或速蘸生长素溶液(林艳等,1998; 黄卓忠生等,2007;王雪娇等,2017),他们报道的植物试管苗瓶外生根的最好生根率分别为切花月季试管苗72%、罗汉果试管苗96.11%和蓝梅试管苗75%。目前甘蔗试管苗光合自养技术获得最好的试管苗生根率为100%。外源生长素(如IBA)处理促进内源IAA的积累(Gonacalves et al,2008;陈凌艳等,2011),而高浓度IAA是启动植物不定根发生发育的关键因素(Gaspar et al,1992; De Klerk,2002; Hou et al,2010)。林士杰等(2006)认为在不定根发生过程中,外源激素NAA的作用可能通过改变各种内源激素含量变化,从而使其达到动态平衡来间接诱导不定根的发生和分化。在甘蔗试管苗光合自养生根试验中,叶片喷施ABT2号生根粉处理比不喷施的对照提前5 d出现第一批可见根,且根的数量多,这个结果也间接表明,外源生长素处理试管苗叶片后,内源生长素和碳水化合物加速向叶鞘基部区域运输,从而启动和加速了不定根的发生发育进程,而没有喷施的对照只有等叶片光形态建成后,叶片光合作用和合成内源生长素功能恢复正常后,叶鞘基部区域才有可能富积内源生长素和碳水化合物,才可能启动生根进程,因此根生长速度慢于喷施处理。
De Klerk(2002)报道苹果试管苗微扦插不定根发生发育过程划分为三个阶段:脱分化阶段(0~24 h)、诱导阶段(24~96 h)和分化阶段(96 h后),在分化阶段根原基形成、伸长和突破表皮,在取得切段120 h后,根原基分生组织才形成,根突破表皮应该是5 d以后。不同植物品种或基因型的不定根发生发育时间也是有差异的,Schwambach et al(2008)将蓝桉树(Eucalyptus globulus×maidennii)的微枝扦插生根分为三个阶段,处理后0~5 d为诱导阶段,5~15 d为根原基形成阶段和15~45 d为根原基伸长阶段。本研究结果表明,GT44和B9第一批根出现时间是移栽后第4天或者处理后第5天,生根率达100%的时间是移栽9 d后,由于试管苗单株间生理状态不一样,不定根发生发育也有先后;另外品种不同不定根发生发育情况也不一样,如GT49第一批根出现的时间是处理后第10天,生根率达100%的时间出现在处理后的第21天。
De Klerk(2002)研究结果表明根诱导到根原基形成前这个时期,生长素起促进作用,而根原基伸长阶段,生长素起抑制作用;徐振华等(2002)报道大量研究结果表明,根原基的启动和形成阶段生长素起着关键作用,而根原基的伸长和生长则可以在没有外源生长素的条件下实现。甘蔗试管苗光合自养生根通过植株喷施外源生长素启动不定根的发生发育,随着不定根发育进程的推进,外源生长素的效应也会逐渐衰减直至消失,而培养基异养生根时,试管苗生根完成前一直浸泡在含有生长素的培养基里,不利于根原基伸长和苗的生长,因此,甘蔗试管苗光合自养生根技术是一种更符合不定根发生发育规律的生根方法。
3.2 试管苗质量对甘蔗试管苗光合自养生根的影响
甘蔗试管苗光合自养生根过程是试管苗由异养生长过渡到自养生长的过程,同时也是生长环境从无菌过渡到有菌环境的过程,生长环境从恒温、恒湿、光照强度恒定和弱光照的人工环境过渡到环境温湿度和光照强度大幅度波动及高光照强度环境过程,甘蔗试管苗光合自养生根过程中胁迫因素很多,包括环境胁迫、 生物胁迫、高浓度植物激素处理胁迫和营养缺乏胁迫,因此只有高素质试管苗才能抵抗各种胁迫而生存下来完成不定根的发生发育过程,甘蔗试管苗质量包括植株高度4~6 cm,植株健壮和叶面积大、叶片青绿,特别是叶片质量和叶面积大小特别重要,因为喷施外源激素主要通过叶片发挥作用,另外植株生根和生长所需要的碳水化合物和内源生长素均来源于叶片。试管苗的植物学形态和生理状态受基因型影响,不同甘蔗品种试管苗的株高、叶片形态特征、叶片太小和植株的生理生化特征差别大,抗逆性也不一样,导致不同品种试管苗光合自养生根特征差异大,甘蔗品种桂糖44号和B9表现极易生根;桂糖32号和桂糖49号表现为易生根;而桂糖48号表现为难生根。徐振华等(2002)报道不同植物、不同基因型、不同幼化程度对不定根的发生发育有决定性的影响,并且认为多次继代、半木质化、叶片肥厚、茎秆粗壮的无根试管苗是获得较高生根率的保证。Thomas(2000)报道,葡萄砧木插条的叶面积、质量和着生位置影响根的发生发育,带小叶的插条在诱导培养基上不定根出现迟,且根质量差,茎生长弱和芽早期萌发;而带大叶的插条相反,不定根发生早,根活力强。在甘蔗试管苗光合自养生根试验中,试管苗叶片多、大和青绿的容易生根,生根率高和存活率高,反之则难生根,生根率和存活率都低。王涛等(2007)报道香果树试管苗瓶外生根试验中,试管苗茎越粗,苗越壮,其生根效果越好,茎粗>0.15 cm时生根率达到81.6%,平均单株生根6条,平均根长达到5 cm。
3.3 环境因素对甘蔗试管苗光合自养生根的影响
3.3.1 光照 甘蔗试管苗光合自养生根过程中光照发挥了关键作用,光照强度一般控制在2 000~15 000 lx,长期弱光照和长期强光照不利于试管苗正常生长,会导致植株死亡率升高,最佳光照强度为5 000~8 000 lx,并且以散射光为好,因此要求温室大棚四周围塑料薄膜避免阳光直接照射苗圃,遮阳网只盖天面,不盖温室四周,保证温室苗圃有较强的散射光。林艳等(1998)认为弱光及较强散射光对切花月季组培苗微插生根有利,生根过程应尽量避免强光直射,尤其是在温度较高的夏季更应该注意。甘蔗试管苗光合自养生根过程是试管苗从异养生长过渡到自养生长的过程,期间涉及根的再生与生长、叶片结构和功能正常化以及新叶和新芽的生长,这些任务的完成都需要光照和光合作用条件的改善才能完成。潘瑞炽(2014)认为单子叶植物叶片展开和根原基启动是受光敏色素控制的。甘蔗试管苗叶片是恒温、恒湿和异养的人工环境下生长发育而成,其叶片与大田生长植株叶片不一样,表现异常,没有功能气孔、表皮发育不正常和光合效率低等,试管苗温室移栽后,如果不采取遮光和保湿措施等,则试管苗根本不可能存活。植物试管苗移植到温室后叶片形态结构会发生一系列变化,以适应外界环境条件,这些变化包括叶片厚度逐渐增加、叶肉细胞分化成栅栏组织和海绵组织、气孔密度减小、气孔形状由圆形变成椭圆形等(Chandra et al,2010)。Rodriguez et al(2003)报道了甘蔗试管苗从培养室到温室驯化期间的生理指标变化结果,发现光合作用指标在移栽温室后逐步由异常过渡到正常,如光合作用最大值从室内培养时的0.51 μmol CO2·m-2·s-1增加到驯化第14天的3.54 μmol CO2·m-2·s-1,而试管苗的蒸腾速率则由室内培养时的0.97 mol H2O·m-2·s-1降低到驯化第14天的0.66 mol H2O·m-2·s-1,气孔功能正常后,表皮水分损失下降;并且认为只要环境条件满足要求,试管苗是能够实现自养代谢的。目前植物组织培养流程中大部分植物种类都是采用培养基异养生根方法,生根环境特点为弱光照(光照强度≤2 000 lx)、MS培养基供应养分和生长环境密闭、通透性差,致使试管苗光合作用弱和叶片发育异常。如果植物试管苗移栽至日光温室(光照强度:1 000~80 000 lx,波长300~2 000 nm)后試管苗光合效率能大幅度提高和叶片通过光形态建成恢复正常结构和功能,试管苗获得自养代谢能力,那么植物试管苗都可实现光合自养生根,到时植物试管苗光合自养生根技术则可替代传统的异养生根技术,简化生根程序,降低生产成本,提高效率。
3.3.2 温度 温度是影响甘蔗试管苗光合自养生根的最重要的环境因素之一,最适宜生根温度为28~30 ℃,平均气温低于20 ℃时,第一次出现根的时间延后到移栽后15 d,且存活率下降,温度调节方式包括冬季盖塑料薄膜增加温度,增加光照,夏季盖遮荫网降低温度和光照强度。果树试管苗生根的温度范围一般在21~30 ℃,苹果无根试管苗的最佳生根温度为28 ℃,而在23 ℃和21 ℃生根率下降(李胜等,2003)。
3.3.3 湿度 湿度对甘蔗试管苗光合自养生根也有重要影响,但是可以控制,湿度太低,试管苗容易脱水死亡;湿度太高病原微生物滋生导致试管苗染病死亡,降低存活率,因此,一般温室湿度控制在70%~100%,并在拱棚顶部开小孔通风透气,且每隔5 d喷施土菌消溶液控制土传病害发生和蔓延。另外,温室苗圃排灌条件要好,既要保证水份供应,又要避免积水导致试管苗死亡,存活率下降。
甘蔗试管苗光合自养生根技术是通过叶片喷施高浓度外源激素,诱导内源生长素合成,生长素通过极性运输在试管苗叶鞘基部富集,高浓度内源生长素刺激启动试管苗不定根的发生,在有菌环境条件下完成细胞分裂、根原基的形成和伸长过程;基因型和试管苗质量是影响甘蔗试管苗光合自养生根的关键因素;甘蔗试管苗光合自养生根技术比传统试管苗培养基生根技术拥有更多优势,并且操作简单、程序简化、生根率和成活率高、省工、节省能源、节省生产成本和效率高,能够替代传统的试管苗生根技术,应用于商业化生产。