杭州地区羊水染色体检查结果分析

汪燕 李华伟 李兰丁 杨南南 王昊

我国是新生儿缺陷高发国家，根据世界卫生组织估计，我国新生儿缺陷发生率约5.6%，且呈逐年上升趋势［1］，已成为影响儿童健康和出生人口素质下降的重大公共卫生问题。染色体病是造成新生儿缺陷最常见原因之一，且尚无根治方法，目前国内已基本建立“孕中期血清学筛查+羊水染色体核型分析”为主的产前筛查诊断体系，是发现染色体病、降低新生儿缺陷的重要手段。本文探讨羊水染色体核型分析在妊娠中期产前诊断的胎儿染色体异常中的应用。

1 临床资料

1.1 一般资料 2015年1月至2016年12月杭州市产前诊断中心就诊的需进行羊膜腔穿刺术的高风险孕妇4360例。年龄19～46岁，平均年龄（33.05±4.21）岁。孕17～26周，平均孕（20.52±2.18）周。羊水穿刺产前诊断指征为高龄、21-三体综合征高风险、18-三体综合征高风险、胎儿无创DNA检查高风险、超声异常、夫妇之一为染色体异常携带者、不良孕产史等。抽取羊水进行细胞学培养与染色体核型分析。

1.2 方法 受检孕妇在B 超引导下进行羊膜腔穿刺术，弃去最初的1ml羊水后取20ml羊水送检。无菌条件下将羊水平均分为两管各10ml，1500r/min离心8min后弃上清液，留取约0.5ml沉淀加入4ml羊水培养基（BIO-AMF-2，BI，以色列），充分混匀后转入25cm细胞培养瓶（BD公司），置37℃5% CO2培养箱中培养6d后更换培养基，再过48h后根据细胞生长情况，常规方法收获细胞、制片显带，并进行染色体核型分析。每例羊水总共计数20个核型、分析6个核型，按照《ISCN2009》的标准描述核型。

2 结果

2.1 染色体培养情况 4360例羊水标本中，4345例穿刺后培养成功，15例培养失败，培养成功率99.66。

2.2 染色体异常核型分布 见表1。

表1 248例羊水染色体异常核型分布［n（%）］

2.3 不同羊水穿刺指征下异常核型检出情况 见表2。

表2 不同指征下异常核型检出情况

2.4 不同羊水穿刺指征的染色体异常真阳性率 见表3。

表3 不同羊水穿刺指征的染色体异常的真阳性率

3 讨论

羊膜腔穿刺术及羊水细胞染色体核型分析是产前诊断胎儿染色体病，降低出生缺陷的经典方法［2］。研究显示新生儿中染色体异常率约为0.85%，据以往浙江省及杭州地区产前诊断羊水中染色体异常发生率3.60%～3.69%［3-4］。本资料结果显示染色体异常检出率为5.71%，与上述研究有所差异。

杭州地区产前诊断的指征主要为血清学筛查高风险（50.61%）、高龄（33.83%）、超声异常（6.17%）、异常妊娠史（4.72%）及无创DNA检测异常（3.96%）。血清学筛查相对于其他产前诊断方法操作简单，易于开展，成本和流产风险也较低［5］，仍然是目前产前诊断的主要指征。血清学筛查检出的染色体异常占所有异常病例29.03%，且不局限于21-三体和18-三体，证明传统的血清学筛查不仅可筛选出相应的染色体数目异常，还可提示其他类型染色体异常。但该指征存在一定的假阴性率［6］，本资料也显示21-三体高风险筛查出染色体异常的真阳性率低（2.62%），因而其临床应用策略仍有待进一步优化。

近年来无创产前检测技术发展迅速，目前已能可靠地检测21/18/13三体组合。本资料结果显示非整倍体异常仍为杭州地区胎儿染色体异常的主要组成部分，常见的21-三体（44.35%）、18-三体（14.52%）及13-三体（2.42%）占全部染色体异常核型61.29%。无创DNA检测技术因其真阳性率高且异常核型检出率较高，已逐渐成为一种更为有效的筛查方法。但研究显示其仍然存在一定程度漏诊风险，建议“慎用于产前筛查高风险预产期年龄≥35岁高龄孕妇及有其他直接产前诊断指针的孕妇”［7］。

本资料显示，不同指征的真阳性率和染色体异常检出率并不平行：真阳性率显示，无创DNA检测异常（58.14%）较高，18-三体高风险（13.24%）次之；而异常检出率显示，无创DNA检测异常最高（2.30%），其次是21三体高风险（1.24%）和高龄（1.10%）。提示在分析各指征检出率数据时，不仅要关注指征的敏感度，更要关注各指征普及程度对检出率的影响。推测本地区染色体异常的总体检出率较往年大幅提高［4］，可能是“无创DNA检测异常”指征引入导致的结果。

［1］ 中华人民共和国卫生部. 中国出生缺陷防治报告. 2012. 9.

［2］ Aypar U, Thorland EC, Hoppman N. Prenatal diagnosis of chromosome abnormalities: past, present, and future. Clinical chemistry, 2013,59(10): 1432-1434.

［3］ 朱宇宁, 吕时铭, 陈雁, 等. 12841例羊水染色体核型分析与分子技术应用漏诊风险分析. 中华检验医学杂志, 2015, 38(8): 517-521.

［4］ 王昊, 汪燕, 孙博, 等. 杭州地区2151例羊水染色体检查结果分析. 中国优生与遗传杂志, 2013, 21(11): 32-33.

［5］ Syngelaki A, Pergament E, Homfray T, et al. Replacing the combined test by cell-free dna testing in screening for trisomies 21, 18 and 13: impact on the diagnosis of other chromosomal abnormalities . Fetal Diagn Ther, 2014, 35(3): 174-184.

［6］ 刘启兰,胡娅莉,许争峰,等.江苏地区以人群为基础的唐氏综合征产前筛查和诊断研究.中华医学遗传学杂志,2010, 27(3):340-342.

［7］ 中华人民共和国卫生计划生育委员会妇幼健康服务司.高通量基因测序产前筛查与诊断技术规范(试行),2015.