种植环境对不同种苗类型甘草生长和药材质量及产量的影响
2018-05-18李海华梁帅杰
李海华,青 梅,于 娟,梁帅杰,姜 旭,石 垚
(1.内蒙古医科大学药学院,呼和浩特 010110;2.内蒙古恒光大药业有限公司,赤峰 025250)
甘草(GlycyrrhizauralensisFisch.)为豆科甘草属植物,以乌拉尔甘草、光果甘草和胀果甘草的根及根茎入药,甘草中成分复杂多样,药理作用广泛[1-2],含有三萜类和黄酮类化合物[3],还有香豆素类、生物碱、多糖[4-5]、有机酸和氨基酸等多种成分,在抗炎[6]、抗病毒[7]、调节心脑血管和抗肿瘤等方面有较强药理作用,同时具有一定的降血糖[8]、止咳、止痛、解毒[9]和镇静作用。
甘草又名国老、甜草,生于向阳干燥的钙质草原以及河岸沙质土等地。近年来,随着甘草应用越来越广泛,使用量越来越大,而野生甘草禁止采挖,因此,发展甘草种植业是解决甘草资源匮乏的唯一途径。栽培甘草的质量和产量受种植环境、种植栽培技术[10-11]和田间管理的影响。杨辉等[12]和祖勒胡玛尔·乌斯满江等[13],研究了甘草质量和种植模式与土壤和生态因子之间的相关性,也有学者研究了锰胁迫对甘草生理和生长特性的影响,适宜的种植环境[14]、关键的种植技术[15]以及种植后的田间管理[16]显得尤为重要,研究开发甘草种植新技术,选育甘草优良种苗类型,是大幅度提高甘草产量与质量的关键。
根据甘草的生物学特性与有效成分含量的综合评价,筛选内蒙古巴彦淖尔市乌拉特前旗的野生甘草作为优良种质,将其栽培种苗分为主根不分叉粗、主根不分叉细、主根分叉粗和主根分叉细4个主根类型[17],采用随机区组设计在赤峰市翁牛特旗、锡林郭勒盟正蓝旗和鄂尔多斯达拉特旗3个基地建立评价圃,分别用地上部分、地下部分和产量3个方面19项指标进行数据采集和分析,研究不同种植环境对不同种苗类型甘草的影响。地上部分9个生长指标:株高、地茎、复叶长、小叶数、小叶长、小叶宽、顶叶长、顶叶宽和分蘖数等;地下部分9个生长指标:根粗(D1)、根粗(D20)、尖削度、主根长、全根长、侧根数、鲜根质量、干根质量和干鲜比;6种有效成分质量指标:芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、芒柄花苷和甘草酸的含量。
1 仪器与试药
1.1仪器 Waters e2695型高效液相色谱仪,Waters W2998 PDA检测器,Empower 3色谱工作站(北京京科瑞达科技有限公司);AR 124CN电子天平(奥豪斯仪器有限公司);色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)(Themo Fisher公司);KQ-250DA型数控超声波清洗器(昆山超声仪器有限公司);DQ-103/104/105型台式方形中药切片机(温岭市林大机械有限公司);0.45 μm针筒式微孔滤膜过滤器(天津市科亿隆实验设备有限公司);DS-50型高速万能粉碎机(上海顶帅工贸有限公司)。
1.2试药 甘草酸(批号130525)、异甘草苷(批号130805)、芹糖甘草苷(批号140310)、芹糖异甘草苷(批号150712)和芒柄花苷(批号130827)对照品,购于四川成都植标化纯生物科技有限公司,质量分数均在98%以上,可供含量测定用;甘草苷(批号111610-201106),购于中国食品药品检定研究院,供含量测定用;乙腈为色谱纯(美国Fisher公司);乙醇为分析纯(天津风船化学试剂科技有限公司);磷酸为分析纯(天津科盟化工工贸有限公司);甲醇为分析纯(沈阳华东试剂厂)。
甘草药材来源于赤峰、达旗和锡盟3个基地移栽2年的4个种苗类型的甘草为实验材料,待样品自然晾干后,以小区为单位从30株甘草根中按照粗、中、细各2根的标准筛选出6株甘草根,截取芦头以下10~30 cm处(即中间20 cm)的部分,通过切片、打粉,过60目筛,混匀,备用。
2 方法与结果
2.1种植环境对不同种苗类型甘草生长指标的影响 2013年10月,课题组在赤峰市翁牛特旗、锡林郭勒盟正蓝旗和鄂尔多斯达拉特旗3个基地,共48个小区,对移栽2年的甘草进行样品的采集,按照5点法对各小区20株甘草进行地上生长指标的测量,共960株;各小区采挖30株甘草根,对其地下生长指标和地上生长指标进行测定,共1 440株。
2.1.1实验方法 测量上述采集的各小区30株甘草地上生长指标地径、株高、复叶长、小叶数、小叶长、小叶宽、顶叶长、顶叶宽和分蘖数,采用SPSS 20.0统计学软件对不同生长环境下4种种苗类型甘草地上生长指标进行多重比较和秩和检验分析,确定最优种植环境。
采集的各小区30株甘草根为实验材料,测量记录实验样品的地下生长指标全根长、主根长、根粗(D1)、根粗(D20)尖削度、侧根数和鲜根质量等,待样品干燥后,称定干根质量,计算干鲜比。用统计学软件SPSS 20.0对不同生长环境下4个种苗类型甘草地下生长指标进行多重比较和秩和检验分析,确定最优种植环境。
2.1.2实验结果
2.1.2.1地上生长指标
2.1.2.1.1不同环境下主根不分叉粗的甘草地上生长指标测量和统计分析结果 达旗种植甘草的9个地上生长指标地茎、株高、复叶长、小叶数、小叶长、小叶宽、顶叶宽、顶叶长和分蘖数的均值最大,分别为4.68 cm,68.07 cm,14.90 cm,8.78枚,3.10 cm,2.03 cm,3.22 cm,2.07 cm和3.16个,结果表明,达旗>赤峰>锡盟。
统计分析结果表明,不同种植环境对主根不分叉粗的甘草地上9个生长指标均有影响;除了达旗和赤峰的甘草在小叶数和分蘖数上差异无统计学意义(P>0.05),其他差异均有统计学意义(P<0.01)。
2.1.2.1.2不同环境下主根不分叉细的甘草地上生长指标测量和统计分析结果 达旗种植甘草的9个地上生长指标地茎、株高、复叶长、小叶数、小叶长、小叶宽、顶叶宽、顶叶长和分蘖数的均值最大,分别为5.33 cm,68.18 cm,15.71 cm,9.45枚,3.25 cm,2.27 cm,3.31 cm,2.11 cm和3.23个,结果表明,达旗>锡盟和赤峰。
统计分析结果表明,种植环境对主根不分叉细的甘草地上9个生长指标均有影响,达旗和赤峰、锡盟之间差异有统计学意义(P<0.01)。
2.1.2.1.3不同环境下主根分叉粗的甘草地上生长指标测量和统计分析结果 达旗种植甘草的9个地下生长指标地茎、株高、复叶长、小叶数、小叶长、小叶宽、顶叶宽、顶叶长和分蘖数的均值最大,分别为5.35 cm,73.71 cm,14.67 cm,9.21枚,3.12 cm,1.89 cm,3.27 cm,2.11 cm和3.20个,结果表明,达旗>赤峰>锡盟。
统计分析结果表明,种植环境对主根分叉粗的甘草地上9个生长指标均有影响,除了锡盟和赤峰之间的小叶数、复叶长和株高3个指标差异无统计学意义(P>0.05),其他指标间差异均有统计学意义(P<0.01)。
2.1.2.1.4不同环境下主根分叉细的甘草地上生长指标测量和统计分析结果 达旗种植甘草的9个地上生长指标地茎、株高、复叶长、小叶数、小叶长、小叶宽、顶叶宽、顶叶长和分蘖数的均值最大,分别为5.39 cm,66.03 cm,15.49 cm,9.76枚,3.39 cm,1.95 cm,3.20 cm,2.07 cm和3.04个,9个生长指标均以达旗的最好,结果表明,达旗>赤峰>锡盟。
统计分析结果表明,种植环境对主根分叉细的甘草地上9个生长指标均有影响,达旗与锡盟和赤峰间地茎、株高、小叶数、小叶长、顶叶长和小叶宽6个指标差异均有统计学意义(P<0.01)。
2.1.2.2地下生长指标
2.1.2.2.1不同环境下主根不分叉粗的甘草地下生长指标测量和统计分析结果 达旗种植甘草的7个地下生长指标根粗(D1)、根粗(D20)、尖削度、全根长、主根长、鲜根质量和干根质量的均值最大,分别为16.25 cm,12.32 cm,0.76,54.65 cm,33.79 cm,75.72 g和42.32 g;侧根数是锡盟甘草最多,为2.95根;干鲜比是赤峰和锡盟最高,为0.62;结果表明,达旗>赤峰>锡盟。
统计分析结果表明,不同种植环境对主根不分叉粗的甘草地下7个生长指标均有影响,所有地下生长指标达旗、锡盟和赤峰差异均有统计学意义(P<0.01)。
2.1.2.2.2不同环境下主根不分叉细的甘草地下生长指标测量和统计分析结果 达旗甘草的6个指标根粗(D20)、尖削度、全根长、侧根数、鲜根质量和干根质量的均值最大,分别为14.12 cm,0.80,57.49 cm,3.30根,97.66 g和57.10 g;赤峰种植甘草的3个地下生长指标根粗(D1)、主根长和干鲜比均值较高,分别为17.83 cm、30.72 cm和0.61;结果表明,达旗>锡盟>赤峰。
统计分析结果表明,不同种植环境对主根不分叉细的甘草地下9个生长指标均有影响,赤峰和锡盟的干鲜比差异无统计学意义(P>0.05),其他指标差异均有统计学意义(P<0.01)。
2.1.2.2.3不同环境下主根分叉粗的甘草地下生长指标测量和统计分析结果 达旗种植甘草的7个地下生长指标根粗(D1)、根粗(D20)、尖削度、全根长、主根长、鲜根质量和干根质量均值最大,分别为16.25 cm,12.32 cm,0.76,54.65 cm,33.79 cm,75.72 g和42.32 g;侧根数是锡盟甘草最多,为2.95根;干鲜比是赤峰和锡盟最高,为0.62;结果表明,达旗>赤峰>锡盟。
统计分析结果表明,不同种植环境对主根分叉粗的甘草地下7个生长指标均有影响,除了锡盟和赤峰之间的小叶数、复叶长和株高3个指标差异无统计学意义(P>0.05),其他指标间差异均有统计学意义(P<0.01)。
2.1.2.2.4不同环境下主根分叉细的甘草地下生长指标测量和统计分析结果 达旗种植甘草的7个地下生长指标根粗(D1)、根粗(D20)、尖削度、全根长、侧根数、鲜根质量和干根质量均值最大,分别为12.64 cm,9.54 cm,0.76,53.12 cm,2.66 cm,43.80 g和26.21 g;主根长是锡盟甘草最长,为27.78 cm;干鲜比是赤峰最高,为0.62;结果表明,达旗>赤峰和锡盟。
统计分析结果表明,不同种植环境对主根分叉细的甘草地下7个生长指标均有影响,除了赤峰和锡盟2地甘草的尖削比、主根长和侧根数差异无统计学意义(P>0.05),其余各指标间差异均有统计学意义(P<0.01)。
2.2种植环境对不同种苗类型甘草有效成分的影响
2.2.1色谱条件 色谱柱:Themo色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)。流动相A:色谱乙腈,流动相B:质量浓度为1 g·L-1的磷酸。梯度洗脱程序:0~15 min,18%A→19%A;15~16 min,19%A→21%A;16~33 min,21%A→24%A;33~35 min,24%A→33%A;35~49 min,33%A→39%A;49~56 min,39%A。不同时间检测波长:276 nm(0~25 min),360 nm(25~32 min)和250 nm(32~60 min)。柱温为 30 ℃;流速:0.6 mL·min-1;进样量:20 μL。HPLC图见图1。
图1HPLC图
A.混合对照品;B.甘草供试品;1.芹糖甘草苷;2.甘草苷;3.芹糖异甘草苷;4.异甘草苷;5.芒柄花苷;6.甘草酸。
Fig.1 HPLC chromatograms
A.mixed standards;B.licorice sample;1.liquiritinapioside;2.liquiritin;3.isoliquiritin apioside;4.isoliquiritin;5.ononin;6.glycyrrhizic acid.
2.2.2混和对照品溶液的制备 精密称取甘草酸、甘草苷、异甘草苷、芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷和芒柄花苷4.9,2.83,0.33,0.64,0.51和0.30 mg,用体积分数为70%的甲醇溶解,定容至5 mL量瓶中,超声30 min,即得质量浓度分别为0.98,0.566,0.066,0.128,0.102和0.06 mg·mL-1的混合对照品溶液,备用。
2.2.3供试品溶液的制备 精密称取样品0.10 g,置于具塞锥形瓶中,精密加入体积分数为70%的甲醇20 mL,称定质量并记录,80 ℃加热回流1 h,冷却至室温,再次称定质量,用体积分数为70%的甲醇补足减失的质量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
2.2.4精密度考察 精密称取达旗基地移栽2年的甘草粉末样品,按照2.2.3项下供试品溶液的制备方法进行制备,精密吸取供试品溶液20 μL,连续进样6次,测定6种成分的峰面积,计算得甘草酸、甘草苷、异甘草苷、芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷和芒柄花苷的RSD值分别为0.46%,0.57%,0.56%,0.61%,0.67%和1.73%。结果表明,该方法精密度良好。
2.2.5稳定性考察 精密称取同一甘草分析样品,按照2.2.3项下方法制备供试品溶液,精密吸取20 μL,分别于提取后0,3,6,12,18和24 h进样,测定其峰面积,结果表明,甘草酸、甘草苷、异甘草苷、芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷和芒柄花苷的RSD值分别为0.26%,0.32%,0.05%,0.03%,0.42%和1.36%。结果表明,供试品溶液在24 h内基本稳定。
2.2.6重复性考察 精密称取样品6份,按照2.2.3项下方法制备供试品溶液,精密吸取20 μL,测定其峰面积。结果表明,甘草酸、甘草苷、异甘草苷、芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷和芒柄花苷的RSD值分别为0.46%,0.40%,0.57%,0.38%,0.42%和1.64%。
2.2.7线性关系考察 分别精密吸取2.2.2项下制备的混合对照品溶液0.1,0.5,2,5,15和20 μL,按照2.2.1项下色谱条件,用HPLC法测定其峰面积。以峰面积(y)对进样量(x)进行回归分析,芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、芒柄花苷和甘草酸的线性范围、回归方程及线性系数见表1。
表1线性关系和线性范围考察结果
Tab.1 Results of linear relationships and linearity ranges
化合物线性范围/μg标准曲线r芹糖甘草苷1.28×10-2~2.56y=3.1E+5x-7562.610.99999甘草苷5.66×10-2~11.32y=1.8E+6x+2002.510.99999芹糖异甘草苷1.02×10-2~2.04y=5.5E+5x+43205.3060.99996异甘草苷6.60×10-2~1.32y=3.8E+5x-7113.950.99999芒柄花苷6.00×10-3~1.20y=4.0E+5x-31490.390.99997甘草酸9.80×10-2~19.6y=1.1E+6x+18842.030.99999
2.2.8加样回收率 精密称取已知含量的甘草样品粉末0.05 g,共6份,分别置于具塞锥形瓶中,分别加入对照品质量的80%、100%和120%,各2份,再加入体积分数为70%的甲醇20 mL,按照2.2.3项下方法制备供试品溶液,按照2.2.1项下色谱条件,进样20 μL测定;甘草酸、甘草苷、异甘草苷、芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷和芒柄花苷的平均回收率分别为98.94%,102.25%,97.48%,102.33%,97.43%和97.49%;RSD值分别为2.30%,1.59%,1.34%,2.26%,2.03%和2.70%。
2.2.9不同种苗类型甘草6种有效成分含量测定 用上述建立的HPLC法测定甘草中芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、芒柄花苷和甘草酸6种有效成分的含量,每个样品平行进样3次。并用统计学软件SPSS 20.0对4个种苗类型甘草的有效成分进行多重比较和秩和检验分析,结果见表2至表5,以有效成分指标高的数量作为确定最优种植环境的依据。
表2甘草不同环境主根不分叉粗有效成分
Tab.2 Effective components in the thick without bifurcation taproot of different environment ofGlycyrrhizauralensis
有效成分统计量P达旗均值/%中值/%标准差赤峰均值/%中值/%标准差锡盟均值/%中值/%标准差芹糖甘草苷15.5400.770.810.120.740.760.070.600.610.05甘草苷2.120.3471.311.430.341.311.310.111.311.330.18芹糖异甘草苷16.8500.230.230.040.220.220.030.170.180.02异甘草苷13.320.0010.250.280.060.210.200.020.190.190.01芒柄花苷24.4300.070.070.030.070.060.010.030.030.00甘草酸3.260.1962.562.670.662.562.540.132.382.380.25
通过多重比较和秩和检验分析可知:
(1)种植环境对主根不分叉粗的甘草中芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷和芒柄花苷4个有效成分均有显著影响,6个成分均以达旗基地最好;结果表明:达旗>赤峰>锡盟。
(2)种植环境对主根不分叉细的甘草6个有效成分指标均有影响,除赤峰和达旗之间的芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷和异甘草苷差异无统计学意义,其中芹糖甘草苷和芹糖异甘草苷以达旗最好,甘草苷、甘草酸、异甘草苷和芒柄花苷以赤峰最好;结果表明:赤峰>达旗>锡盟。
(3)种植环境对主根分叉粗的甘草6个有效成分指标均有影响,除了达旗和赤峰的异甘草苷和甘草酸差异无统计学意义,其他指标3个种植环境之间差异有统计学意义;甘草酸和甘草苷均以赤峰最好,异甘草苷、芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷和芒柄花苷以达旗最好;结果表明:达旗≥赤峰>锡盟。
(4)种植环境对主根分叉细的甘草6个有效成分指标均有影响,除了达旗和赤峰的异甘草苷和甘草酸差异无统计学意义,其他指标3个种植环境之间差异有统计学意义;甘草苷、芹糖异甘草苷和芒柄花苷以赤峰最好,芹糖甘草苷和甘草酸以锡盟最好,异甘草苷以达旗最好;结果表明:赤峰>锡盟>达旗。
表3甘草不同环境主根不分叉细有效成分
Tab.3 Effective components in thin without bifurcation taproot of different environment ofGlycyrrhizauralensis
有效成分统计量P达旗均值/%中值/%标准差赤峰均值/%中值/%标准差锡盟均值/%中值/%标准差芹糖甘草苷22.5400.650.680.060.700.660.130.420.410.05甘草苷25.2400.910.910.061.351.290.300.670.690.19芹糖异甘草苷22.2400.200.210.030.200.190.030.130.120.01异甘草苷22.8400.180.190.010.200.200.030.110.110.03芒柄花苷23.7600.050.050.000.080.060.040.020.020.01甘草酸26.4501.932.020.172.652.700.411.661.600.20
表4甘草不同环境主根分叉粗有效成分
Tab.4 Effective components in branching thick taproot of different environment ofGlycyrrhizauralensis
有效成分统计量P达旗均值/%中值/%标准差赤峰均值/%中值/%标准差锡盟均值/%中值/%标准差芹糖甘草苷14.000.0010.650.660.040.810.800.030.480.490.03甘草苷31.1400.950.950.180.890.850.191.241.210.17芹糖异甘草苷2.380.3040.200.200.010.230.230.020.140.140.01异甘草苷23.3100.190.190.030.190.160.060.170.170.03芒柄花苷8.020.0180.050.050.010.060.060.010.030.030.01甘草酸160.0702.202.140.302.332.250.532.572.570.12
表5甘草不同环境主根分叉细有效成分
Tab.5 Effective components in branching thin taproot of different environment ofGlycyrrhizauralensis
有效成分统计量P达旗均值/%中值/%标准差赤峰均值/%中值/%标准差锡盟均值/%中值/%标准差芹糖甘草苷17.6400.760.770.060.620.610.100.500.500.04甘草苷24.0801.191.200.251.451.410.250.760.670.30芹糖异甘草苷16.4400.240.230.010.190.180.030.150.150.02异甘草苷23.8300.230.240.050.200.200.050.160.170.03芒柄花苷10.960.0040.070.060.020.040.040.010.030.030.01甘草酸172.5702.642.610.182.642.620.491.931.820.53
2.3不同种植环境对不同种苗类型甘草产量的影响 每个基地建立16个小区实验田,各小区面积32 m2种植320株,同一种苗类型有4个小区共128 m2,1 280株。
2.3.1实验方法 各种苗类型按照采集的120株甘草的鲜品质量来计算亩产量(kg)。
2.3.2实验结果 通过称量计算不同种植环境的不同种苗类型的甘草亩产量得出结论:达旗基地主根不分叉粗、主根不分叉细、主根分叉粗和主根分叉细的甘草亩产量分别为505.04,235.11,651.38和229.16 kg;锡盟基地主根不分叉粗、主根不分叉细、主根分叉粗和主根分叉细的甘草亩产量分别为324.35,177.90,335.09和215.67 kg;赤峰基地主根不分叉粗、主根不分叉细、主根分叉粗和主根分叉细的甘草亩产量分别为215.95,120.07,279.18和121.77 kg。
结果表明,达旗基地4种种苗类型的甘草均比锡盟和赤峰的亩产量高。达旗基地主根分叉粗的甘草亩产量最高,达651.38 kg。
3 讨论
种植环境对不同种苗类型甘草的生长、质量以及产量有重要的影响。
(1)3个不同种植环境对甘草的生长指标、有效成分指标和产量均有影响:甘草生长指标:达旗>锡盟和赤峰;甘草有效成分含量:赤峰>达旗>锡盟;甘草的产量:达旗>锡盟>赤峰。综合以上结果,达旗基地在整体水平上比赤峰和锡盟的明显高,更适合甘草的种植。
(2)3个不同种植环境对不同主根类型种苗甘草的生长、药材质量和产量均有影响:主根不分叉粗种苗类型甘草:达旗>锡盟>赤峰;主根分叉粗种苗类型甘草:达旗>赤峰>锡盟;主根不分叉细种苗类型甘草:达旗>锡盟>赤峰;主根分叉细种苗类型甘草:达旗>锡盟>赤峰。综合考虑4个种苗类型的甘草达旗基地的均比锡盟和赤峰的甘草好。
甘草是我国传统中草药,历来有中医处方离不开甘草的说法,素有“国老”的尊号。甘草不仅在现代医学领域有着广泛而重要的作用,还可作为新型的饲料添加剂[18]和食品添加剂[19],在化妆品[20]、畜牧[21]和烟草行业[22]均有大量应用。研究和掌握甘草的种植技术,可为提高甘草的产量和质量提供科学指导。
参考文献:
[1] 任玲.甘草有效成分的药理活性研究[J].生物技术世界,2016,(5):227.
[2] 张明,邓毅.甘草及其有效成分的药效学研究进展[J].西部中医药,2015,28(4):156-159.
[3] 西力扎提·阿不来提,杨旭超,木合布力·阿布力孜,等.HPLC法测定新疆胀果甘草全草中甘草查尔酮A的含量[J].西北药学杂志,2016,31(2):130-132.
[4] Wang L,He Y,Qiu Z C,et al.Determination of glycyrrhizic acid inGlycyrrhizauralensisFisch.by fiber optic near infrared spectroscopy[J].Spectrosc Spect Anal,2005,25(9):1397-1399.
[5] 李玉山.甘草酸提取纯化工艺的研究进展[J].化学试剂,2016,38(5):428-432.
[6] 吴航.甘草黄酮抗小鼠肝纤维化药理作用的研究[J].菏泽医学专科学校学报,2016,28(1):11-13.
[7] 李阳,高欢,朱庆均,等.甘草化学成分抗病毒活性研究进展[J].山东中医杂志,2017,36(2):167-171.
[8] 张明发,沈雅琴.甘草及其有效成分抗糖尿病并发症药理作用的研究进展[J].抗感染药学,2015,12(3):324-327.
[9] 毕礼明,陈英兰.甘草治疗肾病研究进展[J].中国实验方剂学杂志,2015,21(11):228-231.
[10]林洁,谷铭.甘草种植栽培技术[J].新疆畜牧业,2015,(4):55-56.
[11]Kameoka R,Yasufuku N,Omine K, et al.Developing licorice planting techniques with cultural experiments focused on the water conditions of greening soil materials[J].J Agid Land Studies,2015,25(3):97-100.
[12]杨辉,贾光林,刘志英,等.不同产地甘草主要有效成分与生态因子的相关性研究[J].青岛农业大学学报:自然科学版,2013,30(4):289-294.
[13]祖勒胡玛尔·乌斯满江,朱军,李晓瑾,等.甘草不同种植模式与土壤微生态关联性的研究[J].中国现代中药,2016,18(11):1474-1478.
[14]Xiaosu Miao,Rongxiu Liu,Hongpei Liu,et al.Genetic and environmental effect on the growth characteristics and bioactive components of eight-year-oldGlycyrrhizauralensisFisch[J].Agri Gene,2017,3:57-62.
[15]高家强,史龙,杨明秀,等.甘草膜下滴灌生产技术[J].农村科技,2017,(7):54-56.
[16]徐莺.阿勒泰地区甘草主要虫害综合防治技术[J].乡村科技,2017,(5):36-37.
[17]梁帅杰,青梅,于娟,等.不同种苗类型甘草的质量评价研究[J].时珍国医国药,2017,28(6):1459-1462.
[18]李世传,闫冰.甘草的研究进展及其在饲料生产中的应用[J].饲料与畜牧,2014,(2):28-29.
[19]彭雪萍,马庆一,刘艳芳,等.甘草抗氧化物在冷却肉保鲜中的应用研究[J].食品工业科技,2007, 28(4):67-69.
[20]王建国,周忠,刘海峰,等.甘草的活性成分及其在化妆品中的应用[J].日用化学工业,2004,34(4):249-251.
[21]郭同军,朱宏斌,张俊瑜,等.甘草的理化特性及其在畜牧生产中的应用[J].中国畜牧兽医,2014,41(9):105-109.
[22]杜宇,王欣林,朱龙,等.甘草色素优化提取及其热裂解产物在卷烟品质评价上的应用[J].贵州农业科学,2015,43(12):178-181.