谈谈实验教学的成与败

赵志丰

一、绿叶中色素的提取和分离

这个实验存在的问题是，把过滤液收集到试管用棉塞塞紧，滤液会分层，上层色较淡，色素较少，做实验效果差一些，色素层淡，看不清，易消失；画滤液细线要用下层滤液。

第一，可以用新仪器研磨过滤器代替试管，粗滤液可以在研磨过滤器中再研磨，继续浸泡提取色素，保存滤液，滤液颜色深，色素多，有利于提高实验效果。研磨过滤器单独来做实验，就是研磨作用有限，研磨杆易梗塞，掉落滤网罩，一些学生容易把材料装错了，装入研磨杆中，使材料研磨不着。研磨过滤器使用方法要详细讲解和演示，它是反向过滤的；还有一点要注意的：研磨过滤器用水洗后，容易积水在里面，洗后要抖去研磨杆里的水，实验后要把底座（外套筒）与研磨杆分开晾干；连续两节课间，把研磨过滤器的滤液及叶泥倒掉，刮干净就可以了再用。避免学生把过滤液放在烧杯（层析用的）中，层析前，又要把烧杯洗干净，烧杯壁上有水，会严重影响到层析的效果。

第二，药品、材料用量，二氧化硅（细沙）、碳酸钙粉末用量1/3或1/4药勺，菠菜、无水乙醇的量减半，即菠菜叶2.5g，无水乙醇5mL，研磨起来不会太费劲，易充分研磨，耗时少一些，滤液足够用，滤液不致太稀。层析液中的苯不可省略，苯有助于胡萝卜素的层析，层析后出现四条色素带。只含有石油醚丙酮的层析液，层析的结果是：上面是浅色素带，无法正常分层。最好使用层析液原配方。

第三，注意滤纸条的干燥；印滤液细线后及时用电吹风吹干，第一次画滤液细线，细线可能扩散，及时干燥再划线就不易再扩散了。滤纸条放在桌面要防止弄湿，研钵使用后，水洗之后，擦干再倒扣晾干；层析用的烧杯不要装过滤液，要保持干净，层析后，把层析液回收，烧杯加盖不要水洗，避免水分对层析的不良影响；烧杯壁有水珠要及时用纸巾擦干。

第四，层析烧杯上盖板的使用，有助于滤纸条的安放及防止层析液的挥发。盖板可以用铝塑板制作，切割成小段长方形，两片铝塑片盖在100mL烧杯上，中间的缝就可以插入滤纸条，滤纸条在适当高度（7cm左右相当于烧杯底到铝塑片上的距离）折一个直角，放入烧杯里进行层析，就不会移动了，比较稳定。

二、如何提升《观察根尖分生组织细胞的有丝分裂》的实验效果

这个实验是高中生物较难做的实验，因为是显微装片的制作，观察的是分裂期细胞中的染色体，较细微，在低倍镜下，要仔细观察，才能找到，分裂期较短，分裂期细胞所占比例较小，这些增加了实验难度，还有，统编教材中，实验材料，实验设计也存在一些不足和缺点，第一，通过一些实验探究，0.01g/mL龙胆紫染色液浓度太高（室温20度左右），一半（0.005g/mL）也较高，0.002g/mL龙胆紫染色液染2.5～3min，比较合适。第二，还有洋葱根要长到5cm才剪根尖，时间太长，长1至2cm就可以剪了，这时细胞的生长分裂也较快，洋葱的根经常不够用，用大蒜代替；有条件的话，最好把根预处理一下，如大蒜的根长到1至2cm时，把大蒜和培养皿一起转入冰箱冷藏，几小时或十几小时，讓细胞分裂停顿下来，提高分裂细胞的比例。第三，根解离后，根尖生长点细胞容易分散、丢失，染色前，根尖最好要用镊子或盖玻片压两下，使根尖展开，有利于均匀染色，有利于根尖里面的分裂细胞的染色体的染色，因此染色最好在载玻片上进行；以免染色后的根尖，分不清生长点，还是成熟区，不慎夹到生长点，把分生组织夹碎，或已经压散的根尖不便于转移，组织碎片容易丢失在培养皿的溶液中或被吸水纸吸走；减少分生组织、分裂细胞，容易导致实验失败；第四，用手指按压分散细胞，多数情况下，分散不开，对染色体的观察不利，还需要用震动来分散。在临时装片的盖玻片一侧加1、2滴水，过一分钟后，盖上塑料片，再用手指或铅笔木头端轻轻敲击，要用“轻功”，用轻巧、轻微的力道，有利于细胞分散，又不易损坏玻片，盖玻片易碎，多敲击，要它不碎，确实很难说。但适当的敲击有利于细胞的分散展开，有利于染色体的观察。另外，可以同时用两条根尖制作一个装片，不过两个根尖要分开0.5cm以上，细胞才不会太密集。

如果用改良苯酚品红染色，预先把解离漂洗后的根尖，直接转入品红染液中染色十几小时，制作装片时，用过滤网把根尖滤出，再转入稀醋酸溶液或2%葡萄糖溶液中，防止根尖细胞吸水膨胀，根尖分叉裂开，引起组织碎片的丢失。用这种染液染色，染色效果好，分裂相较清晰，只要根尖细胞生长较旺盛，粗壮，有分裂的细胞，制片技术过关，多数能找到分裂的细胞。有时候，根尖染色的时间过久，转入清水时间久，不易分散开时，可以再用1/2浓度的盐酸解离液处理2～3min，漂洗5～8min，再制作装片，则细胞易分散开，染色体清晰可见，间期染色深的细胞核有些脱色，但不会影响分裂细胞的观察。制作成功的临时装片，需要一些时间，还要耐心找，因此好的装片要保存起来，可以用甘油来保存，有保水作用。方法是：在装片的盖玻片一侧加一小滴甘油，不能加太多，避免吸水多，盖玻片浮起移位。把装片放入培养皿中，加少量清水，不漫过载玻片，盖上培养皿盖，放入冰箱冷藏室保存，可以使用几天，进行演示教学。

学生分组实验的成功率与多种因素有关，药品及仪器设备、选材，实验的方法步骤（一些实验可能一个关键步骤失误了，满盘皆输），师生的素质及操作能力等等有关，教师和实验员勇于创新，从实际出发，不唯书，在实验教学中，做一个有心人，发现实验过程的一些失误，及时纠正，对于提高实验的成功率有大的作用，如果漠视这些失误，则实验成功率会下降，一些难的实验会难上加难。总之，对实验教学要引起足够重视，它能提高学生的动手实践能力，有利于学生的素质教育；要投入，要用心去做，不要轻言放弃，难做的实验也会做好。