鱼溶浆对大棚养殖南美白对虾生长的影响

王春利等

摘要  {目的]评价鱼溶浆对大棚养殖南美白对虾生长的影响。{方法]以市售南美白对虾配合饲料作为基础饲料，试验饲料制品由5%鱼溶浆添加制成，测定南美白对虾养殖期间的生长指标、成活率、产量和血清免疫指标，并与仅投喂基础饲料的对照组做比较。{结果]试验组对虾提前7～9天上市，饵料系数降低了5.3%，AKP、CAT、PO三种酶的活力在对虾血清中均明显高于对照组（P<0.05）。{结论]南美白对虾饲料中添加5%鱼溶浆可以加快对虾生长速度、提高饲料利用率，增强对虾的免疫力。

关键词   南美白对虾;鱼溶浆;大棚;池塘;功效

中图分类号S  968.22文献标识码

A文章编号0517-6611（2018）36-0070-04

南美白对虾是我国乃至全世界最主要的对虾养殖品种，我国南美白对虾主要的高产高效化养殖模式是大棚多茬养殖，也是浙江省水产技术推广部门重点推广的南美白对虾养殖模式{1]。该模式是利用塑料薄膜覆盖从而达到保温效果，可以避开集中上市高峰期，实现反季节高价销售，达到不错的经济效益。但近年来，对虾养殖过程中出现病害频发及大面积爆发，这与养殖池塘生态环境和精准养殖化程度的关系十分密切{2-3]，因此，养殖池塘水体生态环境的变化、调控和高效饲料营养剂成为研究的热点。目前，国内外对于鱼溶浆在南美白对虾大棚养殖中的功效评价多有报道，但由于养殖区域、养殖方式、鱼溶浆配方、比例等方面的不同，在功效方面，鱼溶浆在养殖池塘水体的具体特点还有待进一步研究。

笔者在南美白对虾所使用的常规饲料中添加5%鱼溶浆组为试验组，常规饲料组作为对照组，试验了鱼溶浆对南美白对虾大棚养殖的产出率、血清免疫指标以及对虾生长指标的影响，使得在大棚养殖中，鱼溶浆作为一种营养添加剂在饲料中添加，其功效评价提供科学依据。

1试验材料

1.1试验原料鱼粉加工废水，由浙江丰宇海洋生物制品有限公司提供;南美白对虾虾苗，規格为0.7cm左右，购于海南三亚某水产养殖公司;南美白对虾2号配合饲料，购于宁波天邦股份有限公司。

1.2主要试剂中性蛋白酶（10万U/g），购自山东玖胜生物科技有限公司;盐酸、硫酸锌、亚硫酸钠、氢氧化钠、丙酮、溴甲酚绿无水乙醇、钼酸铵、98%浓硫酸、葡萄糖、硼酸、磷酸二氢钾、高氯酸硝酸、无水硫酸钠、石油醚40～60℃、对苯二酚、水合茚三酮、蒽铜、亚铁氰化钾，均为分析纯（AR），购于国药集团化学试剂有限公司。

1.3仪器与设备电热恒温鼓风干燥箱，吴江市创新烘箱制造有限公司;PHB-4型便携式PH计，上海三信仪表厂;日立L-8900全氨基酸自动分析仪，日本日立公司;丙林电子FA2204N精密电子天平，上海丙林电子科技有限公司;全自动索氏提取仪/脂肪仪LF-04型，济南蓝迈仪器有限公司;数显恒温水浴锅HH-4，上海创奕科教设备有限公司;上海精科可见分光光度计721G，上海仪电分析仪器有限公司;WR-2恒温水/油浴振荡器，上海思尔达科学仪器有限公司等仪器设备。

2试验方法

2.1鱼溶浆养殖效果

试验在浙江省舟山市岱山南锋水产养殖试验场同一塑料大棚内6口水泥底池塘进行，周期为103d（2016年4月20日—7月31日）。对照组编码为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，实验组编码为A、B、C，每口池塘面积667m2，池塘深1.5m，坡比1∶1.5。配置底部爆气管增氧设备和水面水车式增氧，池底配备中央排污设施{4]。按照相关技术规范使用底充式增氧设备{5]，水质调节使用微生物制剂，整个养殖过程不使用其他药物。

每口池塘均投放南美白对虾虾苗约12万尾。天邦南美白对虾2号为试验组基础配方，配合饲料其中添加质量分数为5%的鱼溶浆，充分搅拌混匀，自然干燥。对照组仅投喂天邦南美白对虾2号配合饲料。两组的投喂时间、投喂量均相同。

2.2鱼溶浆工艺制备采用酶解法制备鱼溶浆，工艺流程如图1所示。

在所采用的制备工艺中，水解用酶为中性蛋白酶，加酶量250U/g，酶解温度52℃，酶解时间2.5h。脱脂工艺使用三相卧螺离心机，使得油相成分相互分离，即获得较低油脂鱼蛋白水。浓缩工艺采用浓缩器真空减压发蒸发其水分。

2.3测定化学组分

总水分：参考GB/T5009.3-2003，采用直接干燥法;钾含量：参考GB/T5009.91-2003，采用火焰发射光谱法;氮含量：参考GB/T6432-94，采用凯氏定氮法;磷含量：参考GB/T5009.87-2003，采用分光光度法;脂肪含量：参考GB/T6433-2006，采用索氏抽提法;糖含量：蒽铜比色法。

2.4测定水解度甲醛电位滴定法{6]测定氨基态氮，按公式（1）计算水解度{7]：

DH（%）=水解后氨基态氮-水解前氨基态氮原料中总氮×100（1）

2.5氨基酸组成分析采用氨基酸自动分析仪测定。

2.6测定体长和体重平均值在每个南美白对虾饲养池中随机取40尾，测量体长，并取平均值。

用捕虾网在水池捕捉1kg以上南美白对虾，并进行计数，按公式（2）计算平均体重：

2.7成活率、产量统计及饵料系数计算产量是指在养殖结束时，养成对虾的总重量。本试验在每口塘对虾起捕后分别统计产量，试验组和对照组的产量取平均值。

成活率是指在养殖结束时，成活对虾的数量占投苗数量的百分比。按公式（3）计算，试验组和对照组的成活率取平均值：

饵料系数是指养殖对象增加一单位重量所消耗饵料的质量，按公式（4）计算，试验组和对照组的饵料系数取平均值：

2.8血清免疫指标测定方法

起捕后需即刻从6个饲养池中各取3尾作为待测样品，要求产品活力较好、规格相同且健康。从样品虾围心腔内抽血样，采用500U/mL的肝素钠溶液作为抗凝剂。经2500r/min高速离心机，离心10min后取上清液为血清样品。

采用赛默飞世尔科技有限公司的快速检测试剂盒，快速检测样品血清中超氧化物歧化酶（SOD）、酚氧化酶（PO）、过氧化氢酶（CAT）、碱性磷酸酶（AKP）。将两组样品检测结果取平均值。

2.9数据分析采用Excel2007和Origin7.5进行数据处理和作图;使用word2007作表;引用显著性差异分析（P<0.05）和方差分析方法，使用SPSS19.0软件操作。

3结果

3.1鱼粉加工废水营养成分的分析采用湿法生产的鱼粉加工废水经测定后，pH为6.8，其主要营养成分分析结果如表1所示。

蛋白质含量和氨基酸组成是南美白对虾饲料中最重要的营养指标，因此对废水的氨基酸组成进行了分析，结果见表2。南美白对虾必需氨基酸含量为23.55mg/g，所测结果显示，废水中各种氨基酸平衡、种类齐全，总含量高达55.50mg/g，占总氨基酸含量的42.43%，是南美白对虾饲料营养剂的理想原料。

3.2试验饲料配方的氨基酸组成试验组和对照组投喂饲料的氨基酸分析结果如表3。结果显示：添加鱼溶浆的试验饲料与对照组饲料的氨基酸相比，总量增加9.02%;与南美白对虾的必需氨基酸模式比较，试验饲料和基础饲料的必需氨基酸总量充足，分别增加了57.48%、47.95%，两种饲料的限制性氨基酸都是异亮氨酸，但对照组相对更缺乏;除蛋氨酸和精氨酸外，其它必需氨基酸含量试验组饲料均高于对照组，特别是缬氨酸、异亮氨酸等含量均接近或超过对照组8%，两组均能满足幼虾的需求，但试验组比对照组多15.49%。综上可知，添加了鱼溶浆的试验饲料不仅富含蛋白，而且氨基酸模式更好，更能满足南美白对虾生长的氨基酸需要。

3.3添加鱼溶浆对南美白对虾生长的影响

在对虾养殖过程中，定期测量各池塘对虾的生长指标，结果如图2、3所示。在4月20日—5月10日对照组和试验组南美白对虾生长缓慢，所测得体重、体长指标无明显区别，水温较低为主要原因，虾苗的摄食受到了一定影响;5月10日—20日，两组的生长速度明显加快，可能与水温不断上升有关，南美白对虾达到最适生长温度，但两组差异不明显，两组对虾的平均体重指标、平均体长指标约在2.9g、6.1cm;5月20日开始，试验组与对照组南美白对虾差异显著，试验组生长速度提升明显。在上市条件方面，对照组较试验组偏晚7～9d，试验组各池塘在7月16日起捕。

3.4添加鱼溶浆组的南美白对虾养殖产出率

7月16日开始，试验组的3口池塘起捕，7月27日捕完，而对照组中1号、2号池塘在7月23日开始起捕，3号池塘在7月25日起捕，7月31日捕完。每口池塘对虾起捕后，对产量和成活率进行统计，并计算饵料系数，结果见表4。对照组的饵料系数高于试验组，且差异显著（P<0.05），表明对照组饲料的生物利用率低，试验组更高，原因是鱼溶浆具有浓郁的腥香味，对南美白对虾有一定的诱食作用，适口性好，所以提高了饲料的利用率;试验组的平均产量和平均成活率无显著差异（P>0.05），但试验组比对照组提前7～9d起捕上市，说明试验

组对虾的生长速率快，提前上市降低了生产成本，且高价格增

加了生产效益。由于气温适宜并且养殖水体环境较好，两组池塘的南美白对虾未出现疫情，因此各池塘南美白对虾产量无明显差别。

3.5血清免疫指标测定两组对虾血清的免疫指标，结果见表5。试验组南美白对虾血清中碱性磷酸酶（AKP）活力、过氧化氢酶（CAT）活力与酚氧化酶（PO）活力明显高于对照组，差异显著（P<0.05）。但两组的超氧化物歧化酶（SOD）活力无明显差异（P>0.05），均在57U/ml左右。

4讨论

在实际养殖过程中，投喂添加鱼溶浆饲料的试验组对虾的生长速度明显高于对照组，提前7～9d上市，且饵料系数降低了5.3%，试验组饲料有明显促生长的优势。已有的研究表明，对虾的蛋白质代谢需要各种必需氨基酸之间有一个适当比例，饲料中蛋白质的氨基酸组成比例越接近对虾蛋白质的氨基酸组成，则越容易被吸收利用，其营养价值就越高{9]。在文中试验组的氨基酸比例均衡，且氨基酸评分较对照组高，试验组饲料中蛋白质的氨基酸组成比例也更接近虾体蛋白质的氨基酸组成，这应该是促进南美白对虾生长的重要原因之一，并且低的饲料系数也能缓解水体富营养化的程度。另外，有多篇文献报道，影响虾类的生长情况的直接因素之一是赖氨酸的含量。饲料中赖氨酸含量从1.44%增加到1.85%时，南美白对虾的增重率和特定生长率显著提高{10]，张微微等（2013）{11]在克氏原螯虾（Procambarusclarkii）的研究中也得到相似的结论。本次试验中，试验组的赖氨酸含量较对照组饲料增加15%，试验组南美白对虾生长速度加快，也又一次验证了赖氨酸含量对南美白对虾生长有着显著的影响。另外，鱼溶浆中含有丰富的小分子营养物质，这些营养物质可以直接被南美白对虾肠道吸收，例如游离氨基酸、小肽等，这也是促进其生长的因素之一。

该研究分析了南美白对虾血清中4种非特异性免疫酶（过氧化氢酶（CAT）、酚氧化酶（PO）、超氧化物歧化酶（SOD）、碱性磷酸酶（AKP））的活力，其中试验组南美白对虾血清中PO、AKP、CAT三种酶的活力明显高于对照组（P<0.05），仅SOD酶活无明显差异（P>0.05）。可能原因是试验饲料富含游离氨基酸、小肽、牛磺酸等小分子营养物质，有利于合成与免疫相关的蛋白和酶。PO、AKP、SOD、CAT等非特异性免疫酶在一定程度上反映机体免疫功能的强弱{12]，这些免疫因子的水平已被证实在甲壳动物免疫中发挥重要作用。酚氧化酶原PO是对虾重要的防御和识别系统，碱性磷酸酶AKP是动物体内重要的解毒酶类{13]，超氧化物歧化酶SOD和过氧化氢酶CAT在清除超氧自由基，防止生物分子损伤方面发挥重要的生理作用;因此推知试验组南美白对虾因其血清中AKP、CAT、PO三种酶的活力较高，能更好地应对养殖环境的变化，特别是在应激条件下可以更好的调节适应。此外鱼溶浆的添加，使饲料氨基酸组成更平衡，饲料系数降低后，可以使水體中的氨氮和亚硝酸盐氮含量下降，从而减少了氨氮和亚硝酸盐对南美白对虾免疫功能的不良影响。

该研究还发现，试验组对降低养殖水体中亚硝酸盐氮和氨氮浓度有一定的作用，其中关键因素是水体的溶解氧。当分别处在溶解氧充足、不足条件下时，亚硝酸盐氮分别在硝化菌的作用、反作用下，转化为完全不同的产物即无毒的硝酸盐和氨氮{12]。试验组平均溶解氧比对照组高0.16mg/L{14]。可能原因是鱼溶浆中丰富的小肽、氨基酸等小分子营养物质还被养殖水体中的浮游藻类和有益微生物吸收，从而有助于这些微生物的生长，浮游藻类的光合作产生大量的氧气，使水体中的溶解氧显著升高，微生物的配合使水体中的氨氮和亚硝酸盐氮下降，为南美白对虾的生长提供有利条件。

一般以新鲜水产品为原料的鱼溶浆，有着价值低廉、生产方法简便、生产耗能低、且水解过程属温和反应等优势，且原料中的各种营养成份保存比较完整，故其在饲料上的利用效果远远优于同类原料制成的鱼粉{15]，因此，鱼溶浆在饲料中的利用对于环保和增效都具有重要的推广价值。

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