腹腔镜输精技术对山羊繁殖性能的应用效果

易四凤 易维学 徐德清 张力青 李德学

摘要：选取80只母山羊，随机分为对照组和2个试验组，对照组为经产母山羊子宫颈输精；试验Ⅰ组为初产母山羊腹腔镜输精；试验Ⅱ组为经产母山羊腹腔镜输精，比较腹腔镜输精技术对山羊繁殖性能的影响。结果表明，经产母山羊腹腔镜输精后的受胎率为76.67%，子宫颈输精后的受胎率为60.00%，差异不显著；经产母山羊腹腔镜输精后的产羔率和成活率分别为2.22只/母羊、82.35%，与子宫颈输精的产羔率和成活率（分别为1.83只/母羊和75.77%）差异不显著；初产母山羊腹腔镜输精后的产羔率为1.46只/母羊，显著低于经产母山羊腹腔镜输精的产羔率（2.22只/母羊）。说明腹腔镜输精技术对经产母山羊的繁殖性能有一定的积极效果，但在山羊生产中广泛推广应用仍需加强研究。

关键词：山羊；腹腔镜输精；子宫颈输精；繁殖性能；受胎率；产羔率

中图分类号：S827.3+4 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2018）06-0090-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.06.022

Abstract： To study the influence of laparoscopic artificial insemination on reproductive performance of goat， 80 healthy ewes were randomly divided into control group and two experimental groups. In the control group， cervical insemination was used for multiparous ewe； in the experiment groupⅠ， laparoscopic artificial insemination was used in primiparous ewe； and the experiment group Ⅱ， laparoscopic artificial insemination was used in multiparous ewe. The results showed as follows， the conception rate of laparoscopic artificial insemination and cervical insemination in multiparous ewe and the control group was 76.67% and 60.00%， respectively； and the difference was not significant. The lambing rate and survival rate of laparoscopic artificial insemination in multiparous ewe was 2.22 goats/ewes and 82.35%， respectively， which showed no difference to the cervical insemination for multiparous ewe （1.83 goats/ewes and 75.77%）. The lambing rate of laparoscopic artificial insemination of primiparous ewe was dramatically decreased compared with the laparoscopic artificial insemination of multiparous ewe. The effective of laparoscopic artificial insemination was positive for the reproductive performance of multiparous ewe， but it needed further research for popularization and application in goat production.

Key words： goat； laparoscopic artificial insemination； cervical insemination； reproductive performance； conception rate； lambing rate

湖北省地处亚热带和热带，常年有丰富的饲草，羊品种已从早期的肉用、毛肉兼用品种逐渐演变为现在以山羊为主的结构。特别是自进入2000年以来，宜昌白山羊、马头山羊、麻城黑山羊陆续被列为国家保护品种，同时农村畜牧养殖各项鼓励政策的不断出台和落实，使得湖北省肉羊业得到了全面发展。但在畜牧生产实践中，特别是家畜品种改良工作中，山羊人工授精主要采用传统的子宫颈输精法，这种方法虽然简单方便，但精液消耗量大、受胎率低、复配率高、劳动强度大[1-3]。腹腔镜人工输精技术（Laparoscopic artificial insemination）主要是借助腹腔鏡技术，通过手术采用套管穿刺的方法，将精液直接输到母畜的子宫角使其受孕的技术。在澳大利亚、加拿大等畜牧业发达国家，腹腔镜输精技术在一些大型养殖场和较高水平的育种场已得到广泛推广应用[4]。国内已有苏和等[5]、乌达巴拉等[6]报道了腹腔镜输精对绵羊、梅花鹿的授精效果，而山羊方面的腹腔镜输精技术应用很少。为突破山羊人工授精技术瓶颈，客观评估该技术的实际应用效果，试验探讨了腹腔镜输精技术在山羊品种改良中的配种效果，以改进山羊人工授精受胎率低、复配率高、精液消耗量大等难题，从而为该技术在山羊生产中广泛推广应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物

选取健康状况良好的马头山羊开展腹腔镜人工输精技术试验，其中采精种公山羊若干只，另有80只经调整、同期发情的母山羊（包括初产、经产）作为配种母羊。

1.2 仪器、药品

试验用药品有阴道孕激素海绵栓、孕马血清、促超排卵素稀释液、维生素A、维生D、青霉素、碘酒等。

腹腔镜手術仪器有腹腔镜输精器械一套、腹腔镜输精装置、手术车、气腹机、显微镜一台（带恒温操作装置）、小型恒温水浴锅（带试管架）、羊用假阴道、集精杯、稀释器具一套、充气泵、鸭嘴开腔器、恒温操作台、LED灯、阴道输精针。

常用手术器械有止血钳、剪毛器、手术刀片、持针器、剃须刀片、喷壶、缝合针、缝合线、注射器以及消毒用具等。

1.3 调整同期发情

在母山羊阴道内放入孕激素海绵栓，第15天撤拴，撤拴时肌肉注射孕马血清， 促进配种母羊超数排卵，撤栓后进行试情，并在48～54 h内进行子宫颈和腹腔镜输精操作。

1.4 试验设计

将选取的80只同期发情的母山羊分为对照组和2个试验组。对照组为30只经产母山羊，输精方式为传统的子宫颈输精；处理Ⅰ组为20只初产母山羊，输精方式为腹腔镜输精；处理Ⅱ组为30只经产母山羊，输精方式为腹腔镜输精。

1.5 方法

1.5.1 精液准备 在输精前30～60 min对公山羊进行采精，并根据精液品质用已经加热灭菌过的羊奶进行稀释，精子活率为0.7。

1.5.2 母山羊输精前处理 母山羊配种前需空腹12 h，此期间可将手术器械进行消毒备用。

1.5.3 子宫颈输精 撤栓后48～54 h内，对30只同期发情的经产母山羊进行子宫颈输精，每次输精量为0.3 mL，5 h后复配。

1.5.4 腹腔镜输精 在撤拴后48～54 h内，对20只同期发情的初产母山羊和30只经产母山羊分别进行腹腔镜输精操作。具体是将配种母山羊呈仰卧斜倒立45°固定在专用手术车上，用带套管的锥头穿透腹壁进入腹腔，拔出锥头，并分别放入内窥镜和拨棒，开启电源，用拨棒进到子宫角，将装好精液的输精枪对准子宫角方向扎入腹腔，在一侧子宫角2～3 cm处输入1/2（0.15 mL）精液，然后拔出针头，用同样的方法，将剩余的精液输入另一侧子宫角内，缓慢抽出输精管、内窥镜及套管等，再用碘酒对伤口消毒，从而完成整个输精过程。

1.6 试验管理

在试验期内，所有参试羊只管理水平完全一致，实行半舍饲饲养，自由采食和饮水，并由专人饲喂。输精45 d后，用兽用B超妊娠诊断仪检测母山羊的受胎情况。2017年4-10月，跟踪记录试验羊群产羔及羔羊成活情况，同时记录圈舍温度、湿度，观察试验羊只的健康状况。

1.7 数据处理

试验所得数据采用Microsoft Office Excel 2007程序处理，并制表；运用SAS 9.2统计软件进行单因素方差分析（ANOVA）和邓肯氏多重比较（Duncan′s multiple range test）检验。

2 结果与分析

2.1 腹腔镜输精对山羊受胎率的影响

腹腔镜输精技术对山羊受胎率的影响情况见表1。由表1可知，初产母山羊和经产母山羊腹腔镜输精后，受胎率分别为65.00%、76.67%，比经产母山羊子宫颈输精的受胎率分别提高了8.33%、27.78%；经产母山羊腹腔镜输精的受胎率又比初产母山羊腹腔镜输精提高了17.95%，说明采用腹腔镜输精技术可以提高受胎率，且经产母山羊又比初产母山羊效果好；但统计分析结果表明，腹腔镜输精技术与子宫颈输精之间、初产母山羊和经产母山羊之间的受胎率没有显著差异（P>0.05）。

2.2 腹腔镜输精对山羊多羔率的影响

腹腔镜输精技术对山羊多羔率的影响情况见表2。由表2可见，经产母山羊腹腔镜输精后，多羔率最高，为82.60%，比经产母山羊子宫颈输精的多羔率（72.22%）提高了14.37%，不过差异不显著（P>0.05）；比初产母山羊腹腔镜输精的多羔率（46.15%）提高了78.98%，差异显著（P<0.05）。表明腹腔镜输精对经产母山羊多羔率效果最好，而对初产母山羊没有效果。

2.3 腹腔镜输精对山羊产羔的影响

腹腔镜输精技术对山羊产羔的影响情况见表3。由表3可见，经产母山羊腹腔镜输精的产羔率为2.22只/母羊，比子宫颈输精的产羔率（1.83只/母羊）提高了21.31%，不过差异不显著（P>0.05）；比初产母山羊腹腔镜输精的产羔率（1.46只/母羊）提高了52.05%，差异显著（P<0.05）。而初产母山羊腹腔镜输精的产羔率反而比子宫颈输精的产羔率降低了20.22%。由此可知，经产母山羊采用腹腔镜输精技术能提高产羔率，而初产母山羊采用腹腔镜输精后，反而降低了产羔率。

3 讨论

3.1 腹腔镜输精技术对山羊受胎率的影响

乌达巴拉等[6]报道，绵羊用腹腔镜输精的受胎率为92.70%，显著高于子宫颈输精的76.78%；而毛凤显等[7]同样研究了2种输精方式在贵州白山羊中的配种效果，结果腹腔镜输精技术的受胎率虽有提高，但差异不显著。在本试验中，马头山羊腹腔镜输精经产母山羊受胎率为76.67%，初产母山羊受胎率只有65.00%，与子宫颈输精受胎率的60.00%相比，受胎率虽有提高，但未达到显著差异；个中原因，一方面可能是因为采用腹腔镜输精的母山羊需禁食12 h和腹部开刀手术；另一方面，由于养殖场管理不善，导致部分母山羊配种后手术伤口恢复不佳；这两方面造成的应激反应均会对母山羊的受孕造成不良影响。由此表明，腹腔镜输精技术在一定程度上提高了山羊的受胎率，但效果不明显。

3.2 腹腔镜输精技术对山羊产羔率的影响

刘玉峰[8]认为，腹腔镜输精技术显著提高了输精绵羊的受胎率和母羊双羔率。本试验中，经产母山羊腹腔镜输精处理的多羔率和成活率均高于子宫颈输精和初产母山羊腹腔镜输精处理，且多羔率也是最高，但初产母山羊腹腔镜输精的产羔率、多羔率又显著低于经产母山羊腹腔镜输精处理，由此说明，腹腔镜输精技术并不适宜于初产母山羊，而在经产母山羊上有一定的应用成效。

3.3 山羊腹腔镜输精技术推广的可行性

从受胎率来看，腹腔镜输精技术应用在鹿、绵羊上均获得了较高的受胎率，特别是绵羊受胎率可高达90%以上，贾海明[9]的研究表明，梅花鹿的腹腔镜输精受胎率达到86.67%，极显著高于子宫颈输精的36.84%；乌达巴拉等[6]认为，绵羊腹腔镜输精的受胎率显著提高，可达90%以上。而本试验中，山羊腹腔镜输精经产母山羊受胎率为76.67%，初产母山羊受胎率为65.00%，这可能与山羊天性刚烈、生性好动有关，其受胎率普遍偏低于其他动物，具体原因还有待今后更深入的研究来查证。

从羔羊成活率来看，经产母山羊采用腹腔镜输精的产羔率、成活率和多羔率高于子宫颈输精，但效果不明显，而初产母山羊采用腹腔镜输精的产羔率、多羔率又显著低于经产母山羊。所以，该技术在经产母山羊上应用效果较好，但在初产母山羊上效果不理想。

从输精量来看，贾海明[9]报道了梅花鹿腹腔镜输精的效率明显高于子宫颈输精，发现腹腔镜输精的有效精子数在1 000万/只时受胎率可达90%，显著少于子宫颈输精的有效精子数（1 200万/只）。本试验中腹腔镜精液输精量只有子宫颈输精量的一半，且受胎率高于子宫颈输精。由此说明，经产母山羊腹腔镜输精能减少精液量，提高优质山羊的利用率，降低种公羊的饲养数量，节约养殖成本。

试验结果表明，腹腔镜输精技术在山羊繁殖性能中的应用效果还有待进一步探讨与确认；如刘玉峰[10]曾报道腹腔镜输精技术可以提高超数排卵供体绵羊母羊的胚胎受精率，因此，可考慮在科研单位和部分育种场中，将腹腔镜输精技术与胚胎移植技术结合应用于山羊品种改良及新品种的培育中。

总的来看，采用腹腔镜输精技术在一定程度上可以提高经产母山羊的受胎率、产羔率、成活率和产多羔率，但效果并不显著。所以，该技术对山羊繁殖性能的应用效果还有待深入探讨；初产母山羊采用腹腔镜输精技术降低了产羔率和多羔率，说明该技术更适宜用于经产母山羊；可考虑先将腹腔镜输精技术与胚胎移植技术结合应用于山羊品种改良及新品种的培育，待该技术在山羊繁殖性能中的应用效果得到进一步验证后，便可建议在山羊生产中广泛推广应用。

参考文献：

[1] 张建涛，王洪斌，范洪刚，等.腹腔镜技术在羊中的应用[J].黑龙江畜牧兽医，2007（5）：73-74.

[2] 李建军，王洪斌，熊慧军，等.动物腹腔镜技术的应用研究进展[J].动物医学进展，2006（7）：51-54.

[3] 石国庆，曾培坚，杨永林，等.绵羊腹腔内窥镜子宫角深部冷冻精液输精试验[J].新疆农业科学，2001（S）：72-73.

[4] MOSES D，MARTINEZ A G，LORIO G et al. A large-scale program in laparoscopic intrauterine insemination with frozen-thawed semen in Australian Merino sheep in Argentine Patagonia[J].Theriogenology，1997，48（4）：651-657.

[5] 苏 和，达 来，邵 凯，等.腹腔镜输精对绵羊超数排卵受精率的影响[J].畜牧与饲料科学（奶牛版），2006（5）：42-43.

[6] 乌达巴拉，达 来，邵 凯，等.羊子宫颈输精和腹腔镜输精技术对受胎率的影响[J].中国草食动物科学，2012（S）：280-281.

[7] 毛凤显，陈浩林，廖 梅，等.腹腔镜输精在贵州白山羊胚胎移植中的受精效果研究[J].黑龙江畜牧兽医，2014（20）：26-27.

[8] 刘玉峰.子宫内输精技术在绵羊生产中的应用研究[J].黑龙江农业科学，2007（5）：77-79.

[9] 贾海明.梅花鹿腹腔镜子宫角输精技术研究[D].哈尔滨：东北农业大学，2009.

[10] 刘玉峰.绵羊子宫内输精技术的研究[D].哈尔滨：东北农业大学，2003.