桉树叶活性成分提取方法及生物活性研究进展

李萃邦 徐胜臻 徐文兴 曹敏惠

摘要：对桉树叶活性成分提取方法及其抑菌、抗虫、除草和药用活性等进行了综述，为桉树研究开发提供依据和方向。

关键词：桉树；活性成分；提取方法；生物活性

中图分类号：Q-0 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2018）06-0012-05

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.06.002

Abstract： The extraction methods， the fungi and bacteria inhibition， insect resistance， herbicidal and pharmaceutical activities of active ingredients from eucalyptus leaves were reviewed， to provide a basis and direction for the further research and development of eucalyptus.

Key words： eucalyptus； active ingredients； method of extraction； biological activity

桉树（Eucalypt）是桃金娘科（Mytaceae）植物，含有桉树属（Eucalyptus）、杯果木属（Angophora）和伞房属（Corymbra）。它是地球现有最高的被子植物之一，种类繁多，已知种类有945种；种植区域宽广，世界50多个国家都有种植[1，2]。

桉树经济价值极高，是一种具有观赏、用材、药用作用的优良树种，人们将人工种植的桉树用于家具制作、建筑工程、纸浆原料等方面。桉树树干可以作为矿桥、建筑、浆粕[3]、人造板等用料；桉树皮可用于锅炉除垢和缓凝剂以及绿色新能源[4]；桉树叶可生产精油、柠檬醛和桉叶醇等。除此之外，桉树皮和叶可用作医药材料治疗腹泻、发烧、牙痛等疾病[5]。

本研究综述了桉树叶活性物质的提取方法及其生物活性，以期充分利用桉树的活性成分，开发更多的产品，实现桉树的最大利用价值。

1 桉树叶提取方法研究进展

1.1 溶剂提取法

溶剂提取法是最传统的也是目前国内使用最广泛的植物内活性物质的提取方法之一。溶剂提取法可以直接采用温水、纯有机溶剂或有机溶剂-水混合液[6]提取，常用的溶剂有水、乙醇、石油醚等[7]。

王明祖等[8]通过模拟自然条件，将新鲜桉树叶洗净剪碎，与去离子水1∶5配比在人工气候箱内28 ℃恒温浸泡7 d，并且每4 h搅拌一次，过滤得到桉树叶水浸提液。姜萍等[9]通过正交试验提取了尾叶桉中的原花色素，发现在60%乙醇、80 ℃、100 min、料液比1∶14（g∶mL，下同）产率最高。周洲等[10]采用加热回流的方式以乙醇为溶剂在80～90 ℃油浴2 h处理桉树叶得到单宁类物质。

溶剂提取法操作方法简单，但需根据不同的活性成分控制提取温度，以保证提取物成分保持原有成分。

1.2 超声波提取法

超声波提取法是利用超声波在溶剂中破碎植物细胞壁后，细胞内的活性成分游离到溶剂中，并且融入了活性物质的溶剂在超声波下分子运动加速，使两者更快地混匀。

赵宇宁等[11]用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和无水乙醇等4种不同极性的溶剂对不同时期的大叶桉进行超声提取，4种溶剂提取物的平均产率分别为4.4%、2.1%、2.3%和2.3%，石油醚提取物5月份的产率高达5.4%。王俊亮等[12]将桉树叶粉末于70%乙醇以1∶20的比例超声30 min提取2次，得到桉树叶粗提物后，再利用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等不同溶剂萃取得到多酚类物质。

超声提取法方法快速高效，萃取温度低，不会破坏桉树叶中热敏的、易水解或氧化特性的活性成分。

1.3 微波提取法

微波提取法是利用不同物质的化学结构不同，其吸收微波的能力有差异，在微波加热时针对性地选择某些活性成分，这些组分受热与本体分离进入到萃取剂中去[13]。

韦学丰等[14]采用正交试验，研究了乙醇浓度、固液比、微波时间、微波功率对桉树叶黄酮提取率的影响。结果表明，提取工艺的最佳参数为乙醇浓度200 mL/L，固液比1∶25，时间5 min，功率245 W，最高提取率为34 g/L。岳芯吟等[15]通过传统水提微波辅助的方法在480 W、液固比45∶1、提取时间为7 min时，提取巨尾桉中多糖物质，多糖含量为9.17%。

微波提取法提取桉树叶中的化合物，提取率高、省时、高效、工艺简单[16]。但是，由于这个过程中提取体系升温速度快，而提取溶剂沸点不高、易挥发，容易引起暴沸现象，提取物对热不稳定的有效成分容易分解和氧化。

1.4 超临界流体萃取（SFE）技术

超临界流体萃取技术[17]是当今世界最先进的物理萃取技术。超临界流体具有气体和液体的共有性质，具有良好的溶解性，可用于进行萃取、分离单体的溶剂，超临界流体萃取技术也不断应用到桉树叶内活性成分的提取方面[18]。

Dogenski等[19]利用SFE技術与水蒸气蒸馏和水蒸馏方法得到桉树叶精油成分，对比发现，SFE方法得到了质量更高、含量更多的香茅醛成分。Francisco等[20]通过此方法分离得到单萜烃类、含氧单萜类、二萜、倍半萜、表皮蜡、脂肪酸等，同时发现在80 pa、60 ℃下分离得到的1，8-桉叶素比水蒸气蒸馏得到的质量更好。

超临界萃取的条件比较温和，特别适合桉树叶中活性成分的提取和纯化，但是耗资相对较大。

2 桉树叶提取物的化学成分研究进展

桉树叶内化学成分种类繁多，并且一种桉树叶中所含有的成分可能有几十种甚至数百种，其中以几种成分为主，主要有桉叶油、黄酮类、有机酸类、鞣质、酚类、多糖以及蛋白质等具有较高生理活性的有效成分。

2.1 桉叶油

桉叶油的基本组成有芳香族、脂肪族和萜类化合物，其中萜类成分又分为单萜、倍半萜以及相应的含氧衍生物，研究中发现这些含氧衍生物大多具有芳香气味和较强的生理活性。不同种类的桉树叶所含的化学物质成分以及含量都有所差异。Li等[21]对澳大利亚塔斯马尼亚岛上的20多种桉树叶挥发油成分进行了分析，经分析鉴定后发现其主要化学成分为1，8-桉叶油素、茨烯、α-蒎烯、β-蒎烯、对伞花烃等。宋爱华等[22]采用水蒸气蒸馏法得到了云南蓝桉叶挥发油，通过GC-MS分析其主要成分是1，8-桉叶素、α-蒎烯、α-松油醇醋酸酯、蓝桉醇、α-松油醇和别香橙烯。陈虹霞等[23]对4种非洲产桉树叶的挥发性成分进行了研究，发现尾叶桉、尾细桉挥发油的主要化学成分是1，8-桉叶素、乙酸松油酯、α-古芸烯、香木兰烯、别香橙烯、喇叭烯、蓝桉醇和喇叭茶醇等，而巨桉、尾巨桉挥发油的主要成分是对伞花烃、1，8-桉叶素、异丙基环己烯酮、枯茗醛、水芹醛、匙叶桉油烯醇、桉叶醇和亚油酸等。近些年，黄瑶等[24]分析了广西尾叶桉精油的化学成分， 主要为1，8-桉叶素、乙酸松油酯、α-蒎烯、松油醇、蓝桉醇和喇叭茶醇等。陈婷婷等[25]分析了广东托里桉叶精油的化学成分，其主要成分为α-松油醇、长叶烯、愈创木醇、α-蒎烯等。

2.2 其他化學成分

2.2.1 黄酮类 1995年，Conde等[26]在桉树叶中用HPLC检测出黄酮类化合物等。Hou等[27]研究桉树叶的化学成分指出，桉树叶中含有黄酮类化合物， 包括黄酮醇和二氢黄酮等类型， 如桉树素、槲皮素、槲皮甙、芸香甙和L（+）-高丝氨酸等。梁振益等[6]从桉叶中提取出质量含量为3.41%的总黄酮。

2.2.2 有机酸类 马自超等[28]从窿缘桉树叶中分离并鉴定了棕搁酸、（+）-儿茶素和杨梅酮葡萄糖贰化合物。孙汉洲等[29]在研究赤桉树叶时，确定了其含有棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸和亚麻酸等。

2.2.3 鞣质及酚类 马自超等[28]对窿缘桉树叶中分离并鉴定了榈酸、儿茶素、杨梅酮葡萄糖甙化合物及以乙酰衍生物形式分离出二种黄烷-3-醇的二聚体B1和B3，并确定缩合类单宁部分是原花青定。Hou等[27]对桉树叶进行研究，从中分离出没食子单宁酸、单宁酸、没食子酸及儿茶酚等。

2.2.4 氨基酸和蛋白质类 包承玉等[30]通过试验测定了中国25个品种桉树叶的营养成分、氨基酸含量和微量元素等，研究发现，各桉树叶均含9%粗蛋白质。

3 桉树叶活性成分的生物活性研究进展

随着化学农药的大量使用，各种环境问题愈发明显。人们越来越注重环境友好型农药的开发，植物源农药由于其残留低、易代谢等原因引发了人们广泛的研究。研究过程中发现，桉树叶内有大量的生物活性成分，目前经鉴定主要有桉叶油、黄酮类、有机酸类、鞣质类、酚类、氨基酸和蛋白质类化合物。这些成分在抗菌[31]、杀虫、抗炎、植物调节等方面都有着良好的作用。

3.1 抗菌作用

桉树叶中含有抑制微生物生长的物质[32]。有试验表明，桉树叶对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡状芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、链球菌等有较强的抑制作用，其中对枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度（MIC）是1/160 g/mL[33]。Cimanga等[34]发现刚果境内15种桉树叶的精油成分对细菌都有不同程度的抑制作用，其中赤叶桉和细叶桉精油的抑制效果最佳。同时对精油成分进行了鉴定，发现大部分精油都含有1，8-桉叶素，α和β-蒎烯，α-松油醇，ρ-伞花烃，γ-松油烯，月桂烯和柠檬烯。为了提高植物源农药的生物活性，Ravindra等[35]利用柠檬桉提取研磨后负载在银纳米棉纤维AGNPs上，发现其对革兰氏阴性菌有优异的抗菌活性，可以用于医疗方面预防细菌感染等。除此之外，Sun等[36]发现桉叶精油成分对引起植物灰霉病、枯萎病、腐霉病、纹枯病等真菌病原菌有一定的抑制作用，而对引起炭疽病的病原菌却无明显的抑制作用。

吕东元等[37]以乙醇和水为提取剂，提取桉树叶中的活性物质，发现其对7种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌有抑制作用，同时对桉树提取物是否加入苯唑西林的抑菌效果对比后发现，加入了苯唑西林的抑菌效果要好一些，反映了桉树提取物和苯唑西林对试验所用7种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌作用中起协同作用[38]。蓝桉叶提取物中的香橙烯和1，8-桉叶素成分对革兰氏阴性菌有不同的抑制作用[38]，并且通过其对金黄色葡萄球菌的抑制结果，发现香橙烯起主要抑制作用，并与1，8-桉叶素等起协同作用[39，40]。

桉树叶提取物优异的抑菌活性物质可以应用到农业生产方面。例如Sushil等[41]经测试发现柠檬桉精油在浓度较低时就可以有良好的抑制作用。如禾谷镰刀菌、黄色镰刀菌、青霉菌等真菌的生长，利用精油喷雾到水果上，在40 μL/mL时就可以完全控制腐烂问题，这种方法在延长水果保质期的同时，对人类无不良影响。

3.2 杀虫作用

桉树是一类含有较多活性物质且广泛种植的速生植物，各种桉树叶的提取物都不同程度地抑制寄生虫的生长，桉树叶内提取物活性物质对鞭毛虫、孢子虫、纤毛虫等体表、体内寄生原虫有趋避[42]和灭杀[43]作用。

Nerio等[44]发现微波辅助水蒸气蒸馏技术获得的柠檬桉等植物精油成分对玉米象有一定的驱避作用，柠檬桉精油提取物在0.063～0.503 μL/cm2对玉米象有驱避作用。同时利用GC-MS联用技术对精油成分进行了鉴定，发现大部分为氧化单萜和酚类化合物。蚊子是疾病和害虫滋扰的重要载体，人们逐渐意识到传统驱蚊剂的副作用，发现桉树精油可以作为代替商品DEET（N，N-二乙基-间-甲基苯甲酰）驱蚊剂，降低了其毒副作用，其驱蚊作用的化学成分主要是柠檬烯和樟脑[45]。

Maciel等[46]以去离子水和3%吐温80做阴性对照，0.196 mg/mL氯氰菊酯为阳性对照，发现柠檬桉、蓝桉、Staigeriana等精油成分z-柠檬醛和α-柠檬醛、香茅醛、1，8-桉叶素等对长须罗蛉卵、幼虫、成虫有杀虫效果，最佳的是Staigeriana桉树提取物，柠檬桉、蓝桉次之。在巴西，桉树叶中具有杀虫活性成分的化学物质已经投入到商品化生产。

3.3 除草作用

由于传统农药的大量使用，靶标生物农药残留、杂草抗性以及再猖獗问题日益突出。随着环境友好型农药的研究，人们对桉树叶活性成分作为除草剂开展了广泛的研究。Batish等[47]选用小麦、玉米、萝卜、槐西花蓟马、绿苋和稗草为靶标作物，不同浓度的柠檬桉桉叶中挥发性油类物质对种子的萌发率有良好的抑制作用，其中对绿苋的效果最佳，萝卜的效果最差。

王静等[48]就大叶桉、蓝桉、直杆蓝桉3种桉树叶提取物采用种子萌发法测定其对高粱、小麦、油菜、黄瓜幼苗根长和茎长的影响。结果发现，3种桉树叶提取物对高粱、小麦、黄瓜、油菜幼苗根长和茎长均有较强的抑制作用，3种桉树叶提取物均具有较强的除草活性，其中，大叶桉叶提取物除草活性最强，蓝桉次之，直杆蓝桉最弱。

3.4 植物生长调节剂

桉叶中黄酮化合物大多含有槲皮素、杨梅素和山奈酚。在国内，有研究采用单罐提取桉叶中提取黄酮类物质的工艺，黄酮产品得率达到30%，后来通过改装工艺采用三罐组或者五罐组逆流提取产品得率可达35%。试验研究发现，通过这种工艺得到的黄酮类物质能够调节蔬菜和果树的生长。该黄酮类物质对于黄瓜有促进开花、增加产量的作用，同时可以减少黄瓜畸形；对增加葡萄穗重以及甜度都有良好的促进作用；同时对蕉柑的座果率有一定的提升作用；除此之外，还对油菜结角数、粒数、千粒重的提升有明显作用，进而使油菜增产[49]。

桉叶黄酮类物质对人畜安全，在农作物无毒副作用，在农业生产中有良好的应用前景。EF植物生长促进剂是是中国林业科学研究院林产化学工业研究所与广东省雷州林业局共同在桉树叶中提取的一种天然植物生长促进剂，有促进植物生长，使农作物增产的作用。EF能够促进种苗茁壮生长，延长叶片活力、抑病增产；除此之外EF还能增强植物呼吸强度，增加植物糖分和叶绿素以及抗血酸酶和多酚氧化酶的含量；还有EF喷过的植物在一定的程度抗高温[50，51]。

3.5 药理活性

在世界各个种植桉树的国家，桉叶都是民间常用的医药材料。柠檬桉中精油成分除了可以抑制真菌生长以及有一定的抗癌、抗氧化的作用[52，53]外，还可以用于治疗肌肉痉挛，加入到洗澡水中浸泡关节可以减轻疼痛感[54]。同时桉树内黄酮类物质是治疗心血管病症的辅助药品，同时可以治疗急性肾炎、腹泻、烧伤等疾病[55]。

Hasegawa等[56]在蓝桉叶的热水水提物中发现化合物A（cypellocarpin A）、优球蛋白、化合物B（cuniloside）和（1S，2S，4R）-反式-2-羟基-1，8-桉树脑β-D-吡喃葡糖苷4种已知的化合物以及与没食子酸结合的两种单萜苷化合物C（globulusin A）和化合物D（globulusin B）。其中化合物C显示出比其他化合物具有更加优异的抗氧化活性，化合物C和优球蛋白在一定程度上抑制了人骨髓瘤THP-1细胞的炎性细胞、α-肿瘤坏死因子以及白介素的产生。同时这些化合物也可以抑制体外培养的小鼠黑色素瘤B16F1细胞内黑色素的生成，有消炎以及抗黑色素生成活性的作用[57]。

在中药方面，桉叶煎剂对体内常见的蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌以及副溶血性弧菌等四种常见致病菌有不同的抑制效果，其中对多杀性巴氏杆菌抑菌效果最佳，优于双黄连效果。除此之外，细叶桉与蓝桉的精油提取物对中枢神经以及外周有镇痛作用，并且具有獨立抗炎活性[58]。

3.6 其他作用

桉树叶中桉叶油、黄酮类、有机酸类、酚类、萜类和蛋白质等有效成分，在食品方面可以用作食品添加剂、防腐剂[59，60]等，同时在畜牧业还可以作为饲料和饲料添加剂；在化工行业，桉叶提取物可以用于浸提栲胶以及助燃剂等方面；在美容行业，桉叶提取物可以作为香料添加到美容剂中；在环境保护方面，桉树提取物可以用来去除废水污泥中的Cr、Pb、Cd等重金属离子[61]。总的来说，桉树叶活性成分在食品、化工、畜牧养殖、医药等方面都有着不同的用途[62]。

4 小结与展望

桉树作为世界上木材主要来源，每年都有大量的枝叶等采伐剩余物未能得到充分利用。近些年，人们对桉树叶内成分一直不断的研究，桉树活性物质的提取方法多种多样，除了传统的提取方法外，一些新技术新方法也应运而生。这些新方法可以缩短桉树叶内活性物质的提取时间，操作简单。在提取桉树叶活性成分时，为了达到最佳效果要充分根据提取成分的性质结构调整提取方法。

桉树叶内活性物质在抑菌、除草、抗虫等方面都有着明显的作用。桉树被引入中国100多年，但由于中国与其原产地气候、土壤等因素的差异，桉树在形态结构、化学成分等方面也会有了较大的变化。因此，中国国内种植的各种桉叶化学成分以及理化性质的研究数据都需完善，桉树叶内化学物质的抑菌、杀虫等方面机理也有待进一步探索，进而为将来桉树种植以及提高经济效益提供理论依据，为桉树叶内活性成分的充分利用提供方向。

参考文献：

[1] 林 政.我国桉树专题文献研究[J].农业图书情报学刊，2006（1）：152-154.

[2] 何耀松，张继东.桉树化学成分及药理作用研究进展[J].动物医学进展，2007（7）：98-101.

[3] IBARRA D，R？魱O J C D，GUTI？魪RREZ A，et al. Isolation of high-purity residual lignins from eucalypt paper pulps by cellulase and proteinase treatments followed by solvent extraction[J].Enzyme Microb Tech，2004，35（3）：173-181.

[4] CASTRO C A D O，RESENDE R T，BHERING L L，et al. Brief history of eucalyptus breeding in brazil under perspective of bio-metric advances[J].Cienc Rural，2016，46（9）：1585-1593.

[5] 曹 庸，陈运娇，李 俊，等.桉树次生代谢物质研究进展[J].桉树科技，2016，33（11）：43-48.

[6] 梁振益，杨雪蕊，李海峰，等.桉树叶中黄酮类化合物的提取工艺研究[J].海南大学学报（自然科学版），2007，25（3）：256-258.

[7] 王筱雄，姚祖春，黄照成，等.提取赤桉树叶中黄酮类化合物的最佳工艺参数[J].轻工标准与质量，2016（3）：55-57.

[8] 王明祖，陈 冀，韩瑞宏.桉树叶水浸提液对两种植物种子萌发特性的影响[J].种子，2012，31（7）：32-34.

[9] 姜 萍，刘 鑫，萧 伟，等.巨尾桉叶中原花色素提取工艺比较及不同溶剂萃取物生物活性的研究[J].生物质化学工程，2015， 49（4）：19-24.

[10] 周 洲，龙凤香，邓黎娟，等.巨尾桉叶、皮、芯中单宁提取及其抗氧化性研究[J].食品工业科技，2015，36（16）：129-132.

[11] 赵宇宁，张皓冰.桉树提取物及其化学成分的抗原虫作用[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2016，34（2）：171-178.

[12] 王俊亮，肖苏尧，陈运娇，等.广林9号桉叶多酚抗氧化活性研究[J].食品科学，2012，33（1）：20-24.

[13] XIONG G，GOODRIDGE C；WANG L，et al.Microwave assisted headspace solid-phase microextraction for the analysis of bioemissisions from eucalyptus citriodora leaves[J].J Agric Food Chem，2003，51（27）：7841-7847.

[14] 韦学丰，邓年方.微波法提取桉树叶中黄酮类化合物的工艺研究[J].安徽农学通报，2008（14）：141-142，159.

[15] 岳芯吟，刘雄民，马 丽，等.微波辅助提取巨尾桉叶多糖及其抗氧化性研究[J].应用化工，2015，44（1）：15-19.

[16] LIU Z，CHEN Z，HAN F，et al. Microwave-assistanted method for simultaneous hydrolysis and extraction in obtaining ellagic acid，gallic acid and essential oil from eucalyptus globulus leaves using bronsted acidic ionic liquid[HO3S（CH2）4 min]HSO4[J].Industrial Crops & Products，2016，81（3）：152-161.

[17] 赵 丹，尹 洁.超临界流体萃取技术及其应用简介[J].安徽农业科学，2014，42（15）：4772-4780.

[18] RUI M A D，DE MELO M M R D，NETO C P，et al.Measurement and modeling of supercritical fluid extraction curves of Eucalyptus globulus bark：Influence of the operating conditions upon yields and extract composition[J].Journal of Supercritical Fluids，2012，72（12）：176-185.

[19] DOGENSKI M，FERREIRA N J，OLIVEIRA.Extraction of Corymbia citriodora essential oil and resin using near and supercritical ccarbon dioxide[J].Journal of Supercritical Fluids，2016， 115（9）：54-64.

[20] FRANCISCO J D，SIVIK B. Solubility of three monoterpenes their mixtures and encalyptus leaf oils in dense caebon dioxide[J].Journal of Supercritical Fluids，2002，23（1）：11-19.

[21] LI H，MADDEN J L，POTTS B M. Variation in volatile leaf oils of the Tasmanian Eucalyptus Species II. Subgenus Symphyomyrtus[J].Biochemical Systematics and Ecology，1996， 24（5）：547-569.

[22] 宋愛华，王 颖，刘艳梅.蓝桉叶挥发油化学成分的气相色谱-质谱分析研究[J].食品与药品，2009，11（1）：31-32.

[23] 陈虹霞，王成章.4种非洲桉树叶挥发油的化学成分研究[J].生物质化学工程，2010，44（6）：23-27.

[24] 黄 瑶，田玉红，刘雄民，等.尾叶桉叶精油的成分分析及抑菌效果初探[J].北方园艺，2010（6）：26-28.

[25] 陈婷婷，周晓农，朱 丹，等.托里桉叶挥发油化学成分的气相色谱-质谱联用分析[J].今日药学，2011，21（10）：620-623.

[26] CONDE E，CADAHIA E，GARCIA-VALLEJO M C. HPLC analysis of flavonoids and phenolic acids and aldehydes in Eucalyptus spp[J].Chromatographia，1995，41（11-12）：657-660.

[27] HOU A J，LIU Y Z，YANG H，et a1. Hydrolyzable tannins and related polyohenolsfrom Eucalyptus globulus[J].Journal of Asian Natural Products Research，2000（3）：205-212.

[28] 马自超，劳伦斯·波特.桉树叶单宁组分的研究[J].植物学报（英文版），1988（5）：534-538.

[29] 孙汉洲，黄丽群，李志辉.赤桉树叶脂肪酸的定量分析[J].中南林学院学报，2005（6）：103-105，127.

[30] 包承玉，谢云敏.桉树叶的营养成分及其评价[J].林产化学与工业，1989（4）：49-54.

[31] HAMOUD R，SPORER F，REICHLING J，et al. Antimicrobial activity of a traditionally used complex essential oil distillate in comparision to its individual essential oil ingredients[J].Phytomedicine，2012，19（11）：969-976.

[32] FRANCISCO J D，SIVIK B. Solubility of three monoterpenes their mixtures and eucalyptus leaf oils in dense carbon dioxide[J].Journal of Supercritical Fluids，2002，23（9）：11-19.

[33] 罗锦红.溪黄草与桉树叶的体外抑菌试验[J].广西畜牧兽医，2016，32（2）：62-63，86.

[34] CIMANGA K，KAMBU K，TONA L，et al. Correlation between chemical composition and antibacterial activity of essential oils of some aromatic medicinal plants growing in the democratic republic of congo[J].J Ethnopharmacol，2002，79（2）：213-220.

[35] RAVINDRA S，MOHAN M Y，REDDY N N，et al. Fabrication of antibacterial cotton fibres loaded with silver nanoparticles via “Green Approach”[J].Colloid Surface A，2010，367（1-3）：31-40.

[36] SUN O L，CHOI G J，JANG K S，et al. Antifungal activity of five plant essential oils as fumigant against postharvest and soilbome plant pathogenic fungi[J].Plant Pathology Journal，2007，23（2）：97-102.

[37] 呂东元，周玉成，张晶晶，等.大叶桉不同溶剂提取物的抑菌活性研究[J].中国民族民间医药，2009，18（16）：1-2.

[38] SOLIMANF M，FATHY M M，SALAMA M M，et al. Chemical composition and bioactivity of the volatile oil from leaves and stems of eucalyptus cinerea[J].Pharmaceutical Biology，2014， 52（10）：1272-1277.

[39] 崔海英，张雪婧，周慧婷，等.桉树提取物与苯唑西林对MRSA的抗菌作用[J].食品与机械，2015，31（1）：123-126.

[40] MULYANINGSIH S，SPORER，F，ZIMMERMANN S，et al. Synergistic properties of the terpenoids aromadendrene and 1，8-cineole from the essential oil of Eucalyptus globulus against antibiotic-susceptible and antibiotic-resistant pathogens[J].Phytomedicine，2010，17（13）：1061-1066.

[41] SUSHIL K S，MAMTA P S.Assessment of broad spectrum control potential of eucalyptus citrodora oil against post-harvest spoilage of Malus Pumilo L[J].J Stored Prod Res，2011，2（8）：170-175.

[42] VENTER G J，LBUSCHANGE K，BIOKANYO S N，et al. Assentment of the repelkent effect of citronella and lemon eucalyptus oil against south african culicoides species[J].J S Afr Vet Assoc，2014，85（1）：992.

[43] ALZOGARAY R A，LUCIA A，ZERBA E N.Insecticidal activity of essential oils from eleven eucalyptus spp. and two hybrids：lethal and sublethal effects of their major components on blattella germanila[J].Journal of Economic Entomology，2011，104（2）：595-600.

[44] NERIO L S，OLIVEROVERBEL J，STASHENKOE E，et al. Repellent activity of essential oils from seven aromatic plants grown on colombia against sitophilus zeamais motschulsky（coleoptera）[J].Journal of Stored Products Research，2009， 45（3）：212-214.

[45] GILLIJ Y G，GLEISER R M，ZYGADLO J A. Mosquito repellent activity of essential oils of aromatic plants growing in argentina[J].Bioresource Technology，2008，99（7）：2507-2515.

[46] MACIEL M V，MORAISS M，BEVILAQUA C M L，et al. Chemical composition of eucalyptus spp. essential oils and their insecticidal effects on luztomyia longipalpis[J].Veterinaary Parasitology，2010，167（1）：1-7.

[47] BATISH D R，SETIA N，SINGH H P，et al. Phytotoxicity of lemon-scented eucalypt oil and its potential use as a bioherbicide[J].Crop Prot，2004，23（12）：1209-1214.

[48] 王 静，王 磊，李永青，等.3种桉树叶提取物除草活性研究[J].中国农学通报，2013，29（6）：191-194.

[49] 宋永芳，王碧兰，郁 青，等.桉树叶中黄酮类的提取及其在农业上的应用[J].林产化学与工业，1984（2）：19-28.

[50] 范 泓，范国泰，宋昌瑶，等.EF植物生长促进剂在白菜类蔬菜上的试验应用及增产耐病效果探讨[J].桉树科技，1987（1）：1-22.

[51] 范 泓，沈兆邦，虞启庄.EF植物生长促进剂有效组份研究[J].林产化学与工业，1990（3）：155-161.

[52] SABA I，IQBAL M J，IQBAL M.Bioactivity of eucalyptus citriodora leaves essential oil[J].Agrochimica，2013，57（2）：125-134.

[53] LEE Y S，KIM J，SHIN S C，et al. Antifungal activity of Myrtaceae essential oils and their components against three phytopathogenic fungi[J].Flavour & Fragrance Journal，2008，23（1）：23-28.

[54] FIOVINI-PUYBARET C.Antidepressant effect of Eucalyptus globulus leaf extracts neurochemical and pharmacological evaluations，identification of the active ingredients[J].Planta Medica，2008，74（9）：1026-1026.

[55] QUAN V V，HIRUN S，CHUEN T L K，et al. Physicochemical，antioxidant and anti-cancer activity of a Eucalyptus robusta（Sm.） leaf aqueous extract[J].Ind Crop Prod，2015，64（2）：167-174.

[56] HASEGAWAT，TAKANO F，TAKATA T，et al.Bioactive monoterpene glycosides conjugated with gallic acid from the leaves of Eucalyptus globulus[J].Phytochemistry，2008，69（3）：747-753.

[57] RAMEZANI H，SINGH H P，BATISH D R，et al. Antifungal activity of the volatile oil of eucalyptus citriodora[J].Frtoterapia，2002，73（3）：261-262.

[58] 陳 婷.不同品种桉叶有效部位及抗菌药效研究[D].广州：广东海洋大学，2010.

[59] PATEL S.Plant essential oils and allied volatile fractions as multifunctional additives in meat and fish-based food products：A review[J].Food Addit Contam A，2015，32（7）：1049-1064.

[60] SIRVAITYTE J，SIUGZDAITE J，VALEIKA V. Application of commercial essential oils of Eucalyptus and lavendar as natural preservative for leather tanning idustry[J].Revista De Chimie，2011，6（9）：884-893.

[61] 刘 雯.利用桉叶提取物处理含铬废水及调节污泥重金属生物有效性[D].南宁：广西大学，2012.

[62] 韦学丰，邓年方.桉树叶的开发利用[J].贺州学院学报，2008（2）：133-136.