云南省部分地区猪群猪瘟血清抗体监测及分析

王世玉，高 洪，严玉霖，赵 汝，刘 嫦，苗淑淑，刘超英

(云南农业大学动物医学学院，云南昆明 650201)

猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus，CSFV)引起的危害猪业发展的主要传染病之一，被世界动物卫生组织(OIE)列为必须报告的传染病[1]。猪瘟病毒(CSFV)属于黄病毒科中的瘟病毒属[2]。在全球范围内，多年来最流行的是CSFV基因型2。病毒颗粒的4种结构蛋白中最有研究价值的是E0和E2。猪瘟病毒蛋白的结构组成和功能决定了猪瘟的散发性，E2糖蛋白和3′非翻译区协同调节病毒的感染。E2糖蛋白介导病毒的扩散和释放，3′非翻译区调控病毒RNA的复制[3]。此外，结构蛋白的糖基化和核糖核酸酶的活性及二聚化作用也决定CSFV的毒力。CSFV感染细胞后可重建细胞代谢程序，有助于自身的复制[4]。CSFV RNA在PK-15细胞细胞核和细胞质中随时间呈不同的动态分布[5]。

猪瘟典型的病理学变化特征是脾脏边缘梗死和肾皮质出血点，淋巴结切面呈大理石样出血。感染高毒性CSFV毒株的猪病死率为100%[6]。易感宿主是猪科家族的不同成员，特别是家猪(Susscrofadomesticus)和欧洲野猪(Susscrofascrofa)[7-8]，疣猪(Phacochoerusafricanus)和假面野猪(Potamochoeruslarvatus)也易感[9]。猪瘟病毒既可水平传播，也可垂直传播。猪瘟兔化弱毒疫苗等的使用，已在世界上几个国家和地区根除了CSF[10]。此外，该疫苗可作诱饵剂对野猪进行免疫接种[11]。

据临床症状、流行病学和剖检可进行诊断分析，应用RT-PCR测定猪瘟病毒，用双抗原、具有筛选和确定性的酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)作为诊断测试[12]。目前常采用ELISA对生产中猪群猪瘟免疫情况进行跟踪监测[13]。

我国将猪瘟列入一类动物疫病病种，并提出净化猪瘟的考核标准[14]。自强制免疫以来，猪瘟疫情控制取得了明显的成效。2017年3月15日，猪瘟退出了国家强制免疫计划[15]。尽管我国猪瘟防控取得了历史性的进步，但因猪瘟流行的复杂性特点，加之多样性的养殖模式及野生带毒野猪的威胁，CSF的净化根除依然面对着诸多巨大的挑战，所以对猪瘟的监控仍不能松懈。此外，对云南省而言，由于独特的地域特征以及外贸发展，给猪瘟等疫病的检疫、诊断和控制带来了极大的困难。因此，在我国猪瘟退出强制免疫后，特别应加强对边境地区家猪及野猪的监测。为明确目前云南部分地区猪群猪瘟免疫状况，随机采血351份，进行抗体检测。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清 在云南省红河州、楚雄州5个地方的规模化猪场和散养户的猪群中前腔静脉采血351份，分离血清，冷藏备用。

1.1.2 猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒 购于武汉科前动物生物制品有限责任公司。

1.2 方法

1.2.1 检测 采用猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒和酶标仪，按试剂盒中说明书步骤对血清抗体进行检测。

1.2.2 结果判定 样品的阻断率≥于40%，该样品判为CSFV抗体阳性，反之则判为阴性。

2 结果

2.1 两州各地区猪瘟病毒抗体检测结果

由表1可见，元阳县、建水县猪瘟病毒抗体阳性率分别为92.50%和97.73%，红河州总的阳性率为95.25%。楚雄市、南华县、禄丰县的抗体阳性率分别为100%、98.91%、100%，楚雄州总的血清抗体阳性率为99.63%，2州总的为98.58%。

表1 猪瘟病毒抗体阳性率

2.2 红河州猪瘟病毒抗体检测结果

2.2.1 元阳县猪群猪瘟病毒抗体检测结果 由表2可知，育肥猪和断奶仔猪猪瘟病毒抗体阻断率的离散度较大，育肥猪中最小的猪瘟病毒抗体阻断率为-3%，远远低于平均阻断率70.61%。育肥猪的猪瘟病毒抗体阻断率主要集中在40%～70.61%之间。在断奶仔猪中最小猪瘟病毒抗体阻断率为35%，远低于平均阻断率60.17%。未断奶仔猪和母猪猪瘟病毒抗体阻断率全都大于40%，均为阳性，且猪瘟病毒抗体阻断率的离散度小，阻断率均集中在均值附近，抗体水平的整齐度高。

表2 元阳猪瘟病毒抗体阻断率平均值与离散度

2.2.2 建水县猪群猪瘟病毒抗体检测结果 种公猪猪瘟病毒抗体阻断率的离散度大于种母猪的，种公猪中最小的猪瘟病毒抗体阻断率为38.02%，远低于平均阻断率63.50%。种公猪的猪瘟病毒抗体阻断率主要集中在40%～63.50%之间。种母猪的猪瘟病毒抗体阻断率主要集中在均值66.76%以下(表3)。

表3 建水猪瘟病毒抗体阻断率平均值与离散度

2.3 楚雄州猪瘟病毒抗体检测结果

2.3.1 楚雄州不同养殖方式猪群猪瘟病毒抗体检测结果 散养的猪瘟病毒抗体阻断率的离散度大于规模化场的，其最小的猪瘟病毒抗体阻断率为-21.83 %，远远低于平均阻断率81.20%。散养户猪的猪瘟病毒抗体阻断率主要集中在均值81.20%之下。规模化场的猪瘟病毒抗体阻断率的离散度较小，其抗体阻断率主要集中分布于其均值88.66%之下，但都大于40%，均为阳性(表4)。

表4 不同养殖方式猪瘟病毒抗体阻断率平均值与离散度

2.3.2 楚雄州各生长阶段猪群猪瘟病毒抗体检测结果 育肥猪猪瘟病毒抗体阻断率的离散度较大，育肥猪中最小的猪瘟病毒抗体阻断率为-21.83 %，远远低于平均阻断率89.87%。育肥猪的猪瘟病毒抗体阻断率主要集中在均值89.87%之下。其余组别猪瘟病毒抗体阻断率的离散度较小，且各组抗体阻断率主要集中在其均值之下，但都大于40%，均为阳性(表5)。

表5 各生长阶段猪瘟病毒抗体阻断率平均值与离散度

3 讨论

与2012年邵志勇[16]进行的云南省楚雄州部分地区猪瘟血清学调查结果相比，禄丰县猪瘟病毒抗体阳性率仍旧保持在100%。楚雄市和南华县的猪瘟病毒抗体阳性率分别上升了17.33、4.05个百分点；总阳性率上升了8.54个百分点；散养户的阳性率上升了16.87个百分点，免疫效果明显好于2012年，这些地区的猪瘟防控取得了显著的进步。这次被检地区猪群猪瘟病毒抗体阳性率均在92.00%以上，5个地区中元阳县抗体阳性率最低，但已达92.50%，免疫效果好。所有猪只均打过疫苗，猪瘟病毒抗体阻断率极低的猪只应进行必要的病原诊断。楚雄州猪瘟病毒抗体总体的阳性率和单个地方的阳性率均高于红河州。红河州地处低纬度亚热带高原型湿润季风气候区，温度高于滇中的楚雄，与越南毗邻，地形错综复杂。这提示，错综复杂的地形、气候和地域环境可能是猪瘟流行的因素。该病的流行也受贸易流通的影响，注意规范的异地引种和市场交易，避免猪瘟病毒的引入。在猪瘟的防控与监测上，红河州今后应采取综合性防治措施。

不同生长阶段的猪群中育肥猪和断奶仔猪猪瘟病毒抗体阻断率的离散度较大，且有阴性。提示猪瘟病毒抗体阻断率的离散度偏高的这几个阶段的猪群对CSFV可能更易感，这可能与母源抗体的干扰、免疫时间、免疫接种的应激反应等有关。不同性别猪群间，公猪的猪瘟病毒抗体阻断率的离散度高于母猪，这可能是由于公猪疫苗免疫失效、接种方法不当或猪只感染了如猪繁殖与呼吸综合症病毒等免疫抑制性疾病而抑制了猪瘟的免疫应答。应密切关注免疫了疫苗但抗体仍为阴性的猪只，及时做好疫苗补免工作，观察其临床症状，若发病则应及时隔离治疗或淘汰。散养的猪瘟病毒抗体阻断率的离散度大于规模化场的，且检测出阴性猪只，这主要是因为散养户在养殖管理水平等方面与规模化场之间还存在着差异。为提高散养户猪群的免疫成效，建议加强散养户在饲养、免疫管理上的力度。

综上所述，这几个地方目前的猪群猪瘟免疫效果较好。为彻底地消除猪瘟，云南省今后应采取综合性防治措施，尤其注意野猪和放养及半圈养的家猪，特别加强对像红河州这样的边境地区的猪瘟的监测工作。

参考文献:

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[14] 国务院办公厅.关于印发国家中长期动物疫病防治规划(2012-2020 年)的通知国办发〔2012〕31 号 [A/OL].(2012-05-20)[2017-04-01].http://www.gov.cn/zwgk/2012-05/25/content-2145581.htm.

[15] 农业部.关于印发《2012 年国家动物疫病强制免疫计划》的通知：农医发〔2012〕1 号 [A/OL].(2012-01-10)[2017-04-01].http://www.moa.gov.cn/zwllm/ghjh/201201/t20120119-2469465.htm

[16] 邵志勇,高 洪,严玉霖,等.云南省楚雄州部分地区猪瘟血清学调查[J].黑龙江畜牧兽医,2014(4):43-44.