电感耦合等离子体发射光谱法测定原料药(异丙托溴铵)中的硼杂质含量

(北京市理化分析测试中心，有机材料检测技术与质量评价北京市重点实验室，北京市科学技术研究院分析测试技术重点实验室，北京, 100094)

原料药异丙托溴铵(ipratropium bromide), 白色结晶性粉末,CAS：66985-17-9，分子式：C20H30BrNO3，相对分子量：412，制成气雾剂用于支气管痉挛、喘息症状，并可用于防治哮喘[1-5]。在原料药合成加工过程中会有硼元素杂质的残留。目前药品中元素杂质残留的测试方法主要是电感耦合等离子体发射光谱法(Inductively Coupled Plasma-Atomic Emission Spectrometry, ICP-AES)、原子吸收光谱法(Atomic Absorption Spectrometry, AAS)、电感耦合等离子体质谱法(Inductively Coupled Plasma-Mass Spectrometry, ICP-MS)等[6-110]。ICP-MS法成本高，仪器测定方法复杂，对样品基体和前处理要求高，不适合于药品研发生产企业原料药中痕量催化剂残留的日常质量控制。AAS法测硼需要基体改进剂，数据稳定性差，费时费力。ICP-AES法测定限可达到mg/kg级，能满足药物中微量杂质元素测定的要求，具有简便、干扰少、稳定、快速等优点。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

ICAP 6300电感耦合等离子体发射光谱仪(美国Thermo公司)；DigiBlock EHD36电热石墨消解仪(莱伯泰科公司)；电子天平(十万分之一，赛多利斯仪器公司)。

异丙托溴铵：某药厂提供；硼标准样品：规格1000mg/L，编号GSB G 62003-90，国家钢铁材料测试中心；优级纯硝酸：MERCK公司；高氯酸：国药集团。

1.2 样品前处理

称取异丙托溴铵样品0.200 g于聚四氟乙烯消解管中，加入10 mL 优级纯硝酸，电热石墨消解仪中120 ℃加热消解至近干后，再加入2 mL优级纯高氯酸，赶酸至样品澄清透明，定容至10 mL，过滤，同时做样品空白。

1.3 实验过程

1.3.1 仪器操作条件

仪器操作参数如下：功率：1150 W；泵速：50 rpm；辅助气流量：0.5 L/min；垂直观测高度：15.0 mm；元素波长：249.773 nm。

1.3.2 标准曲线确定

标准曲线：将1000 mg/L的硼标准溶液逐级稀释至约10.0，5.0，2.0，1.0，0.5，0.1mg/L。标准曲线方程为y= 2583.544x-2.900；R2=0.9999。

2 实验结果与讨论

以异丙托溴铵样品做方法学研究，分别做样品精密度实验、平行性实验和回收率实验。按照中华人民共和国药典2015年版四部《药品质量标准分析方法验证指导原则》之规定如下：

检出限计算公式：LOD=3.3*δ/S

定量限计算公式：LOD=10*δ/S

计算方法得出方法检出限为45.05μg/kg，方法定量限为136.5μg/kg。

2.1 专属性实验

连续进11针空白溶液，得出结果如表1。

2.2 精密度实验

2.2.1 仪器的精密度实验

取溶液浓度约1.000mg/L的硼溶液，连续测定20次强度值，做硼元素的精密度实验结果，计算出RSD为0.237%，(表2)。

表1 专属性结果表

表2 硼溶液精密度实验表

2.2.2 方法的精密度实验

称取异丙托溴铵样品0.200g于消解管中，消解定容过滤后进样测试，做样品中硼元素的含量的精密度实验，结果如表3所示。计算出RSD为0.330%。

表3 异丙托溴铵样品精密度实验表

2.3 回收率实验

称取异丙托溴铵样品0.200g左右，分别加入0.800、1.000、1.200mg硼(分别做3个平行)，对其进行回收率实验，回收率结果见表4。

表4 回收率测定结果(n=9)

2.4 样品测定与实验结果

通过上述对异丙托溴铵进行平行性和回收率实验，结果表明：该测试方法可以用于硼元素的测定。利用所建立的方法分别测试3个批次原料药中硼元素，结果见表5，表明不同批次样品结果稳定。

表5 3个批次样品中硼含量测定结果

3 结论

采用电感耦合等离子体发射光谱仪测定异丙托溴铵中硼的含量，进行了原料药(异丙托溴铵)中硼杂质检验方法开发的研究。通过配制硼系列标准溶液，验证标准曲线方程和相关系数，确定该方法的相关系数r均为0.9999。利用该检测方法，硼回收率较好，在97%～99%之间。方法检出限为45.05μg/kg，方法定量限为136.5μg/kg。精密度实验RSD在2%以内。本实验所建立的方法可以用于原料药(异丙托溴铵)中硼杂质残留的测定，为药品的质量控制提供了依据。

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