美洲大蠊粉对腹泻小鼠治疗的效果

王巧利，王俊刚，申 红，张玉栋，闫文静

(1.石河子大学农学院，新疆石河子　832000；2.石河子大学动物科技学院，新疆石河子　832000)

0　引 言

【研究意义】美洲大蠊是世界性的卫生害虫，虽然能够传播多种疾病，但它也具有一定的药用价值，因其体内含有凝集素、抗菌肽、溶菌酶、脂肪酸等丰富的活性物质，同时，富含蛋白质、氨基酸、矿质元素、微量元素，可见其具有较高的药用和营养价值[1-7]。【前人研究进展】近年来，对美洲大蠊主要集中在药用的研究，以其为原料研发出了相应的产品，如康复新，在治疗肠溃疡、肺结核、消化等疾病中取得了一定的疗效[8-10]，其水提粗体物具有抗肝纤维化的药效[11]。周琼等通过灌胃其粉末发现其对腹泻小鼠具有一定的疗效，且能够提高肉鸡免疫与抗氧化能力[12-13]，治疗鸡白痢等[14]。这些都主要集中在美洲大蠊体内活性物质的提取及虫体全粉药用的研究。【本研究切入点】由细菌感染所引起的腹泻是威胁人类健康的主要疾病之一，主要治疗药物是抗生素，但随着抗生素的大量使用，使得机体出现了许多耐药性菌株，给治疗该疾病造成了种种困难，而美洲大蠊在瘀血、腹胀、腹泻等疾病具有一定的疗效。研究小鼠饲料添加剂美洲大蠊粉对腹泻小鼠腹泻率、稀便率、体重、采食量、饮水量的影响。【拟解决的关键问题】按一定比列将美洲大蠊全粉末添加于小鼠饲料中，研究其对腹泻小鼠的影响，为美洲大蠊粉药用价值提供理论依据。

1　材料与方法

1.1材 料

1.1.1美洲大蠊粉

将饲养于石河子大学农学院生物防治实验室的美洲大蠊低温处死，用流动水洗掉其表面杂物，在35℃恒温箱中烘干至恒重，粉碎备用。

1.1.2小鼠饲料

由石河子大学实验动物中心提供。

1.1.3动物

明种小鼠，由石河子大学实验动物中心提供。

1.1.4试剂

NaCl、蒸馏水、滤纸。

1.1.5仪器

电子天平(精确度为0.01 mg)、超重水系统。

1.2方 法

1.2.1试剂配制

将0.9 g的NaCl融于100 mL的盛有无菌水的烧杯中，置于4℃冰箱中备用。

1.2.2动物分组与处理

试验于2016年7～11月于石河子大学农学院生防实验室进行。测试为期22 d,适应期7 d,建腹泻模型5 d,治疗期10 d。试验选取健康昆明种小鼠，体重为(20±2) g，待其适应一周后，按体重相近随机分组，空白组10只，模型组60只。模型组腹腔注射0.02 mL/g (3×108CFU)的大肠杆菌菌悬液，空白组注射等剂量无菌生理盐水，建模成功后，将模型组再次分为模型对照组和治疗组，治疗组分别为高剂量治疗组、中剂量治疗组和低剂量治疗组， 10只/组，5只/笼，饲喂含美洲大蠊粉剂量依次为8%、5%、2.5%的小鼠饲料[10-16]，而空白组、模型组对照组饲喂未添加美洲大蠊粉的同等量饲料，小鼠投喂饲料是55 g/笼/d，水是150 mL/笼/d ，连续10 d。

1.2.3测定指标

在1、3、5、7、9、11、13和15 d 的下午(16:00)观察并记录小鼠的腹泻数、 2 h的稀便数、采食量、饮水量和体重，计算采食量、饮水量、腹泻率、稀便率。

饮水量(mL) = 第1 d投放水总量(150 mL)-第2 d剩余量.

采食量(g)=第1 d投放饲料总量(55 g)-第2 d剩余量.

腹泻率(%)=腹泻动物数/动物总数×100%.

稀便率(%)=稀便数/排便总数×100%.

1.3数据处理

试验数据采用SPSS17.0进行处理，采用One-Way ANOVA分析，采用多重比较LDS法 ，P<0.05为显著水平。

2　结果与分析

2.1美洲大蠊粉对腹泻小鼠体重的影响

在建模期间 (1～5 d )体重的变化，与空白组相比，在1 d，模型组无显著差异(P>0.05)，在3～5 d，模型组差异显著(P<0.05),在治疗期(6～15 d)，即在小鼠饲料中添加不同剂量(高、中、低)的美洲大蠊粉，与模型组相比，在7 d，高、中、低剂量组无显著差异(P>0.05)，空白对照组差异显著(P<0.05)，在9 d,高、中、低和空白对照组无显著差异(P>0.05)，在11 d，低剂量组无显著差异(P>0.05)，高、中、空白组间差异显著(P<0.05)，在13～15 d，中、低剂量组无显著差异(P>0.05)，高剂量组、空白组差异显著(P<0.05)。在11 d，高、中、空白组与低剂量组无显著差异(P>0.05)。在13～15 d，高剂量组与低剂量组差异显著(P<0.05)，与中剂量组无显著差异(P>0.05)。表1

2.2美洲大蠊粉对腹泻小鼠饮水量的影响

在建模期间 (1～5 d )饮水量的变化，与空白对照组相比，在1 d，无显著差异(P>0.05)，3～5 d，差异显著(P<0.05)；在治疗期间 ( 6～15 d )饮水量的变化，与模型组相比，在7 d，高、中、低剂量组无显著差异(P>0.05)，空白组差异显著(P<0.05)，在9 d，高、中、空白组差异显著(P<0.05)，低剂量组差异不显著(P>0.05)，在11 d,高、中、低、空白组无显著差异(P>0.05)，在13 d,空白组、中、低剂量组无显著差异(P>0.05)，高剂量组差异显著(P<0.05)，在15 d,中、低无显著差异(P>0.05)，空白组与高剂量组差异显著(P<0.05)。在9 d，中剂量组与低剂量组差异不显著(P>0.05)。表2

表1不同剂量美洲大蠊粉下小鼠体重的变化
Table1The effects of Periplaneta americana powder to the body weight of diarrhea model mice

处理Treatments体重Bodyweight(g)1d3d5d7d9d11d13d15d空白组Blankgroup20 44±0 39a23 17±0 32a25 64±0 79a27 40±0 65a27 99±0 57a28 49±1 03a29 35±1 16a32 49±1 02a模型组Modelgroup20 76±0 56a20 34±0 75b20 65±0 60b21 28±0 61b20 87±0 59a22 64±0 67b24 51±0 79b26 33±0 74b高剂量组Highdosegroup20 30±0 52a20 14±0 66b20 26±0 65b21 12±0 79b22 93±0 68a25 97±0 42a29 46±0 61a31 33±0 62a中剂量组Mediumdosegroup20 37±0 34a20 78±0 56b20 75±0 48b22 31±0 61b22 58±0 86a23 46±0 68a26 94±0 55ab28 45±0 40b低剂量组lowdosegroup20 87±0 36a20 74±0 34b20 80±0 47b21 97±0 51b22 86±0 79a24 07±1 04ab25 90±1 00b27 08±0 73b

注：表中相同字母表示差异不显著(P>0.05)，不同字母表示差异显著(P<0.05)，1～5 d,建立腹泻模型期， 6～15 d,美洲大蠊粉治疗期，下同

表2不同剂量美洲大蠊粉下小鼠饮水量的变化
Table2The effects of Periplaneta americana powder on water intake of diarrhea model mice

处理Treatments饮水量Waterintake(mL)1d3d5d7d9d11d13d15d空白组Blankgroup20 25±2 25a24 75±0 25a25 00±2 00a26 50±0 50a21 50±2 50a21 50±4 50a21 50±4 50ab22 50±1 50a模型组Modelgroup15 50±4 00a13 5±0 50b14 00±2 00b17 50±1 50bc12 00±1 00c13 00±1 00a13 00±1 00b12 00±1 00b高剂量组Highdosegroup12 75±0 25a12 00±1 00b13 75±1 25b22 50±2 50ab21 50±0 50a21 00±2 00a21 00±2 00a22 50±1 50a中剂量组Mediumdposegrou17 50±0 01a18 5±0 50ab14 75±1 25b20 50±2 50abc18 50±1 50ab19 00±2 00a19 00±2 00ab17 00±2 00b低剂量组lowdosegroup17 00±6 00a20 00±4 00b16 50±3 50b15 00±2 00c15 00±1 00bc17 50±3 50a17 50±3 50ab17 00±0 13b

2.3美洲大蠊粉对腹泻小鼠采食量的影响

在建模期间 (1～5 d )采食量变化，与空白对照组相比，在1 d，无显著差异 (P>0.05)，在3～5 d,差异显著(P<0.05)。在治疗期(6～15 d)采食量变化，与模型组相比，在7～9 d，无显著差异(P>0.05)，在11 d，低剂量组无显著差异(P>0.05)，空白组、高剂量组、中剂量组差异显著(P<0.05)，在13 d，高、中、低剂量组差异显著(P<0.05)，在15 d，高、中、低剂量组无显著差异(P>0.05)，空白对照组差异显著(P<0.05)。表3

表3不同剂量美洲大蠊粉下小鼠采食量的变化
Table3The effects of Periplaneta americana powder on feed intake of diarrhea model mice

处理Treatments采食量(g)1d3d5d7d9d11d13d15d空白组Blankgroup35 46±2 78a31 23±0 25a32 42±1 95a34 74±2 25a35 50±3 29a37 35±3 94a35 77±2 50a36 33±2 10a模型组Modelgroup22 18±1 36ab20 27±0 08d18 03±3 78b23 60±1 33a26 74±1 10a23 18±0 71b22 58±1 11b23 94±1 05b高剂量组Highdosegroup24 18±4 68ab21 51±0 04cd15 30±3 92b30 28±4 23a38 72±3 10a37 22±1 05a37 98±0 70a38 33±0 84b中剂量组Mediumdposegrou27 83±0 18ab23 55±1 48c17 28±0 81b31 35±5 65a34 85±6 38a34 90±5 48a33 41±4 87a34 76±5 03b低剂量组lowdosegroup26 10±3 69ab26 66±0 49d22 45±0 12b30 50±3 30a32 46±1 35a31 44±0 70ab33 40±0 57a33 57±1 11b

2.4美洲大蠊粉对腹泻率和稀便率的影响

在建模期间(1～5 d)，与空白对照组相比，腹泻率和稀便率增加，在治疗期(6～15 d)，与模型组相比，各治疗组腹泻率和稀便率随着时间的增加而逐渐的降低，即疗效是高剂量组>中剂量组>低剂量组。表4，表5

表4不同剂量美洲大蠊粉下小鼠腹泻率的变化
Table4The effects of Periplaneta americana powder on diarrhea rate of diarrhea model mice (%)

处理Treatments腹泻率(%)1d3d5d7d9d11d13d15d空白组Blankgroup00000000模型组Modelgroup20 0060 0092 0090 0080 0080 0080 0080 00高剂量组Highdosegroup20 0073 0085 0060 0050 0030 0020 0020 00中剂量组Mediumdposegrou33 0060 0093 0070 0060 0050 0050 0040 00低剂量组lowdosegroup20 0020 0087 0080 0070 0060 0060 0050 00

表5不同剂量美洲大蠊粉下小鼠稀便率的变化
Table5The effects of Periplaneta americana powder on defecation rate of diarrhea model mice (%)

组别Treatments稀便率(%)1d3d5d7d9d11d13d15d空白组Blankgroup00000000模型组Modelgroup69 2351 7254 8462 548 1551 7256 6764 29高剂量组Highdosegroup46 6750 0057 1440 6340 7436 3629 1616 67中剂量组Highdosegroup40 0051 8559 2648 3944 8335 0030 0023 08低剂量组lowdosegroup40 0056 0057 6951 7250 0045 4538 0938 09

3　讨 论

美洲大蠊粉中含有凝集素、抗菌肽、溶菌酶、脂肪酸、微量元素等丰富的天然活性物质，使得美洲大蠊粉具有一药多用的效果，扩大了其药用范围，如有提高免疫，降血脂等作用[17]。美洲大蠊粉无毒，饲用安全[18]。

美洲大蠊表皮中含有几丁质、油脂中的不饱和脂肪酸都具有抗菌的作用[18]，美洲大蠊醇提物制剂康复新液具有促进血管增生、组织修复作用[9-10,19]；心脉隆制剂对幼兔心肌缺血症具有一定的保护作用[20]；醇提物油能抑制小鼠s180肿瘤增长，提高免疫[21]，可见其同一提取物含有多种药效。研究发现将一定的比例的美洲大蠊粉添加到小鼠饲料中，其能提高腹泻小鼠体重、饮水量和采食量，降低腹泻小鼠的腹泻率和稀便率，腹泻小鼠体重、饮水量和采食量与时间呈正相关，腹泻小鼠的腹泻率和稀便率与时间呈负相关，且不同剂量组之间有差异，这与美洲大蠊体内含有的药效成分有关。在建立腹泻模型期间，与空白对照组相比，采食量、饮水量和体重均无显著差异(P>0.05)，表明腹泻对小鼠的采食量、饮水量和体重没有影响，在治疗期间，不同剂量美洲大蠊粉能降低小鼠的腹泻率和稀便率，其高剂量组和中剂量组抑制效果显著，低剂量治疗效果不显著。这与周琼[22]通过灌胃美洲大蠊粉发现其具有抗腹泻的作用一致，且饲喂操作简单、方便，对动物模型造成的伤害小，更有利于美洲大蠊粉抗腹泻的研究。但两者说明美洲大蠊粉都可提高机体抗应激能力，增加动物抗腹泻能力。研究仅仅集中在美洲大蠊粉药用的基础研究，其含有的抗腹泻活性成分及抗腹泻的作用机理还有待进一步研究。

4　结 论

4.1腹泻引起小鼠稀便率、腹泻率的增加，采食量，饮水量、体重增长缓慢，并与时间成正比关系。

4.2鼠料中添加不同剂量的美洲大蠊粉，降低了小鼠的稀便率与腹泻率，使采食量，饮水量、体重增长迅速，并与时间呈正效应关系。

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