庄河市野生槲寄生的质量评定
2018-04-12林文栋
高 松，宋 捷，林文栋，潘 强，彭 宇
（大连大学 医学院，辽宁 大连 116622）
1 绪论
槲寄生为桑寄生科植物槲寄生Viscum coloratum（Kom.）Nakai的干燥带叶茎枝，别名冬青、北寄生。功效为活血散瘀，疏通经络。用于治疗风湿性疾病及安胎等。现代研究表明具有抗癌、调节免疫、调节血糖作用[1]。庄河市位于大连市北部地区，境内山峦起伏，群峰叠嶂，属千山山脉南延部分，森林、草场、植物资源丰富；其中槲寄生为其优势药用资源。经查中国期刊论文数据库，未见关于庄河市产槲寄生质量评定的相关报道。因此，为了保护该地区槲寄生的资源、并合理的开发和利用好该植物资源，发展地区中药产业，有必要对其质量进行评价，为今后的开发利用提供理论依据。
2 实验材料和仪器
2.1 实验材料
供试品槲寄生于2018年3月采自庄河市，经张素梅鉴定为桑寄生科植物槲寄生Viscum coloratum（Kom.）Nakai。
2.2 试剂
对照品：紫丁香苷，购自北京世纪奥科生物技术有限公司，编号为C17H2409
甲醇：色谱纯，批号 6000374475 Tedia，United States of America
磷酸（85%）：色谱纯，批号201402122 天津市大茂化学试剂厂
甲醇、无水乙醇、75%乙醇、环己烷、乙酸乙酯、冰醋酸、盐酸（均为分析纯）
硅胶 羧甲基纤维素钠
2.3 仪器
数控超声波清洗器 KH-160TDE型 昆山禾创超声仪器有限公司
高效液相色谱仪HITACHI LC2000 德国安捷伦公司
色谱柱（型号：ZORBAX Eclipse XDB-C18 4.6×250mm） 德国安捷伦公司
多用电热套 DM型 龙口市先科仪器公司
3 实验方法
3.1 水分测试
根据《中华人民共和国药典》通则-0832水分测定法中烘干法，测定庄河产槲寄生的含水量。槲寄生2 g，按照要求放入经干燥后达到恒重的扁形称量瓶，精密称定。并按要求进行测定结果见表1。
表1 水分测试
3.2 总灰分测试
根据《中华人民共和国药典》通则-2302总灰分测定法，测定庄河产槲寄生的总灰分。准备供试品，粉碎后，过二号筛，混合均匀后准确测量2 g，放入到事先已经进行烧灼，达到恒重状态的坩埚中，准确测量。并按要求加热直至完全碳化。逐渐升温，要求达到为500～600 ℃，完全灰化、恒重。平行测定3组，总灰分含量（%）。结果见表2。
表2 灰分测试
3.3 酸不溶性灰分测试
将制得的灰份加入坩埚。将稀盐酸10 m加入到坩埚之内。覆盖表面皿，水浴加热10 min。用热水冲洗表面皿，至5 mL，获得洗液，加入坩埚之中。用无灰滤纸，进行滤过，残渣用水反复洗涤，直到洗液无氯化物反应。滤渣和滤纸放入干锅内干燥，炽灼，恒重，计算酸不溶性灰分含量（%）。结果见表2。
3.4 浸出物测定（热浸法）
根据《中华人民共和国药典》通则-2201浸出物（热浸法）测定法，测定庄河产槲寄生的浸出物。
准确称量槲寄生2 g。放入容量为100～250 mL锥形瓶中，加入乙醇50～100 mL，密塞，称重，静置1 h。连接回流冷凝管，进行提取，沸腾后，维持微沸1 h。静置，冷却，对称重，并加入乙醇使重量与原来相同，摇匀。对上述溶液进行过滤，取滤液25 mL，加入到蒸发皿当中。用水域法蒸干，温度要求为105℃，时间要求为3 h。冷却30 min，精密测定体重。计算醇溶性浸出物含量（%）。
表3 浸出物含量
3.5 含量测定
照2015版药典槲寄生项下高效液相色谱法测定。
供试品溶液 精确测量供试品细粉2 g，将供试品加入带塞锥形瓶。将浓度为70%甲醛溶液25 mL加入到锥形瓶当中，密塞，称重。对其进行超声处理，静置，冷却，再次进行测量。加入70%甲醛溶液，使重量与原来相当，摇匀，滤过。
测定法 准备对照品和供试品溶液，各吸取10µL，用液相色谱仪进行测定，记录结果。
均精密吸取紫丁香苷标准溶液2 µL，4 µL，6µL，8 µL，10 µL；取供试品溶液，均吸取 10 µL，用液相色谱仪测峰面积，进样量为横坐标(X)，峰面积为纵坐标(Y)，计算回归方程[18]。
图1 液相色谱仪测峰面积
图2 供试品高效液相色谱图
根据峰面积公式，y标/y样=(C标×V标)/(C样×V样)，计算出:供试品溶液中紫丁香苷的含量为0.019%。
4 结论
2015版药典规定：水分不得超过12.0%，总灰分不得超过9.0%，酸不溶性灰分不得超过2.5%。醇溶性浸出物不得超过20.0%，紫丁香苷含量不得少于0.040%。测试结果庄河市产槲寄生的水分含量为5.7%，总灰分含量为4.6%，酸不溶性灰分2.2%，均符合《药典》的规定；但醇溶性浸出物含量为14.6%，紫丁香苷含量0.019%，不符合药典的要求，故不能作为合格品入药。就其原因可能与采集时间有关，有待于我们进一步研究。
