白细胞介素—24基因用于膝关节骨性关节炎发病患者中的效果
2018-03-31李洪强刘伟赵立强
李洪强 刘伟 赵立强
【摘要】目的 评估白细胞介素-24基因用于膝关节骨性关节炎发病患者中的效果。方法 筛选本市三甲医院2015年6月~2016年4月接收的膝关节骨性关节炎发病患者46例,设置为研究组(实验标本:膝关节滑膜标本);同时筛选同期在本市三甲医院体检的健康人45例,设置为参照组(实验标本:膝关节滑膜组织),提取机体RNA,以实时逆转录聚合酶链反应来检测膝关节骨性关节炎滑膜组织中白细胞介素-24基因表达。结果 研究组白细胞介素-24基因表达值(0.051±0.006),参照组白细胞介素-24基因表达值(0.940±0.070),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 临床检验膝关节骨性关节炎发病患者过程中,白细胞介素-24基本表达降低,可为临床确诊及救治膝关节骨性关节炎提供依据。
【关键词】白细胞介素-24;基因;膝关节骨性关节炎
【中图分类号】R684.3 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-6681.2017.29..01
为了解白细胞介素-24基因用于膝关节骨性关节炎发病患者中的效果,筛选本市三甲医院接收的膝关节骨性关节炎发病患者46例,同时筛选同期在本市三甲医院体检的健康人45例作研究对象,提取机体RNA,以实时逆转录聚合酶链反应来检测膝关节骨性关节炎滑膜组织中白细胞介素-24基因表达,现将研究结果报道如下。
1 资料和方法
1.1 一般资料
筛选本市三甲医院2015年6月~2016年4月接收的膝关节骨性关节炎发病患者46例,女26例/男20例,40至60岁,均值(52±3.15)岁;同时筛选同期在本市三甲医院体检的健康人45例(参照组),女25例/男20例,42至60岁,均值(53±5.05)岁。比对两组各项资料,差异无统计学意义(P<0.05)。
1.2 方法
提取机体RNA,以实时逆转录聚合酶链反应来检测膝关节骨性关节炎滑膜组织中白细胞介素-24基因表达:(1)选取电子天平称取组织样本0.3~0.5 g,以液氮预冷研钵将组织样本研磨,为保证组织不会融化,研磨时可添加定量液氮。根据RNA提取液100:1的比例慢慢加入RNA,而后研磨组织直至粉末状,将其转到干净工作台,待融化之后将液体转移至1.5 ml体积离心管内,1 ml/管,并在室温下保存超过15 min;检验人员根据氯仿:RNA提取液为0.2:1的比例融入氯仿,将其摇匀30秒左右,且并室温下保存2~3 min,并于4℃环境下,每分钟15000 r,时间保持在15 min左右[1]。将离心后所得上清液转移至Eppendorf管中;(3)异丙醇:RNA提取液为0.5:1的比例融入异丙醇,摇匀,于零下20℃的环境下放置超过10 min,在4℃环境下,每分钟15000 r,大约15 min;(4)把异丙醇完全弃掉,融入乙醇1 ml75%,反复颠倒,于4℃环境下,7500 r/min,离心大约5 min。而后把75%的乙醇弃掉,于超净台内自然干燥大约15~30 min;根据RNA沉淀大小慢慢加入体积适宜的无核酸酶水,并在65℃的环境下助溶大约5~10 min,放于零下80℃的环境下长时间冷冻保存。
选取2 ugRNA放在反应管内,添加1uLO ligodT,而后加入2.5 mmol 4 uLdNTPm,摇匀,加入加dd H2O直到
13 uL。于60℃环境下保存10 min后,于冰上保存超过1 min。
向反应管内倒入5×4 uL第一链缓冲液,1 ul二硫苏糖醇
0.1 mol,1ulRNaseout,1ulSuperscri ptⅢ RT,摇匀后离心,于70℃环境下经灭活逆转录酶,以合成cDNA第一链,保存在4℃环境下。
1.3 统计学处理
以SPSS 20.0软件对数据进行处理,计量资料以“x±s”表示,采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
检验结果显示,研究组白细胞介素-24基因表达值0.051±0.006,参照组白细胞介素-24基因表达值0.940±0.070。差异有统计学意义(P<0.05)。
3 讨 论
作为临床常见关节炎病症之一,膝关节骨性关节炎主要指膝关节受慢性劳损、外伤及关节严重畸形等伴发的关节软骨增生,临床表现为疼痛、伸屈受限、肿胀等症状。患者一旦伴发膝关节骨性关节炎,易使软骨代谢发生较大变化,主要表现在关节软骨结构不断变化,滑膜炎症一直影响此过程。
此次重点了解白细胞介素-24基因用于膝关节骨性关节炎发病患者中的效果,白细胞介素内包含抑制白细胞介素、促炎症白细胞介素2类,运用到膝关节骨性关节炎中的效果确切[2]。白细胞介素-24与炎症抑制、肿瘤抑制及损失修复作用等有紧密联系,可抑制机体鼻咽癌、宫颈癌、肺癌等癌细胞持续生長。而且白细胞介素-24在机体损伤修复中,可提升皮肤角化内的细胞表达,进一步抑制因TGF-α所产生的促炎症作用。
综上所述,经分析白细胞介素-24I基因运用到膝关节骨性关节炎发病患者中的具体作用机制,结果显示,可大大降低基因表达,表明白细胞介素-24与膝关节骨性关节炎发病有直接联系。
参考文献
[1] 赵 霁.通络止痛膏治疗膝关节骨性关节炎临床疗效与护理[J].中国民间疗法,2016,24(7):40-41.
[2] 衡 丽.超声电导药物治疗老年膝关节骨性关节炎的临床观察[J].中国保健营养,2016,26(12):87-88.
本文编辑:吴宏艳