酉州乌羊受体羊同期发情和胚胎移植效果研究

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(1.重庆市畜牧科学院，重庆 400015；2.重庆市山羊工程技术研究中心，重庆 荣昌 402460)

同期发情技术是家畜胚胎移植技术中的一个重要环节，受体山羊同情发情处理后移植优良胚胎,不仅可使妊娠同期化、分娩同期化、出栏同期化，节省人力物力，而且可以充分发挥优良母畜的繁殖潜力。酉州乌羊是国家级畜禽遗传资源，具有乌皮特征，肉质鲜美，目前该资源种群数量极少，已濒临灭绝[1]，因此急需开展有效的保护，以挽救这一珍稀资源。本试验采用T型孕酮阴道栓(CIDR)+孕马血清促性腺激素(PMSG)法的方法对重庆本地山羊同期发情处理并进行胚胎移植，探讨受体羊同期发情和胚胎移植效果，为挽救酉州乌羊这一濒危资源提供一些配套技术和科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验时间与地点

试验于2016年9月开始在重庆市酉州乌羊资源保护场进行。

1.2 受体羊的选择和饲养管理

选择膘情中等、健康的2～5岁的经产重庆本地山羊90只作为受体羊。在试验前一个月集中进行体内外驱虫和常规免疫。受体羊采用舍饲方式，根据营养需要配制日粮进行早晚补饲，按每只0.2～0.3 kg/d。

1.3 药品

CIDR：含孕酮0.3g/个，Pharmacia&Upjohn Pty Limited(New Zealand)生产；PMSG：Intervet Australia Pty Limited生产。

1.4 受体羊的同期发情处理

受体母羊埋植孕酮CIDR硅胶栓并肌注Vade合剂 3 mL，埋栓的第18天撤栓并肌注PMSG250U和Vade合剂3 mL。撤栓后24～36 h内发情，采用CIDR(阴道放置)+PMSG(肌肉注射)方法，在受体羊发情周期的任意一天阴道埋置CIDR，第18天撤栓，撤栓时肌注PMSG 200 IU。发情受体羊依时间差记好耳号并用油漆作相应标记待用。

1.5 受体羊发情鉴定

从撤栓后24 h开始，用试情公羊法进行母羊发情鉴定，有发情征兆并接受试情公羊爬跨的鉴定为发情羊。每天早晚分别试情1次，持续2 d，48 h内发情者为同期发情处理有效。发情受体羊依时间差记好耳号、发情开始时间和持续时间。并用油漆作相应标记待用。

1.6 受体羊红体观察及胚胎移植

发情的受体母羊空腹24 h，经麻醉处理后保定于手术架，进行创口刮毛和消毒处理，采用输卵管移植法进行受体羊胚胎移植，采用手术方法将受体羊腹腔打开，找出子宫、卵巢，观察两侧卵巢上的红体(排卵点)状况，淘汰卵巢上无红体或红体发育不良的受体羊。将吸有胚胎的移卵针通过受体羊输卵管伞口插入输卵管约3 cm处，然后注入胚胎，轻轻按摩以防倒流。

1.7 检胚及胚胎质量鉴定

用口吸管在显微镜下从培养皿中找出胚胎，按胚胎形态、透明带完整性、内细胞团结构等对胚胎质量进行鉴定后，把胚胎装入专用移植枪内，每次2～4枚胚胎，等待移植。

1.8 创口缝合

用丝线对手术羊只进行创口缝合，分2层进行，内层为腹膜层，采用连续缝合，外层采用结节缝合法。

1.9 妊娠检查

对受体羊胚胎移植后35～40 d，确诊是否怀孕，胚胎移植后140 d开始做好产羔准备。

2 结果

2.1 受体羊同期发情效果

观察和统计受体羊情况，结果表明，48 h内发情的羊有74只，同期发情率82.22%，胚胎移植时，用腹腔镜观察卵巢上红体(排卵点)情况发现，有效发情率是76.67%,见表1。

表1 受体羊同期发情情况 只、%

注:同期发情率=发情羊数/处理羊数; 有效发情率=有红体(排卵点)羊数/处理羊数

2.2 胚胎移植效果

以酉州乌羊胚胎作为供体进行胚胎移植，共移植受体69只，妊娠43只，妊娠率为62.32%，共产下55只羔羊,见表2。

注:妊娠率=妊娠数/移植受体羊数

3 讨论

在自然条件下，重庆本地山羊全年都可发情,但母羊发情主要集中在春季和秋季，其他季节相对较少。同期发情是采用药物和激素有计划地对母羊的发情周期进行同期化处理，从而达到人为地控制母羊群在短时间内集中发情[2]。前期作者团队在春冬两季对山羊进行同期发情处理,研究结果说明季节对山羊同期发情和胚胎植移效果有一定的影响，但对已发情的羊只形成功能黄体比率影响不明显，春冬两季处理羊的有效发情率分别为81.08%和60.00%[3]；此次利用受体母羊得到有效发情率76.67%，说明采用T型孕酮阴道栓(CIDR)+孕马血清促性腺激素(PMSG)法的方法对本地山羊在进行同期发情处理是稳定可行的。

胚胎移植技术可充分发挥优良母畜的繁殖潜力，应用MOET技术，可加大选择强度，提高选择准确，缩短世代间隔。据酉阳县畜牧兽医局调查，酉州乌羊目前存栏量仅10 000余头，若不及时采取有效手段进行保护和开发，将面临灭绝的风险[4]。作者团队自2010年以来多次利用激素对酉州乌羊进行超数排卵[5]，得到了较理想的效果，为挽救酉州乌羊这一濒危资源，扩繁酉州乌羊优良种群数量贡献了应有的力量。

[1] 张璐璐,尹权为.酉州乌羊资源现状与发展前景[C].中国羊业进展论文集,2012:23-26.

[2] 权凯，魏红芳.羊同期发情技术研究进展[J]中国草食动物科学，2015，35(1)：54-55.

[3] 陈静,黄勇富,周鹏,等.春冬两季受体山羊同期发情和胚胎移植效果研究[J]西南农业大学学报2016，38(7)：36-39.

[4] 夏元友，彭春江，郑义．酉州乌羊品种特性及生产性能初探．畜禽业，2005(7)：44-45.

[5] 高立芳，黄勇富，任航行，等.酉州乌羊不同季节超数排卵的试验研究[J].西南农业大学学报，2016，38(7)：52-55.

周鹏，高级畜牧师，主要从事动物生产方面的研究。