伪狂犬病的诊断与防治

于占松 李忠刚 （山东省胶州市动物预防与控制中心 266300）李学德 （山东省胶州市李哥庄动物卫生与产品质量监督站）



伪狂犬病的诊断与防治

于占松 李忠刚 （山东省胶州市动物预防与控制中心 266300）李学德 （山东省胶州市李哥庄动物卫生与产品质量监督站）

伪狂犬病是由猪疱疹病毒1型引起的除人和猿以外的所有哺乳动物共患的一种传染病。感染仔猪表现发热、腹泻、呼吸困难、肌肉震颤并继发麻痹、共济失调，母猪表现繁殖障碍，对养猪业造成了巨大的损失。为此，国内外广大兽医科技工作者对伪狂犬病诊断与检测方法进行了大量的研究，建立了病毒分离、动物接种等传统诊断方法，以及大量的血清学、分子生物学诊断与鉴别诊断方法。其中使用分子生物学手段建立的gE鉴别ELISA方法在美国等国家用于伪狂犬病的根除计划并取得了良好效果。研究伪狂犬病的诊断与检测方法对防控伪狂犬病的暴发和传播有重要意义。

1 病原及流行病学

（1）伪狂犬病(PR)是由伪狂犬病毒引起的多种动物和野生动物的一种以发热、奇痒(除猪外)及脑脊髓炎为主要症状的临诊疾病。这种病对猪的危害最大，可导致妊娠母猪流产、死产、木乃伊胎；初生仔猪(特别是一周龄内的仔猪)表现为神经症状和大批死亡(发病率和死亡率几乎达到100%)；成年猪则多为隐性感染。（2）伪狂犬病毒(PRV)为疱疹病毒科疱疹病毒甲亚科猪疱疹病毒1型病毒。有囊膜，对外界的抵抗力强。杀灭条件为 55min，80℃ 3min 或 100℃。失活条件为干燥、阳光直射。该病毒对很多化学消毒剂敏感，例如氯仿、福尔马林等。所以对猪舍及养殖人员的消毒是疾病预防中重要的环节[1]。（3）研究发现，猪伪狂犬病的流行具有季节性，尤其是春、秋、冬三个气温多变的季节。带毒猪以及带毒鼠类等是本病的主要传染源。该病毒可通过消化道和呼吸道传播，也可通过交配、精液、胎盘传播。空气传播是PRV扩散的主要途径。

2 临床症状

猪感染PRV之后所表现的临床症状跟所感染的病毒毒力，感染量量以及日龄有关。仔猪临床表现为急性突发性疾病，高热、精神不振、拒食、发抖、呕吐及腹泻，并有转圈、昏睡、划水、四肢痉挛、发出尖叫、牙关紧咬、角弓反张等明显的神经症状。病程短，通常发病后2d 即可因呼吸衰竭死亡。用肌肉注射头孢噻呋等抗生素治疗无效，紧急接种猪瘟疫苗，也无明显效果。中大猪没有明显的临床表现症状[2]。

3 病理变化

剖检病死猪可见全身淋巴结都有不同程度的肿大，肝脏、脾脏有灰白色坏死病灶，肾脏有针尖状大小的出血点，心脏外膜有出血点和出血斑，脑组织水肿，脑膜、脑实质充血、出血，脑积液增多。

4 实验室诊断及鉴别诊断

4.1 实验实诊断 猪伪狂犬病的诊断通常要结合猪群发病史、临床症状、病理学检查、生物学实验、血清抗体检测、分子生物学诊断技术、病毒分离鉴定及动物实验等多种方法。一般通过临床症状和流行病学调查就可以对该疾病有一个初步的判断。随后可通过实验室诊断来确诊，大体分为以下几种：（1）中和试验：通过监测中和指数、中和效价，发现SNT的特异性很强，但敏感性较低。如果延长抗原与血清的孵育时间，尤以补体存在时，可使其敏感性增高。（2）动物接种试验：用脑悬液皮下接种3只家兔12~72h，3只兔子均出现剧痒、撕咬、死亡，伪狂犬病毒动物接种试验阳性。（3）乳胶凝集试验：利用抗原抗体特异性结合的性质，先用乳胶包被抗原，再与相应血清反应，如几分钟内发生凝集，可判定有PRV感染。美国已经有商品化的LAT试剂盒供临床使用，华中农业大学也于国内率先研制成功LAT试剂盒。LAT操作简单、方便、快速，且敏感性、特异性强，适用于疫病监测或流行病学调查，以及种猪群检疫净化阳性猪初次筛选。（4）免疫荧光试验：用免疫荧光技术对采自不同组织的病料进行检测发现，扁桃体和淋巴结的检出率最高，其次是大脑、脾和脊髓。如病猪的脑三叉神经、延脑和脊髓等组织作冰冻切片后免疫荧光检查，可于2~4h内得到结果。此法是我国目前用于PR 快速诊断的一种较好的方法。（5）ELISA检测广泛应用PRV的检测，ELISA在PRV的早期感染、持续感染中均得到应用，并可以同时用于特性抗原和抗体的检测。在诊断方面，定期采血监测正常猪群中PRV抗体的ELISA效价，当猪群出现症状后，根据ELISA抗体升高的程度判断是否存在感染PRV。母源抗体的存在对疫苗的免疫效果产生影响，常应用ELISA检测方法对疫苗免疫后血清中抗体的情况进行调查。（6）间接ELISA：Mout(1978)、A fshar(1987)、蒋雯(1988)等分别建立了检测伪狂犬病病毒抗体的间接ELISA方法，为ELISA敏感性高，且快速、简便，适于大面积血清学调查。王勇等用gE鉴别ELISA试剂盒调查某猪场流行情况，母猪阳性率为81%，但缺点是此种方法费用昂贵，难以在基层推广[3, 4, 5, 6]。

4.2 鉴别诊断 （1）从流行病学特点上进行鉴别：①流行季节：猪伪狂犬病多发生于春、冬季节；猪流行性乙型脑炎有明显的季节性，即蚊虫活动的夏季和秋季较为多发；钩端螺旋体病流行季节主要在7~10月的高温季节；其他几种疾病没有明显季节性，四季均可发生。②发病年龄：猪伪狂犬病和猪蓝耳病具有明显的年龄差异，哺乳仔猪表现发病死亡最高，其他疾病不同年龄段都易感。③传播途径：猪伪狂犬病主要通过呼吸道、消化道、损伤的皮肤传播；猪细小病毒病通过接触污染源、胎盘和精液传播；猪乙脑主要通过蚊虫叮咬传播；猪瘟经呼吸道(扁桃体)或直接接触传播；猪钩端螺旋体主要经过皮肤、黏膜、消化道传播，也可通过交配、人工授精或菌血症期间通过吸血昆虫传播；猪布鲁氏杆菌病通过消化道、皮肤创伤、交配传播。（2）从临床症状上进行区别：发病母猪都表现为多次发生不孕、流产或产出死胎、木乃伊胎，新生仔猪活力弱等共同症状。初生仔猪症状比较严重，高热、呼吸困难、四肢运动失调、呕吐、下痢，若神经症状出现于发病初期，死亡率可达100%，腹下皮肤有不规则小出血点，但没有紫色和蓝色斑块，青年猪以上症状较轻，病死率低[7, 8]。

5 预防及治疗

（1）消灭猪场中的鼠类，对猪舍及周围环境进行严格消毒。实行仔猪全进全出制度，引进种猪时，须隔离观察1个月，确认无病方可混群饲养。暴发本病时，猪舍的地面、墙壁、设施及用具等用百毒杀隔日喷雾消毒1次，粪尿要发酵处理，分娩栏和病猪栏用2%的烧碱溶液消毒，每隔5~6d消毒1次，哺乳母猪乳头用2%的高锰酸钾溶液清洗后，才让仔猪吃初乳。将病猪隔离扑杀、深埋无害化处理。（2）采取免疫疫苗、检疫、隔离和淘汰病猪及净化猪群等综合性防治措施。猪伪狂犬病有灭活疫苗、弱毒疫苗和基因缺失疫苗3种，主要应用灭活疫苗和基因缺失疫苗。科学设置猪伪狂犬病免疫程序：种猪(包括公猪)，第1次注射后，间隔4~6周加强免疫1次，以后每次产前1个月前加强免疫1次。做为种用的仔猪在断奶时(单月或双月)注射第1次，间隔4~6周加强免疫1次，以后按种猪免疫程序(半年免疫1次，产前1个月前加免1次)进行。商品猪断奶时注射1次，直到出栏。猪发生伪狂犬病时，全场未发病的猪均用伪狂犬病基因缺失弱毒苗进行紧急免疫注射，一般可有效控制疫情[9]。（3）治疗方法，一是对发病猪使用干扰素，稀释后按1ml/头肌注，同时按2ml/头注射抗病毒多肽，按0.12ml/kg体重注射黄芪多糖注射液，然后再用头孢噻呋钠按3mg/kg·体重肌注，1次/d，连用3d。二是对高烧不退、病情严重的仔猪肌注安乃近、氨苄青霉素，1次/d，连用3~5d。三是防止继发感染，在每500kg饲料中加爱乐新500g、70%阿莫西林200g、强力霉素150g；每500kg饮水中加70%阿莫西林150g、多维250g、黄芪多糖250g，连用7d。经采取以上综合防治措施7d后，除个别病重仔猪死亡外，疫情得到有效控制[10]。

[1] 蔡宝祥. 家畜传染病学(第4版)[M]. 北京: 中国农业出版社, 2001: 207-209.

[2] 吴智勇. 某猪场哺乳仔猪伪狂犬病的诊断与防治[J]. 福建畜牧兽医, 2007, 29(5): 19~20.

[3] 李春华, 王英, 蒋凤英. 猪伪狂犬病研究进展[J]. 动物医学进展, 2008, 29(3): 68.

[4] 余秋颖, 常洪涛, 陈文定. 2012-2013年新流行猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及其gE、TK、gD基因序列分析[J]. 中国兽医学报, 2014, 34(10): 1573-1578.

[5] 韩秀珍. 鉴别猪伪狂犬病毒强毒检测方法的研究进展[J]. 畜牧与兽医, 2014, 46(3): 113-116.

[6] 赵蕾, 管宇, 李坤林. 伪狂犬病病毒分子生物学的研究进展[J]. 中国兽医科学, 2011, 41(7): 765-770.

[7] 郝飞, 汤德元, 曾智勇. 猪伪狂犬病诊断技术研究进展[J]. 猪业科学, 2013(7): 92-94.

[8] 肖明均. 生猪伪狂犬病的鉴别与防治[J]. 四川农业科技, 1996(3): 35-36.

[9] 李国平, 周伦江, 王全溪. 猪传染病防控技术[M]. 福州: 福建科学技术出版社, 2012: 128.

[10] 赵桂荣, 张强, 刘玉坤. 猪伪狂犬病的临床诊断及防制体会[J]. 畜禽业, 2008(3): 83.

（2017–10–26）

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