卵黄抗体及其在动物疾病中的应用

2018-02-12，，

畜禽业 2018年7期

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(黑龙江省兽医科学研究所，黑龙江齐齐哈尔 161005)

1 卵黄抗体特性

1969年Leslie和Clem将在卵黄中提取的IgG命名为IgY，在后来的研究中发现禽的卵黄里不但存在IgY，还有含量极少的IgM、IgA、IgD存在。与哺乳动物的IgG相比，两者生理功能相似，结构有着显著的差别。IgY分子量约为180KDa，由两条重链和两条轻链组成，重链没有铰链区，分成4个稳定区和1个可变区，哺乳动物IgG只有3个稳定区。轻链包括1个稳定区和1个可变区。IgY比IgG重链多了一个稳定区，在高盐条件下可形成二聚体和三聚体，有很好的抗原凝集作用。研究表明IgY热稳定性的上限是60℃、70℃，90 min活性明显下降，加入海藻糖等保护剂能增加热稳定性[1]。IgY pH在4.0～11.0稳定，pH在其他范围活性迅速下降。IgY能够抵抗幼龄动物的胃酸屏障。成年动物经肠道中胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶消化后部分抗体保持完整结构，大部分抗体裂解成Fab、F(ab)2和Fc片段，仍然具有中和抗原的活性。4℃卵黄抗体制剂保存5年，室温保存6个月，经检测抗体活性没有降低。将卵黄抗体溶解在9g/L NaCl(含NaN30.1%)溶液中，4℃保存6～7年，抗体活性下降低于5%。IgY为水溶性蛋白，可以用氯仿、PEG、辛酸-硫酸铵等试剂提取分离。

2 卵黄抗体的作用机理

针对细菌的特异性IgY能直接粘附在细菌的细胞壁上，改变其表面结构抑制病原菌生长。IgY与特定抗原结合产生电致效应，导致电子云和电荷的变化使吞噬细胞更容易捕捉吞噬病原菌。针对肠道菌的IgY可以与病原菌的粘附因子结合阻止其粘附于胃肠道黏膜；也可以与黏膜受体相结合，从而阻止粘附因子与胃肠道黏膜结合。口服的IgY在肠道内可被消化酶降解为含有抗体末端高度可变的小肽(Fab部分的结合片段)，进入血液后与特定抗原粘附因子结合发挥作用，还可以与宿主血液中的球蛋白末端结合保护其免收机体破坏[2]。非特异性IgY鸡卵黄免疫球蛋白IgY能够提高小鼠单核吞噬细胞碳粒廓清率及增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬能力，具有增强小鼠的免疫功能的作用[3]。

3 卵黄抗体的应用

心包积液-肝坏死综合征由Ⅰ群禽腺病毒目前没有特效的治疗方法，黄安群等报道对注射IgY试验组鸡攻毒后保护率达100%，说明心包积液-肝坏死综合征IgY能有效中和Ⅰ群禽腺病毒，可完全抵抗病毒的感染。猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻是引起猪腹泻的2种症状相似、发病率和死亡率均很高的接触性病毒性肠道传染病[4]。崔焕忠等以2种腹泻病毒二联灭活苗免疫产蛋鸡，采用氯仿抽提和硫酸铵盐析法纯化IgY，人工感染病毒治愈率为100%，临床应用治愈率为88%。说明制备的IgY对猪传染性胃肠炎和流行性腹泻治疗效果显著[5]。

刘文鑫等用重组大肠杆菌 K88ab和K99原核表达蛋白制备的鸡IgY对仔猪黄痢和仔猪白痢的预防有效率为100%，保护率为91%；治疗有效率为100%，治愈率为87%，表明对仔猪腹泻有很好的疗效[6]。王林会等联合使用金黄色葡萄球菌外毒素及荚膜特异性卵黄抗体，可有效中和外毒素，有效保护MAC-T细胞，阻断金黄色葡萄球菌RN6390对MAC-T细胞的侵袭，显著改善细胞的生长形态[7]。

施少华等建立检测鸭坦布苏病毒卵黄抗体的间接ELISA方法有良好的特异性、重复性，可对鸭坦布苏病毒疫苗免疫效果进行很好的评价[8]。