醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑有关物质的测定

朱剑锋

【摘要】目的 研究测定醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑相关物质的方法。方法 应用高效液相色谱法（HPLC）测定，色谱柱为Venusil ASBC18，流动相A是甲醇-0.077醋酸铵溶液（20∶80，v/v，PH值调节到4.5），相B是甲醇-乙腈（40∶60，v/v），梯度洗脱的流速为1.0 ml/min，检测波长是225 nm，温度为35℃，进样量是10 μl。结果 硝酸益康唑与其他杂志分离度较好，在0.2～100.0 μg/ml浓度范围内硝酸益康唑的峰面积和浓度间有良好的线性关系，回归方程为：y=15.6295x+4.5920（r=0.99997）。结论 应用HPLC测定醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑有关物质，简单有效，应用价值显著。

【关键词】硝酸益康唑；HPLC；醋酸曲安奈德益康唑乳膏；应用效果

【中图分类号】R927.2 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-6681.2017.26..01

醋酸曲安奈德益康唑乳膏是临床广泛治疗真菌所致皮肤病的一种药物，具有止痒、抗过敏、抗炎和抗真菌的效果，该药物的主要物质有硝酸益康唑、曲安西龙和其他3个单个未知物质。为了提高该药物的治疗，对醋酸曲安奈德益康唑乳膏中的有关物质进行测定非常重要。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药

仪器：德国诺尔的高效液相色谱仪，型号为KNAUER S-2500；北京普析的紫外-可见分光光度计，型号为

TU-1810；分析天平，型号为Acculab ALC-110.4；巩义市英峪予华仪器厂的水浴锅；乙腈；甲醇；色谱柱。

试药：武汉诺安药业有限公司生产的醋酸曲安奈德益康唑乳膏；自制的空白敷料样品，不含有硝酸益康唑物质，其他成分均与样品一样；江苏恒瑞医药股份有限公司的醋酸曲安奈德益康唑乳膏；中国食品药品检定研究院所提供的硝酸益康唑对照品；由欧洲药典委员会提供的硝酸益康唑系统适用性的对照样品；硝酸益康唑杂志的A、B、C对照品，乙腈、甲醇为色谱纯，其他作为分析纯。

1.2 方法

应用高效液相色谱法（HPLC）测定，色谱柱为Venusil ASBC18，流动相A是甲醇-0.077醋酸铵溶液（20∶80，v/v，PH值调节到4.5），相B是甲醇-乙腈（40∶60，v/v），梯度洗脱的流速为1.0 ml/min，检测波长是225 nm，温度为35℃，进样量是10 μl。

溶液制备：包含样品溶液、对照品溶液、空白敷料对照溶液。样品溶液制备，将2.5 g的醋酸曲安奈德益康唑乳膏置于烧杯中，并加入15 ml的甲醇，在80摄氏度水浴中进行2 min加热，然后将其移入25 ml量瓶中，充分摇匀，冷却后进行过滤，将续绿叶放置至常温备用；对照品溶液制备，将10 mg硝酸益康唑置入100 ml量瓶中，加入甲醛让其稀释、摇匀后作为对照品储备液待用；将适量硝酸益康唑系统适用性对照品用甲醛稀释为浓度1 mg/ml；分别取10 mgA、B、C对照品用甲醛稀释为浓度为10 ug/ml，作为对照品溶液。

完成溶液制备后进行专属性考察和破坏试验，破坏试验又包含酸破坏试验、碱破坏试验、光破坏试验、热破坏试验以及氧化破坏试验、精密度试验、样品溶液稳定型试验、定量限以及检测限研究、重复性试验和线性关系试验。

2 结 果

硝酸益康唑与其他杂志分离度较好，在0.2～100.0 μg/ml

浓度范围内硝酸益康唑的峰面积和浓度间有良好的线性关系，回归方程为：y=15.6295x+4.5920（r=0.99997）。

3 讨 论

在测定醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑有關物质成本中应注意以下几点：（1）检测波长的选择，由于醋酸曲安奈德和硝酸益康唑在最大吸收波长方面存在差异，为了更精准的测定杂质种类与控制杂质限度，应根据原料药项下的相关物质进行检测。硝酸益康唑原料药的检测波长为225 nm，并将2250 nm作为检测波长；（2）杂质相对保留时间，用硝酸益康唑系统适用性对照品溶液以及A、B、C杂质对照品溶液根据色谱条件，分别进样2针，结果杂质A的相对保留时间为0.3，杂质B的相对保留时间为0.7，杂质C的相对保留时间为0.9；（3）杂质限度，对比中国药典标准与欧洲药典标准中硝酸益康唑原料药的检测方法，在杂质限度控制方面欧洲药典更佳严格，对杂质A、杂质B和杂质C分别制定了限度。除此之外，欧洲药典与中国药典相比较，对未知的单杂质和总杂质的限度标准更加严格。此次研究，通过专属性考察和破坏试验，破坏试验又包含酸破坏试验、碱破坏试验、光破坏试验、热破坏试验以及氧化破坏试验、精密度试验、样品溶液稳定型试验、定量限以及检测限研究、重复性试验和线性关系试验等，最终得出硝酸益康唑与其他杂志分离度较好，在0.2～100.0 μg/ml浓度范围内硝酸益康唑的峰面积和浓度间有良好的线性关系，回归方程为：y=15.6295x+4.5920（r=0.99997）。

综上所述，应用HPLC测定醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑有关物质，简单有效，应用价值显著。

参考文献

[1] 齐宪荣，刘海燕，刘明辉，等.RP-HPLC测定硝酸益康唑脂质体凝胶中硝酸益康唑的含量[J].中国新药杂志，2001，10（5）：360-362.

[2] 杨晓莉，席志芳，绳金房，等.反相离子对高效液相色谱梯度洗脱测定复方硝酸益康唑乳膏含量[J].中国抗生素杂志，2004，29（7）：403-405.

本文编辑：吴宏艳endprint