银杏内酯B对缺氧复氧损伤心肌细胞保护作用研究

孙立峰+张宝英+孟剑锋+李亮+彭辉

【摘要】目的 研究和分析银杏内酯B对缺氧复氧损伤心肌细胞保护作用。方法 对乳鼠的心肌细胞进行分离和培养，建立空白对照组，缺氧复氧组，银杏内酯B组，每组中设立10个复孔，在实施6小时的干预之后，使用倒置光学纤维镜对细胞的形态进行观察。结果 银杏内酯B组的心肌细胞的生存状态与形态与缺氧复氧组相比有明显的改善，银杏内酯B组的存活率高于缺氧复氧组，组间的数据对比，P<0.05，差异具有统计学意义。结论 银杏内酯B能够对缺氧复氧损伤心肌细胞起到一定的保护作用，提高了存活率，减少细胞凋亡的现象，从而降低凋亡率。

【关键词】银杏内酯B；缺氧复氧；保护作用；心肌细胞

【中图分类号】R542.2 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-6681.2017.25..02

银杏属于较为古老的植物，而银杏内酯B则是在银杏叶中提取的药物。银杏内酯B能够对神经系统起到较大程度上的保护作用，具有很强的抗氧化和抗炎的作用[1]。同时银杏内酯B对细胞损伤还可以起到一定的抑制作用，保护细胞。本文将会分析银杏内酯B对缺氧复氧损伤心肌细胞保护作用，详细报告汇总如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

实验药物主要包括银杏内酯B、小牛血清、DMEM培养基与细胞凋亡检测试剂盒。实验对象选择1到3天的乳鼠。

1.2 方法

首先对乳鼠的心肌细胞进行分离和培养，然后建立空白对照组、缺氧复氧组以及银杏内酯B组，每组中可以设立10个复孔，在实施6小时的干预之后，使用倒置光学纤维镜对细胞的形态进行观察。实验操作的具体操作方法为：在无菌的条件下对乳鼠进行开胸，并取出心脏，并对心室组织进行剪取，对乳鼠的心肌细胞进行消化制备，并对其进行100%湿度培养，培养环境注意温度控制在37摄氏度，浓度为5%的二氧化碳，培养时间为72小时。之后将培养基丢弃掉，在每个孔中加入2 mL的无糖台氏液；在等待15 min之后，将出气管与进气管夹闭，使此时的状态为缺氧状态。在2小时之后将缺氧盒打开，再将培养皿取出，此情况则为复氧。之后再对细胞形态进行详细的观察，使用PBS溶液对其进行冲洗，一直到细胞间隙能够在显微镜下清晰显示，再将其放置在通风处，等待其晾干之后再使用显微镜对细胞的形态进行全面详细的观察，并做相应的记录。

1.3 判定指标

使用MTT对OD值进行测定，并计算细胞的存活率，细胞的存活率为实验组的OD值与对照组OD的比例。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件对所收集数据进行分析，计量资料以“x±s”表示，采用t检验；计数资料以百分数（%），例（n）表示，采用x2检验；以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

银杏内酯B组的心肌细胞的生存状态与形态与缺氧复氧组相比有明显的改善，银杏内酯B组、缺氧复氧组与空白对照组的存活率分别为（87.33±5.31）%、（45.42±2.35）%、（96.52±3.56）%，银杏内酯B组的存活率高于缺氧复氧组，组间的数据对比，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

3 讨 论

灌注损伤术与梗塞再通之后最容易出现的并发症就是缺血，具有相当复杂的病理机制，目前临床医学方面对此还尚未得到明确[2]。

银杏内酯B属于从中药银杏叶中提取的活性成分，是一种血小板活化因子拮抗剂，有抗炎与抗氧化等一系列的作用[3]。银杏内酯B能够提高细胞的存活率，通过抑制细胞的损伤来达到保护缺氧复氧损伤心肌细胞的作用，同时对神经系统也能够起到一定的保护作用。此外银杏内酯B能够对氧化型低密度酯蛋白引起的一系列炎症反应起到一定的抑制作用，起到防止心肌细胞损伤的作用[4]。

此次研究结果显示，银杏内酯B组、缺氧复氧组与空白对照组的存活率分别为（87.33±5.31）%、（45.42±2.35）%、（96.52±3.56）%，空白对照组的存活率最高，同时银杏内酯B组的存活率高于缺氧复氧组，组间的数据相对比，差异有统计学意义（P<0.05）。可以看出银杏内酯B组的心肌细胞的生存状态与形态与缺氧复氧组相比有明显的改善，银杏内酯B组的存活率高于缺氧复氧组。

综上所述，银杏内酯B能够对缺氧复氧损伤心肌细胞起到一定的保护作用，提高了存活率，减少细胞凋亡的现象，从而降低凋亡率，具有很高的应用价值，值得推广应用。

参考文献

[1] 程 怡.α7煙碱型乙酰胆碱受体激动剂后处理对大鼠离体心肌细胞缺氧—复氧损伤的保护作用及其机制的实验研究[D].北京协和医学院，2014.12（32）：157-160.

[2] 龚 婉，肖 扬，张 萌，等.丹参总酚酸及三七总皂苷配伍对缺氧复氧损伤心肌细胞的保护作用研究[J].中国中药杂志，2013，23（07）：1046-1051.

[3] 闵 清，白育庭，余 薇，等.黄芪多糖对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用[J].中国药理学通报，2010，30（12）：1661-1664.

[4] 马永洁，朱 丹，钟芝茵，等.人参皂苷Rg1和丹参酮ⅡA配伍对缺氧-复氧损伤心肌细胞的保护作用[J].军事医学科学院院刊，2010，26（03）：243-246.

本文编辑：李 豆endprint