溶解转移法测定盐酸多柔比星植入剂水分

尹情胜，任翠丽，俞敏，张勇强

（1.合肥工业大学控释药物研究室，安徽合肥 230009；2.合肥中人科技有限责任公司，安徽合肥 230038）

盐酸多柔比星（DOX）是周期非特异性细胞毒类抗肿瘤药物，作用于DNA分子结构，具有较强的抗肿瘤活性，临床上广泛用于治疗急性白血病、恶性淋巴瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、肝癌等［1-2］。盐酸多柔比星植入剂是供体内植入使用的长效低毒的新型缓释制剂，现已进入临床研究阶段。该制剂由DOX和生物可降解高分子材料组成，DOX和本品辅料具有较强的引湿性［3］，本品在制备、存储时易吸潮，影响高分子辅料的稳定性，进而影响本品的质量。故有必要建立水分测定方法，用于监测本品中的水分。

药品中水分测定大多采用卡尔-费休氏容量滴定法［4］。测定溶剂通常为甲醇，若样品溶解于甲醇中，可直接加入滴定杯中滴定［5-8］。本品辅料不溶于甲醇，在优选的混合溶剂中溶解也缓慢，因此，无法直接加样滴定。通过查阅文献［9-10］和试验研究，本品用 N，N-二甲基甲酰胺（DMF）-甲醇混合溶解后转移至滴定杯中测定，该方法的精密度和回收率均良好。

1 仪器与试药

1.1 仪器 梅特勒AE240电子天平；梅特勒ET08水分仪；XW-80漩涡混合器（海门其林贝尔有限公司）。

1.2 试药 单组分卡尔-费休试剂（无吡啶型），无水甲醇（分析纯），N，N-二甲基甲酰胺（色谱纯），5A分子筛；盐酸多柔比星植入剂（批号20160402、20160505、20160920、20161105、20161123）。

2 方法与结果

2.1 水-甲醇标准溶液（10 g水／L）配制方法［11］取干燥的100 mL量瓶，加入干燥的甲醇（取甲醇约500 mL，加入干燥的5A分子筛约50 g，具塞，静置过夜，取上清液使用）约50 mL，精密加入纯化水1 mL，用甲醇稀释至刻度，摇匀，密封，即得。

2.2 卡尔-费休氏试液标定 环境湿度小于60%。滴定杯中加入甲醇约30 mL，预滴定至终点，加入水-甲醇标准溶液约1 mL，精密称定，滴定，连续标定3次，结果应在±1%以内，计算费休氏试液的滴定度F，结果见表1。

表1 卡尔-费休氏试液标定结果

2.3 DMF-甲醇（4∶1）混合溶剂中水分的测定 移取混合溶剂约10 mL，精密称定，以甲醇为溶剂，滴定。经测定，混合溶剂水分（W0）为0.020 77%，RSD为0.08%（n＝3）。

2.4 供试品中水分测定方法

2.4.1 供试品溶液制备方法 称取DOX植入剂约200 mg，精密称定（M1），置于25 mL量瓶中，加入DMF约8 mL，精密称定（M2），具塞密封，涡旋至植入剂粒子消失，再加入无水甲醇约2 mL，精密称定（M3），具塞密封，涡旋至澄清，得供试品溶液，密封，备用。

2.4.2 测定方法 滴定杯中加入混合溶剂约30 mL，预滴定至终点，移入供试品溶液约10 mL，精密称定（M4），滴定至终点，记录消耗试液的体积（V）。按下式计算供试品中的含水量（Wt）：

式中，F1为供试品溶液中溶剂的质量分数，F1＝（M2＋M3）／（M1＋M2＋M3）。

2.5 方法的准确度考察 取本品1批（批号：20160402），混合均匀后，称取7份，每份取约200 mg，精密称定；其中2份按2.4项测定植入剂水分；另外5份在制备供试品溶液时，称量加入水-甲醇标准溶液约1 mL，摇匀后，转移溶液，测定水分。

经测定，供试样品中含水量为1.122%，RSD为1.44%。加标回收试验的测定结果见表2。

2.6 方法的重复性和中间精密度考察 取本品（批号：20160505），混合均匀后，称取6份，每份约200 mg，精密称定，按2.4项测定水分，得方法的重复性；隔日另取6份，同法测定，得方法的中间精密度。本方法的精密度和重复性考察结果见表3。

表3 方法的重复性与中间精密度考察结果

2.7 供试品水分测定 3批盐酸多柔比星植入剂水分测定的结果见表4。

表2 方法的准确度（加标回收率）考察结果

表4 3批供试样品水分测定结果

3 讨论

3.1 样品溶解溶剂的选择 本品在甲醇中不溶解，在DMF中溶解不完全，呈浑浊状。经试验，本品在DMF-甲醇混合溶剂中可完全溶解，但溶解速度较慢，在漩涡情况下需要20 min。本方法先用DMF溶解植入剂后，植入剂粒子很快分散消失，再加入少量甲醇后震摇后，即可得到澄清溶液。

3.2 溶解转移法测定本品水分 本品在混合溶剂中溶解时间过长，直接加样滴定时间较长，水分漂移严重，故不适合。本研究根据王晨等［9］报道的溶解转移法，将供试品在量瓶中溶解溶液后定量转移至反应杯中迅速滴定，可以有效地解决样品溶解时间长和水分漂移问题。样品在溶解过程中应具塞密封，防止溶剂的溢出损失。

3.3 卡尔-费休氏试液的稀释 本品属于贵重药品，取样量不宜太多。200 mg样品含水约2～3 mg，因此，需低强度费休氏试液。本研究采用在费休氏试液中加入一定比例的无水甲醇，摇匀后使用，强度每毫升可降至1～2 mg水，滴定体积达到1～5 mL，减少系统误差。

3.4 水-甲醇标准溶液标定费休氏试液强度 卡尔-费休氏试液的标定一般采用10μL进样针加样，连续3次标定结果应在±1%［11］。由于加样量太少，精度差，因此难以达到要求，需连续多次标定。本文参照GB／T 6283-2008方法，称取水-甲醇标液进行标定，精密度高，易达到规定要求。

［1］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典临床用药须知-化学药和生物制品卷［M］.北京：中国医药科技出版社，2011：874-876.

［2］ 胥晓丽，曾菊绒，徐天娇，等.多柔比星诱导的心衰大鼠迷走神经的功能性改变［J］.安徽医药，2016，20（5）：844-847.

［3］ 国家药典委员会.中国药典（二部）［S］.北京：中国医药科技出版社，2015：955.

［4］ 国家药典委员会.中国药典（四部）［S］.北京：中国医药科技出版社，2015：103-105.

［5］ 张捷，尹良军，张书华，等.费休氏水分测定法测定小柴胡颗粒水分［J］.延安大学学报（医学科学版），2015，13（3）：6-7.

［6］ 吴美芳.罗红霉素胶囊中水分测定方法的考察［J］.海峡药学，2014，26（6）：69-70.

［7］ 王立萍，刘英，赵静.利福霉素钠及其制剂水分的研究［J］.中国药品标准，2014，15（3）：187-189.

［8］ 查萍萍，邹云，王玉芳.费休氏法测定罗红霉素颗粒水分［J］.黑龙江医药，2012，25（4）：556-557.

［9］ 王晨，许明哲，王立新，等.几种卡尔费休氏水分测定法［J］.药物分析杂志，2008，28（12）：2145-2148.

［10］王爱萍，龚维，刘新，等.卡尔·费休法测定水分的样品处理方法［J］.理化检验（化学分册），2016，52（3）：369-372.

［11］李云龙.中国药品检验标准操作规［M］.北京：中国医药科技出版社，2010.