采收期对宝兴县华重楼皂苷含量的影响

李碧琴+王春涛+刘帆+郑顺林

摘要 〔目的〕通过对华重楼不同生长发育期有效成分（重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ）含量的研究，为华重楼适宜采收期的确定提供试验依据。〔方法〕采用高效液相色谱法。〔结果〕不同生长期华重楼中4种皂苷总含量发生明显变化。从不同月份采集看，4—9月重楼皂苷含量呈升高趋势，8—9月含量最高，10月后开始下降。不同生长年份看，前期华重楼皂苷积累较慢，第5～6年重楼皂苷达到最高，之后有下降趋势。〔结论〕明确了华重楼重楼皂苷含量高的最佳采收期，即一年中8—9月是最佳采收期，以生长年限第5～6年采收最佳。

关键词 华重楼；皂苷；采收期；四川宝兴

中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2018）01-0056-01

四川华重楼[Paris polyphylla Smith var. chinensis（Franch.）Hara]，为《中国药典》收载的常用中药材[1]，其主要活性成分为甾体皂苷，具有止血、抗菌、抗肿瘤、调节免疫、镇静、镇痛等生物活性，是一些著名中成药宫血宁胶囊、楼莲胶囊等的主要原料之一，市场需求量较大。

由于四川华重楼药用价值较高，遭到长期掠夺式的采挖，野生资源日益减少，导致工业药用原料严重紧缺。近年来，对人工栽培华重楼逐渐重视，人工栽培品种逐渐增多。宝兴县是四川华重楼传统而集中的分布区域之一，在生产实践中，如何采取有效措施控制与提高药材质量，同时获得最好的经济效益是值得关注的重要问题。重楼皂苷是华重楼的活性成分和衡量药材质量的重要指标，已有人对不同生长年限华重楼的皂苷含量进行了检测[2]，但目前尚未查阅到对华重楼药材不同采收期进行系统研究的相关资料，而利用物候期来指导中药材采收是保证良好品质的重要措施[3]。因此，本试验拟采用HPLC法对年度间（同一年不同时期采收）和年际间（不同生长年限采收）的华重楼4种重楼皂苷进行含量分析，以期为确定华重楼的最佳采收期提供依据，进一步服务于四川人工栽培华重楼的规范化种植与采收。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试仪器。1100 LC高效液相色谱仪、KQ-250B型超声波清洗器、RE-2000型旋转蒸发仪、SHZ-m循环水式真空泵、1/10 000电子天秤。

1.1.2 供试试剂。重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ对照品为标品；乙腈为色谱醇，水为去离子蒸馏水，其他试剂均为分析纯。

1.1.3 供试样品。7份华重楼样品于2016年4—10月采自四川省雅安市宝兴县灵关重楼种植基地，为2011年栽培的试验材料，测定年内不同月份采收期华重楼品质的变化；取用种苗栽培2～8年的华重楼，测定不同年份华重楼皂苷积累量。以上材料均为华重楼的干燥根茎。

1.2 试验方法

采用高效液相色谱法[4]。精确称量样品粉末（过3号筛）0.400 0 g，置具塞锥形瓶中，精密加75%乙醇30 mL，超声处理30 min，提取温度为6 ℃，放冷过滤，重复1次，合并滤液。回收乙醇至干，用甲醇溶解定容至10 mL，得供试品溶液。

2 结果与分析

2.1 华重楼品质月份间的变化

华重楼不同采挖月份重楼皂苷含量的变化如表1所示。可以看出，4—9月生长阶段，重楼皂苷总含量呈不断上升趋势。4—5月，变化不大，增加很慢，6—7月重楼皂苷总含量开始加快增长，8月和9月为重楼皂苷总含量的最高峰，以后开始迅速下降。表明重楼皂苷总含量一年中有一个峰值，出现在8—9月，是一年中采挖华重楼的最佳时间。8月后，重楼开始衰老，地上部的营养开始逐渐向地下部转移，为来年的出苗生长做准备，因此其药用品质也达到最佳。

2.2 华重楼品质年际间的变化

不同年份华重楼皂苷含量的变化如表2所示。可以看出，不同生长年限华重楼中重楼皂苷的含量差异较明显，华重楼在2～3年间，重楼皂苷的含量积累很缓慢，总量均在0.3%以下，没有达到药典规定的要求。4年以后开始上升，在5年以后，皂苷总量积累迅速增加，达到0.96%，第6年达到最高，为1.0%。以后含量有下降趋势，维持在0.5%以上水平。表明华重楼皂苷总量最高生长年限是5～6年，不足5年的重楼4种皂苷积累量不足，有可能是皂苷积累时间不足，但也可能是受到生长过程中浇水、施肥、光照等多种因素的影响。因此，从药用品质的角度讲，五至六年生是获得华重楼药用品质最佳的采收时间。而生长时间过长，皂苷总含量反而有所下降，可能是生长时间太长，基部营养为保证顶端生长而大量消耗，导致整体含量下降所致。

3 结论与讨论

该试验结果表明，4种重楼皂苷总含量在8—9月（果熟期）达到高峰，10月开始下降，翌年4—9月呈升高趋势（前期慢，中期快，后期迅速）；华重楼皂苷总量最高生长年限是第5～6年，不足5年的重楼4种皂苷积累量不足，7年以后含量总体呈下降趋势。因此，兼顾产量和重楼皂苷含量，华重楼的最佳采收期为8—9月，在宝兴县及类似生态区，种苗栽植后5～6年是获得华重楼药用品质最佳的采收时间。

宝兴县华重楼的生长发育一般分为营养生长期（4月）、授粉期（5—6月）、果熟期（7—9月）、衰老期（9—10月）等4个物候期。不同生长发育期的华重楼其4种重楼皂苷的积累处于一个动态的过程中，随时间的变化而变化，含量差异较大。采收期是影响中药材产量和质量的重要环节之一，确定最佳采收期需要从药材的产量和质量2个方面进行综合考虑，华重楼的最佳采收期兼顾产量和含量因素，认为应以8—9月（果熟期—衰老期）为宜，这与实际生产中传统采收期基本一致。

重楼皂苷的积累是一个动态过程，在一定年限内，皂苷含量呈遞增积累；但超过一定年限后，皂苷含量呈递减变化，可能是生长时间过长，尾端木质化加快或者药效成分流失引起。同时华重楼生长年限过长，发现尾端有腐烂或者被虫子啃食的现象，促进药效向顶端转移，这些都可能导致药效下降。华重楼皂苷总量最高生长年限是第5～6年，不足5年的重楼4种皂苷积累量不足，可能是皂苷积累时间不足，也可能是受生长过程中浇水、施肥、光照等多种因素的影响[5-6]。

4 参考文献

[1] 国家药典委员会.中国药典，I部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：243.

[2] 李化，黄璐琦，杨滨.论植物物候学指导中药材采收期的研究[J].中国药学杂志，2008，43（19）：1441.

[3] 张烨，吕霜霜，周浓，等.不同生长年限滇重楼中4种重楼皂苷的含量比较[J].中国药房，2011，22（43）：4081-4083.

[4] 黄芸，崔立剑，刘伟娜，等.HPLC-ELSD法分析重楼商品药材中甾体皂苷的含量[J].中国中药杂志，2006，31（15）：1230.

[5] 张珏，王跃华，杨华，等.华重楼研究现状[J].时珍国医国药，2013，24（1）：196-198.

[6] 尹显梅，张开元，蒋桂华，等.华重楼皂苷类成分的动态分布规律对药材质量的影响[J].中草药，2017，48（6）：1199-1204.