咽拭子EBV-DNA和EB病毒抗体联合检测对鼻咽癌筛查价值

刘春霞，林炜，周小娟，叶桂林，周茂华，吴伟，刘联斌

（赣州市肿瘤医院检验科，江西 赣州 341000）

鼻咽癌是指发生于鼻咽腔顶部和侧壁的恶性肿瘤，发病率为耳鼻咽喉恶性肿瘤之首。鼻咽癌主要发生于我国南方五省，即广东、广西、湖南、福建和江西，占当地头颈部恶性肿瘤的首位[1]。东南亚国家也是高发区。EB病毒是Epstein和Barr于1964年首次成功地将Burkitt非洲儿童淋巴瘤细胞通过体外悬浮培养而建株，并在建株细胞涂片中用电镜观察到疱疹病毒颗粒，认为该病毒是多种恶性肿瘤（如鼻咽癌）的病因之一，它主要感染人类口咽部的上皮细胞和B淋巴细胞[2]。人体感染EBV后能诱生抗EBNA抗体，抗EA抗体，抗VCA抗体及抗NA抗体[3]。因此，我们对鼻咽癌和健康体检者采取咽拭子EBV-DNA和血清EB病毒抗体（VCA-IgA、NA-IgG、EA-IgA）的联合检测，通过对两组数据进行的灵敏度和特异性的分析和统计。本研究旨在探讨咽拭子EBV-DNA和血清EB病毒抗体联合检测对鼻咽癌筛查价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集2015年6月～2017年2月间在赣州市肿瘤医院获得病理明确诊断的鼻咽癌患者85例为观察组；同期健康体检者60例为对照组。观察组中，包括有男48例，女37例，年龄20～83岁，平均（45.8±11.3）岁。对照组中，包括男34例，女26例，年龄21～80岁，平均（44.7±12.1）岁。两组受试者年龄、性别等各项指标比较，差异无统计学意义。观察组中，鼻咽癌患者按照TNM分期，Ⅰ期、Ⅱ期视为早期，Ⅲ期、Ⅳ期视为晚期。所有患者均符合临床诊断标准[4]，自愿接受临床检查，并签署了知情同意书。

1.2 研究方法 对观察组、对照组分别展开咽拭子EBVDNA和EB病毒抗体（VCA-IgA、NA-IgG、EA-IgA）联合检测。抗体检测：采集鼻咽癌患者治疗前静脉血5 ml，经化学发光法对VCA-IgA、NA-IgG、EA-IgA抗体进行检测，所有检测均严格按照试剂盒说明书进行，阳性标准：VCA-IgA＞4 AU/nl、EAIgA＞3 U/nl、NA-IgGrA＞2 AU/nl；咽拭子EBV-DNA检测：经咽拭子刷采集受试者咽扁桃体上的分泌物，约3～5圈，而后送检，经荧光定量PCR法进行检测。阳性标准：EBV-DNA＞100 IU/ml记为阳性，低于检测下限记为阴性。

2 结果

2.1 EBV四项指标联合检测诊断阳性率 EBV-DNA、VCAIgA、NA-IgG、EA-IgA单独检测的诊断阳性率分别为80.00%、96.47%、98.82%、57.65%，四项指标联合检测对鼻咽癌的诊断率为98.82%（P＜0.05），见表1。

1.3 统计学方法 本研究数据均用SPSS 22.0统计软件处理，计量资料采用“”表示，组间比较采用t检验；计数资料用例数（n）表示，计数资料组间率（%）的比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

表1 EBV四项指标联合检测诊断结果统计

2.2 不同临床分期鼻咽癌患者EBV检测指标阳性率比较不同临床分期患者的EBV检测指标阳性率不同，Ⅰ期者联合检测阳性率为75%，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期者联合检测阳性率均为100%，可见晚期患者阳性率高于早期患者（P＜0.05），并且四项指标联合检测对晚期患者的诊断阳性率达到100%，见表2。

表2 85例不同临床分期鼻咽癌患者EBV检测指标阳性率比较

3 讨论

研究显示，EBV感染与鼻咽癌发生之间，存在明显的相关性[5]。EBV相关抗体在鼻咽癌诊断中，可产生一定的辅助作用，为目前临床常用的鼻咽癌血清学诊断指标。除此外，在鼻咽癌患者血浆中，存在EBV-DNA高表达情况，并且有研究指出，EBV-DNA表达水平与肿瘤的发生、发展、分期、治疗效果、预后、复发、转移等存在明显联系[6]。

在患者由于一些鼻咽癌相关症状、表现第一次就诊时，对其展开EB病毒血清学检测，多可对鼻咽癌确诊检查的进行与否进行指导。EB病毒抗体血清学检测，对于指导临床后续工作具有重要意义[7-9]。因鼻咽癌的临床症状具有非特异性，仅小部分患者在发病后需要进行进一步确诊。因此，血清学检查的主要目的对鼻咽癌的可能予以排除。因此，对检查结果的灵敏度、准确度提出较高要求。研究证实，EBV DNA能够对肿瘤消长情况进行灵敏反映，在鼻咽癌的诊断、治疗、效果评价以及预后中，均具有指导意义[10]。曾有学者指出，EBV DNA检测，对于EBV原发性感染早期诊断的临床价值十分显著[11]。目前，国内众多学者已经开始对EBV-DNA血清学检测引起重视，但是关于咽拭子EBV-DNA检测的研究还不是十分深入。

曾有研究显示，EBV感染的临床表现与年龄存在明显相关性，在获得确诊的EBV感染患者中，EBV-DNA阳性患儿年龄集中在2～5岁之间，EBV-VCA-IgM阳性者年龄多集中咋5～12岁之间，由此证实，EBV感染在整个儿童时期均会发生，5岁以上儿童会表现出典型传染性单核细胞增多症，年幼患儿以非典型EBV感染的表现为主。国外有学者指出，8个月以下患儿，因受到母体抗体的保护，因此8个月内EBV感染的几率较小，并且对8个月以后的感染存在一定的抑制效果。

近几年EBV-DNA检测收到医学界的推崇，PCR法的应用越来越广泛。本研究针对咽拭子EBV-DNA和EB病毒抗体联合检测对鼻咽癌筛查价值进行评价，探讨其对鼻咽癌的筛查价值。研究发现，四项指标联合检测对鼻咽癌的诊断阳性率为98.82%，显著高于各指标单独检测的诊断率。不同临床分期患者的EBV检测指标阳性率不同，晚期患者阳性率高于早期患者。这一结果与相关文献[12-14]报道结果相似，由此证实，咽拭子EBV-DNA和EB病毒抗体联合检测对鼻咽癌筛查价值显著高于各项指标单独检测，可显著提高鼻咽癌诊断灵敏度，具有较高的筛查价值，值得推广应用。

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