槐杞黄颗粒调节哮喘患儿体液免疫机理初探

刘爽 米继强 王嘉欣 孙丽平(通讯作者)

130012长春中医药大学附属医院1

130117长春中医药大学2

哮喘是最常见的引起儿童慢性咳嗽的疾病之一，其发病率和病死率逐年上升，患病过程中细胞免疫缺陷及体液免疫功能紊乱等情况常出现[1]。近些年来，应用中药制剂槐杞黄颗粒对哮喘患儿进行免疫调节的报道屡见不鲜，现将其机理浅析如下。

支气管哮喘患儿体液免疫的特点

免疫反应作为变态反应的基础，其是机体保护自身的一种生理反应。它对各种属于非自身的具抗原性的物质进行识别、排除和消灭。此外，体内衰老的细胞和突变的体细胞也将被视为非自身物质予以消灭。参与免疫的主要细胞和各种因子如下：①淋巴细胞：参与免疫的免疫活性细胞主要是淋巴细胞。淋巴细胞主要分T细胞和B细胞。在血循环中的主要是T细胞，它们的寿命可长达数月、数年，甚至终生。在免疫反应中T细胞处于中心地位，它不仅是免疫反应的调节者，同时又作为免疫反应的效应物。根据细胞膜表面存在的分化抗原簇的差异T细胞又分为辅助性T细胞(Th)和细胞毒T细胞(TC)或抑制性T细胞(TS)，前者细胞表面特征性的分化抗原为CD4+，CD8+。在免疫反应中，最重要的又是Th即CD4+T细胞。Th细胞在接受抗原刺激后分化为Th1和Th2细胞。Th1细胞主要涉及迟发超敏反应，也产生干扰素，一次激活外周的巨噬细胞，起到保护机体的作用。此外，激活的Th1细胞能够帮助B细胞使免疫球蛋白转为可溶性IgG类型，对抗细菌和病毒感染。Th2细胞诱导的途径最终产生IgE。众所周知，IgE促使变应性炎症的形成，因而，Th2细胞在引起哮喘的变应性炎症上起了重要作用。②抗原呈递细胞；③MHC；④单核-吞噬细胞系统；⑤肥大细胞和嗜碱粒细胞；⑥EOS；⑦分化抗原簇(CD)：CD是存在于T细胞分化发育成熟的过程中不同阶段的一组特异性表面标志。如T细胞分化过程中其表面出现第1个特异性标志即CD2，因此，有CD2的T细胞还很不成熟。而出现于全部外周血T细胞表面和胸腺细胞的晚期的是CD3，成熟的胸腺细胞和T细胞还表达CD3或CD8；⑧T细胞受体；⑨细胞因子；⑩黏附分子：当哮喘发生时，气道就会聚集许多炎症细胞。这些炎症细胞能从血管内移行到变应性炎症部位，附着于白细胞、内皮、血管外基质和上皮细胞的各种AM起了重要作用，而且它们决定了炎症细胞移行的方向；a.补体：为9种血清球蛋白组成的一组蛋白质，只有依次被激活后才能表现出生物活性。b.Ig：当B细胞接受抗原的双信号刺激后，增殖分化为浆细胞，分泌针对该抗原的不同类别的具有抗体活性的蛋白质参与体液免疫。Ig约占血清蛋白质的20%。分IgA、IgG、IgM、IgD和IgE。前4类抗体与抗原结合后能产生沉淀，故称为中和抗体或沉淀抗体。IgE为亲细胞抗体，是引起Ⅰ型变态反应的罪魁祸首。抗原和变应原抗原：变应原是引起Ⅰ型变态反应的抗原性物质。c.特应性和特应性疾病。

槐杞黄颗粒药理浅析

槐杞黄颗粒由3种药组成，分别为槐耳菌质、枸杞子、黄精。槐耳菌质经热水对清膏进行提取，经分析后发现其含有20余种矿质元素、多糖及蛋白质等多种有机成分，成分与子实体一致。多糖蛋白(PS-T)是其主要活性成分，它是杂多糖(由6种单糖组成)结合18种氨基酸构成的蛋白质。槐耳清膏、多糖能非常显著地促进细胞吞噬功能，可增强溶菌酶活性，增进脐血EaRFC及GVHR，同时也可使特异性抗体产生及血清中血红蛋白含量提高，促进小鼠脾细胞DNA合成。复旦大学附属儿科医院孙雯等人进行了中药槐耳对哮喘缓解期儿童外周血单个核细胞Th1/Th2平衡的基因及蛋白水平调节的研究。结论证明：槐耳菌质能够明显增加IFN-γ及减少IL-4 mRNA的表达，可调节哮喘儿童缓解期IFN-γ/IL-4比值的失衡，平衡Thl/Th2比值的漂移。大量研究表明，一些疾病的病理机制由免疫异常所介导，如Sjgrens综合征，其淋巴细胞及其亚群的功能发生异常变化，抗体水平亦出现明显异常，多表现为外周血T细胞减少，尤其是抑制性T(Ts)细胞减少，辅助性T(Th)细胞相对增多，IgM和IgG水平升高，伴有抗体依赖细胞介导异常免疫反应等。目前尚无合适药物用于治疗。相关研究依据上述疾病的免疫异常改变特点，采用正常或异常免疫反应的病理动物实验模型，体内外研究相结合，较系统地观察了槐杞黄颗粒对非特异性免疫、细胞免疫和体液免疫反应的影响。结果表明，槐杞黄颗粒2个剂量组对小鼠巨噬细胞吞噬功能有明显的促进作用，对机体免疫状态的改善是非常有益的。相关研究表明，槐杞黄颗可明显对抗Cy所致的DTh的异常或降低，双向调节作用明显，其还可使异常改变的脾指数和胸腺指数明显恢复，体外研究也表明，该药3个剂量组均可使DTh小鼠异常的T淋巴细胞增殖功能获得明显恢复，这可能是其免疫调节作用得以发挥的一个重要机制。这一结果表明槐杞黄颗粒对控制自身抗体形成可能具有一定的作用。

槐杞黄颗粒调节哮喘患儿体液免疫的机理初探

中医认为槐耳菌质、枸杞子、黄精三药相合，既益气，又滋阴，槐耳偏于益气，黄精气阴并补，枸杞子偏于滋阴，配伍在一方之中，养阴而不过于滋腻，补气而不致滞气，药均和平，平补气阴，平中寓奇。三药归经于心、肝、脾、肺、肾五脏，心主血、肺主气，肝藏血而主疏泄，脾主运化，为后天之本，肾藏精、气，为先天之本。本方入五脏，脏腑相关，益五脏之精气，滋脏腑之阴津，药味虽不多，而对整体之虚弱具有照顾全面、强壮补养之功效。吴振起等对缓解期CVA患者采用槐杞黄颗粒进行治疗，临床有效率达92.05%，其中含有槐耳、黄精、枸杞子，三药合用，滋脏腑阴津，平补气阴，益五脏精气，研究证明基础治疗配合槐杞黄颗粒口服，可改善患者的免疫功能[2]。李济金等人对槐杞黄颗粒对儿童支气管哮喘患者T淋巴细胞亚群检测的影响进行了相关研究，结果表明槐杞黄颗粒是很高的生物反应调节剂，可增强肺部抗炎作用，能促进患儿T淋巴细胞分裂增殖、成熟分化，修复Th1/Th2平衡，提高患儿外周血T淋巴细胞亚群含量，对儿童支气管哮喘患者疗效显著。孙海平等人对槐杞黄颗粒对毛细支气管炎后哮喘的预防作用进行了研究，发现槐杞黄颗粒能使毛细支气管炎后哮喘发病率降低，以下是可能原因：①Th1/Th2紊乱可能在毛细支气管炎患儿中存在，而槐杞黄颗粒中由槐耳菌丝经固体发酵产生的新真菌类药物的槐耳菌质，其含多种矿物质元素，主要成分槐耳菌质多糖(PS-T)是一种杂多糖，由6种单糖组成，结合18种氨基酸构成的蛋白质。PST是一种生物反应调节剂，具有很高的活性[3]，与中药黄精共同作用，对患儿T淋巴细胞分裂增殖、成熟分化有促进作用，对机体免疫系统的诸多环节都有激发作用，从而纠正毛细支气管炎患儿Th1/Th2平衡紊乱，使其得以恢复。②中医药研究显示枸杞多糖(LBP)作为枸杞子中的主要功效成分，其有多种作用，如增加免疫功能、抗氧化。LBP通过多种方式对免疫调节功能产生一定影响，一方面它增加人类外周血单核细胞中TNF-α和IL-2等细胞因子的表达，mRNA和蛋白水平都受到LBP剂量的影响，有一定的相关性[4]；另一方面LBP可刺激脾T细胞增殖，机制如下：诱导IL-2和IFN-γ基因转录和蛋白表达，蛋白1(AP-1)和转录因子活化T细胞核因子(NFAT)的激活，促进CD25的表达，从而增强免疫功能[5]，对毛细支气管炎后哮喘起到预防作用。

为了探讨槐杞黄颗粒对免疫功能的影响，有研究试验采用动物免疫实验模型，在整体、器官和细胞水平上研究了该药的免疫调节作用。所采用的剂量由临床拟用剂量折算而得，阳性对照药选用具有免疫调节作用的黄芪精口服液。研究结果表明，槐杞黄颗粒不仅可明显提高巨噬细胞吞噬功能，而且对环磷酰胺所致增高或低下的细胞和体液免疫异常改变均有明显调节作用，并能使T、B淋巴细胞增殖能力和IgM、IgG含量维持近正常水平。中南大学湘雅二医院的李红梅等人进行了槐杞黄对哮喘大鼠Th1/Th2/Th1细胞因子及肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响的研究。研究结果显示：与正常对照组相比，哮喘组血清和BALF中IFN-γ降低，IL-17、IL-4升高，采用布地奈德干预后IL-4和IL-17明显降低，IFN-γ明显升高，提示对哮喘大鼠的Th1/Th2/Th17失衡吸入性糖皮质激素能够起到明显改善作用；IFN-γ水平在采用槐杞黄干预后显著升高。布地奈德联用槐杞黄干预后IL-17降低、IFN-γ水平升高，均比单用布地奈德效果明显。提示槐杞黄有提高IFN-γ表达、使哮喘大鼠Th1细胞功能增强的作用，与糖皮质激素有协同作用。槐杞黄不仅能明显提高肺泡巨噬细胞的吞噬能力，且有明显提高哮喘大鼠IFN-γ表达的功效；联合应用槐杞黄辅佐吸入性糖皮质激素对哮喘进行治疗，不仅能够增强肺泡巨噬细胞吞噬能力，还能对吸入性糖皮质激素纠正哮喘大鼠Th1/Th2/Th17失衡起到显著提高的作用。

综上所述，槐杞黄颗粒不仅对非特异性免疫功能有促进租用，对异常改变的体液和细胞免疫反应有明显调节作用。在临床中，槐杞黄颗粒可以用于调节哮喘患儿的体液免疫功能。