76例丙型肝炎病毒基因分型结果分析

徐庆波 徐建华 杨丽娟

丙型肝炎病毒（HCV）是引起丙型肝炎的病原体。HCV感染是一个世界性的健康问题，其发病率逐年增高，且致病性强，病情隐匿，若不进行合理治疗极易转为慢性，甚至发展成肝硬化和肝细胞癌。这些病变的形成与其病原HCV的某些重要生物学特性相关[1-3]。HCV是RNA病毒，其基因组为单股正链RNA，其基因组分为5'非编码区（5'untranslated region，5'UTR）、编码区以及3'非编码区（3'UTR），其中5'UTR区、编码区中的核心区最保守，E1区、E2区最易变异，HCV高度变异性导致HCV存在不同的基因型和基因亚型[4-5]。HCV基因型可能与初始感染剂量、病毒复制效率、感染期限、宿主免疫反应、感染物的异质性有关[6-7]。

本研究收集了一汽总医院自2010年8月—2017年6月共76例抗-HCV和HCV-RNA均为阳性的患者的实验室HCV基因分型结果以及患者的临床资料进行分析，现将结果报告如下：

1 材料与方法

1.1 标本来源

标本来源于一汽总医院2010年8月—2017年6月76例住院患者，其中男47例，女29例，年龄10～78岁；患者抗-HCV和HCV-RNA均为阳性，并收集患者的临床资料。

1.2 方法

1.2.1 试剂 丙型肝炎病毒（HCV）基因分型检测试剂盒由上海之江生物科技股份有限公司提供。

1.2.2 仪器 核酸扩增仪采用美国Applied Biosystems 公司的ABI7500实时荧光定量PCR仪。

1.2.3 检测方法 采用丙型肝炎病毒分型特异性引物及荧光探针，应用一步法聚合酶链式反应（PT-PCR）结合Taqman技术对丙型肝炎病毒（HCV）进行Ⅰ型和非Ⅰ型的荧光PCR分型检测；循环条件：45℃×10 min；95℃×15 min；再按 95℃ ×15 s→58℃×60 s，循环40次，单点荧光检测在58℃，反应体系为25 μl反应体系，荧光通道检测选择：选用FAM通道。

1.3 统计学方法

采用Microsoft Excel表格，计数资料利用χ2检验。P＜0.05，为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HCV RNA基因分型情况

检测76例样本，共检出Ⅰ型基因30例，构成比39.5%；非Ⅰ型基因46例，构成比60.5%。

2.2 不同性别各基因型分布比较

其中Ⅰ型例数男性21例，非Ⅰ型例数男性26例，Ⅰ型男性占有率为44.7%。其中Ⅰ型例数女性9例，非Ⅰ型例数女性20例，Ⅰ型女性占有率为31.0%。χ2=1.35，P=0.246。

2.3 HCV感染病例与输血情况

在76例HCV感染者中，男性有输血史者25人，无输血史者22人，男性中有输血史者占感染者比例的53.2%；女性有输血史者15人，无输血史者14人，女性中有输血史者占感染者比例的51.7%。χ2=0.02，P=0.887。

3 讨论

许多研究表明，HCV基因分型对丙肝临床表现及肝病严重程度有影响，I型基因比非I型基因致病性强，尤其是Ib型基因致病性更强，导致I型患者的肝功能损害较非I型严重，I型患者HCV RNA含量、丙氨酸氨基转移酶均高于非I型患者[8]。不同基因型对治疗的反应存在差异。丙型肝炎防治指南中已明确指出丙型肝炎治疗前需要基因分型。本研究对76例样本进行准确的基因分型，为临床医生实行针对性的个体化用药提供参考。

3.1 通过结果2.1可以看出，76例HCV染者HCV基因型以非Ⅰ型为主（60.5%），其次为Ⅰ型（39.5%）。这与文献中关于HCV感染中，欧美国家多数为Ⅰ型感染，而亚洲国家以非Ⅰ型为主的结论是相吻合的[9]。也与我国HCV基因型以Ⅱ型为主，多种基因并存，混合型比例亦较高的结果一致[10]。

3.2 通过结果2.2可以看出男女各基因型分布差异无统计学意义。这与黄雪琼等[11]的报道是相一致的。

3.3 通过结果2.3可以看出，在76例HCV感染者中，40例患者既往有输血史，占感染人数的52.6%，说明HCV感染与输血有极大关系。HCV是引起输血后慢性肝炎及肝硬化的主要原因之一，50%～70%肝癌患者的抗-HCV呈阳性，我国肝癌患者肝组织中约10%可检测到有HCV RNA。丙型肝炎和乙型肝炎不同，HCV只感染黑猩猩，疫苗研制模型受到限制，目前仍然没有预防丙肝的疫苗，因此，我国预防丙型肝炎的重点应放在对献血员的管理上。严格筛选献血员：严格执行《中华人民共和国献血法》，执行无偿献血。通过检测血清抗-HCV、ALT和HCV RNA，严格筛选献血员；加强消毒隔离制度，防止医源性传播。这些与谢风[12]等人报道的输血是HCV感染的主要途径相一致。

通过结果2.3还可以看出男女两组丙肝患者有输血史的概率分别为53.2%和51.7%，两者的差别可能是抽样误差所致，亦可能是两组输血概率确有所不同。在结果2.3中通过χ2检验计算出来χ2=0.02，P＞0.05，差异无统计学意义，可以认为有输血史者感染HCV的概率无性别差异。