天津部分地区种公猪常温精液中细菌的分离与鉴定

（天津市动物疫病预防控制中心，天津 300420）

人工授精是扩大猪养殖规模，提高猪肉产量的重要环节，而猪精液常温保存则是猪人工授精的关键性技术。通过酸性环境的营造对常温条件下保存的猪精液中精子的运动进行限制，从而使精子保持在活性可逆的状态下。但是常温保存下的猪精液容易滋生细菌等微生物，导致精液品质的下降。因而研究种公猪常温精液中细菌的分离鉴定方法对于猪人工授精技术的推广具有重要的意义。

1 细菌对于种公猪精液品质的影响

常温保存条件下没有受到细菌污染的猪精液可以在后续的受精环节保持较高的活性，精液品质较高。而受到细菌污染的精液品质及常温有效保存时间等都会受到一定的负面影响，菌落的种类、数量不同对于猪精液的影响也会有所差异，以大肠杆菌为代表的革兰氏阴性菌对于猪精液品质的影响较为显著，一旦被污染猪精液在短时间内就会出现pH值、精子活力的下降，顶体完整度也会受到影响。受到多种细菌污染的猪精液的常温有效保存时间缩短，精子存活率较低，使用被污染的精液将增加人工授精的失败率，除此之外还可能影响母猪的生产性能，增加母猪子宫内膜炎的发病概率，影响母猪的健康。细菌影响猪精液品质的通常表现为凝集精子、对稀释环境中的渗透压进行改变、无氧环境下呼吸作用产生酸类物质等等。为了改善猪精液的细菌宜居性，可以在精液稀释药剂中添加适当的抗生素，保证猪精液的常温保存质量和人工授精成活率。

2 猪精液中细菌的分离鉴定

2.1 猪精液中分离出的细菌类别

健康的种公猪精液本身是无菌的，常温保存状态下精液中滋生的细菌来源包括采精过程中接触的器械、种公猪的包皮及其内容物、采精环境以及采精工作人员等。稀释操作、种公猪养殖环境以及采精操作是种公猪精液中细菌传播生长的主要影响因素。目前猪精液中具体的细菌种类尚未有定论，所选用的猪精液样品差异、分离方式差异都会导致检测出的菌种的不同。有学者采取了天津地区的常温保存下的种公猪精液样品，检测出的细菌种类包括绿脓杆菌、溶血性链球菌、枯草芽孢杆菌、葡萄球菌、大肠杆菌、微球菌、棒状杆菌，其中以棒状杆菌的数量最多。此外还有学者从自身收集的猪精液样品中分离出了克雷伯氏菌以及铜绿假单胞菌。国外也有学者对猪精液中微生物进行了研究，通过对相关文献的查阅发现国外有研究表明猪精液中细菌的检出率与猪场的养殖条件和生产水平有直接的影响，相同数量的随机猪精液样品生产条件较差的猪场的细菌检出率要显著高于生产水平较高的猪场，检出的细菌主要包括假单胞菌、沙门氏菌和大肠杆菌。研究人员通过对猪精液中分离出的细菌的来源进行分析，发现除了特殊环境下采集保存的猪精液外，常温下稀释保存的种公猪精液中的细菌种类主要有肠杆菌科、丝状真菌以及葡萄球菌属，例如大肠杆菌、黏质沙雷氏菌及粪肠球菌等。

2.2 猪精液中细菌的控制措施

稀释药剂中大量营养物质的存在是导致猪精液滋生细菌的主要原因，针对于此可以通过在稀释剂中添加抗生素的方式对细菌的生长繁殖进行抑制，提高猪精液中精子的活力，延长猪精液的常温保存时间。需要注意的是不同类型的抗生素的细菌类型和细菌效果也有所差异，有些文献表明庆大霉素、青霉素和链霉素都常被用在猪精液稀释中，但是由于细菌耐药性的增强，上述抗生素已经无法对细菌进行有效的抑制。近些年来多种新型抗生素也被用在猪精液的稀释中，其中磺胺类抗生素可以对常见的放线菌、螺旋体细菌等进行有效的抑制，且该类抗生素的毒副作用较轻。头孢唑林凭借低毒、耐酶以及高效性也得到了越来越多养殖行业的青睐，该类抗生素对于猪精液中常见阳性菌可以进行有效的抑制，但是不可以与青霉素、氨基苷类抗生素联用。

除此之外还可以通过碘溶液的应用达到杀菌的效果，聚维酮高络合碘溶液不仅可以杀灭精液内的病原微生物，还可以破坏细菌的遗传基因，相较于抗生素不易出现抗药性，且对于环境没有危害，因而可以在种公猪精液常温保存中广泛使用。将聚维酮高络合碘溶液应用与现代化猪养殖模式下，可以有效避免细菌等病原微生物通过精液进行垂直传播，对于猪传染疾病的控制也有着良好的效果。在种公猪的精液中添加适量的碘溶液可以有效杀死白色念珠菌、不动杆菌、大肠杆菌以及假单胞菌等，但是对变形杆菌的影响较弱。

3 结语

采精人员的种公猪精液采集、运送过程中的操作、精液稀释以及检测等环节出现问题都有可能造成猪精液的污染。为了提高猪精液品质，保障猪人工授精的顺利完成，结合天津地区猪养殖的特点，必须要加强种公猪的疫病防范和病原体检测，严格按照采精操作流程进行猪精液的采集、稀释和分装，避免采精过程中的细菌污染。还需要积极采用新型的精液杀菌药物，切实有效地保证种公猪精液常温保存的品质。

[1]尹丝璐，胡坚，李维娜，等.精液细菌感染对精液参数及细菌耐药性的影响——附74376例男性不育症患者分析[J].南方医科大学学报，2018，（1）：122.

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