不孕症患者宫颈分泌物沙眼衣原体和解脲支原体的检测及临床意义

宋玉美

(周口市疾病预防控制中心专科病医院 检验科 河南 周口 466000)

随着社会生活节奏加快，工作压力不断增大，女性不孕症的发病率呈逐年增长趋势，其影响因素主要有排卵因素、输卵管因素、子宫因素等，给患者造成较大痛苦[1-2]。宫颈分泌物沙眼衣原体(chlamydia trachomatis，CT)与解脲支原体(ureaplasm urealyticum，UU)容易对生殖道产生感染，引发宫颈炎，甚至导致不孕[3]。荧光定量PCR技术(realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ-PCR)是一种基于酶促化学反应放大试管中待测基因，能短时间内将待测基因扩增至上百万倍，提高基因诊断灵敏度，降低诊断难度[4]。本研究通过检测不孕症患者宫颈分泌物沙眼衣原体和解脲支原体的感染情况，探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1一般资料选取2014年8月至2016年9月周口市疾病预防控制中心专科病医院106例不孕症女性患者作为观察组，年龄21～36岁，平均(28.45±2.64)岁，其中59例原发性不孕患者(原发性不孕组)和47例继发性不孕患者(继发性不孕组)。另选同期102例已生育健康体检女性作为对照组，年龄20～37岁，平均(29.25±3.13)岁。观察组与对照组受检者一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，所有患者均自愿参加本研究并签署知情同意书。且本研究经周口市疾病预防控制中心专科病医院伦理协会审核批准。

1.2方法

1.2.1仪器选择及标本采集 以定时荧光定量PCR技术检查，仪器由中山大学达安基因股份有限公司提供。采用无菌窥阴器，充分显露宫颈，宫颈外分泌物用无菌棉球擦拭获取，并于不孕患者宫颈处插入无菌棉拭子，同时转动，停留数秒后取出，将棉拭子置于无菌试管，密闭送检。

1.2.2FQ-PCR检测 试剂盒由深圳匹基生物工程公司提供，严格依照剂盒说明书操作，标本棉拭+1.5 ml生理盐水充分洗涤，吸取混悬液，再加入核酸提取液A(100 μl)，混匀，离心(13 000 r/min)10 min，弃上清液；加入核酸提取液B(50 μl)，混匀，100 ℃裂解10 min，离心(13 000 r/min)处理5 min，取上清液(DNA)，将其作为反应模板，并进行FQ-PCR检测。反应条件：93 ℃ 5 min预变性，再按93 ℃ 45 s、55 ℃ 45 s进行40个反应循环。结束后电脑自动计算定量结果，标本均按试剂盒提供定量阳性质控标准，做定量阳性质控，检测后均进行阴性及阳性对照。

1.3观察指标①统计对比两组UU、CT及混合UU+CT感染检测结果；②对比观察组中原发性不孕组及继发性不孕组UU、CT及混合UU+CT感染检测结果。

1.4统计学分析采用SPSS 20.0软件进行数据分析，定性资料以率(%)表示，组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

观察组UU DNA、CT DNA及混合感染阳性率均高于对照组，差异有统计学意义(P均<0.05)；继发性不孕组UU DNA、CT DNA及混合感染阳性率均高于原发性不孕组，差异有统计学意义(P均<0.05)。见表1、2。

表1 观察组与对照组受检者检测结果比较[n(%)]

3 讨论

表2 原发性不孕组及继发性不孕组患者检测结果比较[n(%)]

不孕症是指1 a未采取任何避孕措施，性生活正常而没有成功妊娠，主要分为原发性不孕及继发性不孕。生殖系统感染是影响女性不孕主要因素之一，多种微生物均可引起女性生殖道感染，由于UU、CT感染症状较轻，未受到重视，易导致反复感染，严重者甚至造成不孕[5-6]。荧光定量PCR技术是一种新型检查技术，可及早检测出宫颈分泌物中UU、CT感染情况，逐渐广泛应用于临床。

UU是女性下生殖道最常见的微生物，可损害精子代谢和生理机能，影响传统卵细胞能力，导致女性不孕；同时，UU可导致输卵管黏膜的纤毛细胞脱落，影响其正常受精。CT结构独特，自身无法合成能量物质，常通过寄生宿主细胞获取三磷酸腺苷及氨基酸，传染性极高；CT于人体黏膜最常见，繁殖力强，累及宫颈柱状上皮，引起宫颈管炎，进而侵犯输卵管上皮，导致输卵管蠕动异常及阻塞造成继发不孕。UU、CT混合感染易导致输卵管炎症反应，导致宫腔阻塞，影响正常受精，破坏妊娠条件引起不孕。荧光定量PCR技术是一种新型临床检测技术，可有效检测女性UU、CT感染，本研究采用FQ-PCR技术对女性宫颈分泌物进行检查，具有以下优点。①检测简单、迅速：荧光探针具有DNA探针杂交作用，闭管操作可降低假阳性率；②通过对荧光信号进行测定，具有较高敏感度，定量范围宽且准确度高，可满足临床需要。本研究结果显示，观察组UU DNA、CT DNA及混合感染阳性率均高于对照组，差异有统计学意义(P均<0.05)；继发性不孕组UU DNA、CT DNA及混合感染阳性率均高于原发性不孕组，差异有统计学意义(P<0.05)。该结果表明UU、CT感染可能为引发不孕症发生的重要因素，通过荧光定量PC技术对不孕症患者行生殖道UU、CT进行筛查，有助于降低不孕症的发生风险。

综上所述，UU、CT感染可能是导致不孕症影响因素，临床应及早检测UU、CT及混合感染情况，有助于临床及时诊断治疗，降低不孕症的发生风险。

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