血芙蓉化学成分研究

朱昆，白凤芝，刘玉梅

（吉林大学中日联谊医院药学部，长春 130031）

血芙蓉（TeucriumviscidumBl）又名血见愁、山藿香、假紫苏、皱面草、肺形草等，为唇形科香科属植物，始载于《峨眉山药用植物调查报告》，《生草药性备要》称其为血芙蓉，《福建中草药》称其为肺形草，是民间常用的中草药[1]，主要分布于我国的江苏省、浙江省、江西省、福建省、云南省等地。其味苦，微辛，性凉，具有凉血止血、解毒消肿的功效，主治咳血、吐血、肺痈、跌打损伤、痔疮肿痛、脚癣、毒蛇咬伤及狂犬咬伤等症[2]。现代临床研究发现，血芙蓉对病毒性结膜炎还具有一定的治疗作用；以血见愁为君药，对妇女非周期性子宫出血也取得良好的临床疗效[3～5]。

目前，民间对血芙蓉的应用较为普遍，但是关于本药化学成分的研究相对较少。为了更好地开发利用血芙蓉，寻找其活性化合物，本研究对产自江苏省的血芙蓉化学成分开展了较为系统的研究，共分离鉴定出12个化合物：山奈酚（1）、山奈酚-3-O--D-吡喃葡萄糖苷（2）、山奈酚-3-O--D-吡喃葡萄糖芹糖苷（3）、山奈酚-3-O---芸香糖苷（4）、5，8-桥二氧麦角甾-6，22-双烯-3-醇（5）、6，7-二甲氧基香豆素（6）、棕榈酸--单甘油酯（7）、3，4-二羟基苯甲酸（8）、正二十六烷酸（9）、胡萝卜苷（10）、豆甾醇（11）、-谷甾醇（12），其中，化合物2、3、4、5、7、8为首次从血芙蓉中分离获得。

1 材料与方法

1.1 材料

BrukerAM-400型核磁共振仪（德国 Bruker公司）；RE-52AA旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；薄层色谱板（烟台化工研究所）；X4型显微熔点测定仪（北京泰克仪器有限公司）；全部试剂（分析纯，北京化工厂）。

血芙蓉药材采购于苏州市天灵中药饮片有限公司，经鉴定为正品血芙蓉（T.viscidum Bl）药材。

1.2 方法

取血芙蓉干燥全草药材 2kg，粉碎后用乙醇（70%）进行回流提取，提取液减压蒸馏后得到620g乙醇提取物。将提取物溶于水中，依次经氯仿、乙酸乙酯及正丁醇萃取，得3部分萃取物和水层部分。用硅胶色谱柱对乙酸乙酯萃取物（120g）进行反复分离，用氯仿-甲醇（v∶v=15∶1～1∶1）溶液梯度洗脱，再将分离得到的部分反复重结晶、制备薄层层析后得化合物 3（48mg）、4（79mg）、5（70mg）、8（110mg）、10（125mg）。用硅胶色谱柱对氯仿萃取物（70g）进行反复分离，用石油醚-乙酸乙酯（v∶v=25∶1～1∶1）溶液梯度洗脱，再将分离得到的部分反复重结晶、制备薄层层析后得化合物 1（50mg）、2（69mg）、6（100mg）、7（118mg）、9（57mg）、11（118mg）和 12（90mg）。以上所分得的化合物结构经核磁共振谱以及TLC薄层层析鉴别实验最终确定。

2 结果

化合物 1：黄色粉末（甲醇），mp226℃～228℃。盐酸镁粉反应（+），表明该化合物为黄酮类化合物。三氯化铁-铁氰化钾反应（+），表明该化合物存在酚羟基。1HNMR（500MH，CD3OD）：6.19（1H，d，H-6），6.40（1H，d，H-8），8.11（1H，d，H-2′，H-6′），6.89（1H，d，H-3′，H-5′）。13CNMR（125MH，CD3OD）:148.2（C-2），137.3（C-3），177.6（C-4），162.4（C-5），994（C-6），165.5（C-7），94.6（C-8），158.4（C-9），1 047（C-10），124.1（C-1′），130.7（C-2′），116.7（C-3′），160.6（C-4′），116.4（C-5′），131.0（C-6′）。以上理化性质和波谱数据与文献[6]报道基本一致，故鉴定该化合物为山奈酚。

化合物 2：黄色粉末（甲醇），mp185℃～186℃。该化合物不溶于水，易溶于甲醇。盐酸-镁粉反应（+）、Molish反应（+）、三氯化铁-铁氰化钾反应（+），表明该化合物中存在酚羟基。酸水解检测出D-葡萄糖，表明该化合物为黄酮苷类物质。1HNMR（500MH，CD3OD）：8.15（2H，d，H-2′，H-6′），6.92（2H，d，H-3′，H-5′），6.24（1H，d，H-6），6.47（1H，d，H-8），5.19（1H，d，Glc-H-1），3.83～3.37 为葡萄糖上的其它质子信号。13CNMR（125MH，CD3OD）:159.0（C-2），135.1（C-3），180.1（C-4），162.9（C-5），99.9（C-6），165.8（C-7），95.3（C-8），158.9（C-9），106.0（C-10），123.1（C-1′），133.0（C-2′），115.9（C-3′），160.0（C-4′），115.8（C-5′），133.0（C-6′），Glc:105.0（C-1），73.4（C-2），75.1（C-3），69.9（C-4），76.9（C-5），61.7（C-6）。上述化合物的波谱数据及理化性质特点同文献[7]的研究结果较为一致，故鉴定化合物2为山奈酚-3-O--D-吡喃葡萄糖苷。

化合物 3：黄色针晶（甲醇），mp195℃～196℃。三氯化铁-铁氰化钾反应（+），表明该化合物中存在酚羟基。盐酸-镁粉反应（+）、酸水解检出D-葡萄糖和芹糖、Molish反应（+），表明该化合物为黄酮苷类物质。1HNMR（500MH，CD3OD）：8.2（2H，d，H-2′，H-6′），6.95（2H，d，H-3′，H-5′），6.24（1H，d，H-6），6.51（1H，d，H-8），5.19（1H，d，Glc-H-1），4.56（1H，d，Api-H-1），3.86～3.29为葡萄糖和芹糖其它的质子信号。13CNMR（125MH，CD3OD）:159.4（C-2），136.5（C-3），179.6（C-4），164.1（C-5），100.9（C-6），167.0（C-7），95.7（C-8），160.4（C-9），106.1（C-10），123.0（C-1′），132.9（C-2′），116.8（C-3′），161.7（C-4′），116.6（C-5′），131.9（C-6′），Glc:105.4（C-1），73.3（C-2），76.6（C-3），70.7（C-4），78.2（C-5），65.5（C-6）。Api:101.0（C-1），73.1（C-2），79.2（C-3），74.9（C-4），61.4（C-5）。上述化合物的波谱数据及理化性质同文献[8]的研究结果较为一致，故鉴定化合物3为山奈酚-3-O--D-吡喃葡萄糖芹糖苷。

化合物4：黄色针晶（甲醇）。盐酸镁粉反应（+）、Molish反应（+），表明该化合物为黄酮苷类物质。1HNMR（500MHz，CD3OD）：6.14（1H，d，J=1.5Hz，H-6），6.33（1H，d，J=1.5Hz，H-8），8.01（1H，d，J=9.0Hz，H-2′，H-6′），6.82（1H，d，J=9.0Hz，H-3′，H-5′），5.06（1H，d，J=7.5Hz，Glu-H-1），4.46（1H，s，Rha-H-1），1.04（3H，d，J=6.5Hz，CH3）；1CNMR（125MHz，CD3OD）:158.5（C-2），135.2（C-3），179.7（C-4），162.9（C-5），100.4（C-6），166.3（C-7），95.1（C-8），159.2（C-9），105.4（C-10），123.1（C-1′），132.7（C-2′），116.2（C-3′），161.7（C-4′），116.1（C-5′），132.8（C-6′），Glc:104.2（C-1），76.1（C-2），78.2（C-3），71.6（C-4），77.7（C-5），70.1（C-6），Rha:102.5（C-1），72.3（C-2），72.1（C-3），74.0（C-4），70.1（C-5），18.1（C-6）。上述化合物的波谱数据及理化性质同文献[7]的研究结果较为一致，故鉴定化合物4为山奈酚-3-O--芸香糖苷。

化合物5：无色针晶（氯仿），mp.174℃～175℃，Liebermann-Burchard反应（+）。1HNMR（500MHz，CDC13）；6.46（1H，d，J=8.5Hz，H-7），6.21（1H，d，J=8.5Hz，H-6），5.16（1H，dd，J=15.5，7.5Hz，H-22），5.11（1H，dd，J=15.5，7.5Hz，H-23），3.91（1H，s，H-3），0.96（3H，d，J=6.5Hz，H-21），0.87（3H，d，J=6.5Hz，H-28），0.84（3H，s，H-19），0.80（3H，s，H-18），0.79（3H，d，J=7.0Hz，H-27），0.78（3H，d，J=7.5Hz，H-26）。13CNMR（125MHz，CDCl3）:136.0（C-6），136.0（C-22），133.0（C-23），131.0（C-7），82.4（C-5），80.1（C-8），66.9（C-3），56.7（C-17），51.9（C-14），51.4（C-9），44.8（C-13），43.0（C-24），40.1（C-20），39.5（C-12），37.1（C-4），36.4（C-10），34.9（C-1），33.3（C-25），30.2（C-2），28.9（C-16），23.7（C-11），21.2（C-21），20.9（C-15），19.8（C-27），19.4（C-26），18.1（C-19），18.0（C-28）和 12.6（C-18）。上述化合物的波谱数据及理化性质同文献[9]的研究结果较为一致，故鉴定该化合物5为5，8-桥二氧麦角甾-6，22-双烯-3-醇。

化合物6：无色片状晶体（甲醇），mp.136℃～137℃。紫外灯365nm下有强烈蓝色荧光。1HNMR（500MHz，CDCl3）：3.88（3H，s，6-OCH3），3.99（3H，s，7-OCH3），6.30（1H，d，J=9.4Hz，H-3），6.88（1H，s，H-8），6.89（1H，s，H-5），7.64（1H，d，J=9.4Hz，H-4）。13CNMR（125MHz，CDCl3）:161.8（C-2），112.9（C-3），142.9（C-4），109.0（C-5），149.9（C-6），152.7（C-7），99.9（C-8），145.9（C-9），111.6（C-10），56.7（6-OCH3），57.1（7-OCH3）。上述化合物的波谱数据及理化性质同文献[10]的研究结果较为一致，故鉴定化合物6为6，7-二甲氧基香豆素。

化合物7：白色粉末，mp.70℃～71℃。1HNMR（500MHz，CD3OD）：0.83（3H，t，J=7.0Hz，H-16），1.53（2H，m，H-3），2.22（2H，t，J=7.5Hz，H-2），3.44（1H，m，H-3b′），3.54（1H，m，H-3a′），3.75（1H，m，H-2′），3.99（1H，m，H-1b′），4.07（1H，m，H-1a′）为甘油醇上的氢质子信号。13CNMR（125MHz，CD3OD）:174.6（C-1），70.5（C-2′），65.7（C-1′），62.9（C-3′），34.0（C-2），31.9（C-14），13.7（C-16），22.6～29.5 为直链上的其它碳信号。上述化合物的波谱数据及理化性质同文献[11]的研究结果较为一致，故鉴定化合物7为棕榈酸--单甘油酯。

化合物8：白色针晶（甲醇），mp.195℃～198℃。三氯化铁-铁氰化钾（+），表明该化合物中存在酚羟基。1HNMR（500MH，CD3OD）：7.35（1H，brs，H-2），6.71（1H，d，J=8.0Hz，H-5），7.33（1H，dd，J=8.0，2.0Hz，H-6）。13CNMR（125MH，CD3OD），：123.7（C-1），118.0（C-2），146.3（C-3），151.7（C-4），115.9（C-5），124.0（C-6），171.1（C-7）。上述化合物的波谱数据及理化性质同文献[12]的研究结果较为一致，故鉴定化合物8为3，4-二羟基苯甲酸。

化合物9：白色固体（氯仿），该化合物易溶于氯仿，丙酮。1HNMR（500MHz，CDCl3）：2.31（2H，t，J=7.5Hz，H-2），1.62（2H，m，H-3），1.19-1.23（44H，m，4～25），0.83（3H，t，J=7.0Hz，H-26）。13CNMR（125MHz，CDCl3）：178.7（C-1），34.0（C-2），32.1（C-22），29.3～29.8（C-4～24），24.6（C-3），22.9（C-25），14.3（C-26）。上述化合物的波谱数据及理化性质同文献[13]的研究结果较为一致，故鉴定化合物9为正二十六烷酸。

化合物 10：白色粉末（甲醇），mp.291℃～292℃，该化合物易溶于吡啶，微溶于甲醇。同胡萝卜苷对照品薄层层析后的Rf值较为一致，混合后熔点未出现下降。Liebermann-Burchard反应（+），故鉴定化合物10为胡萝卜苷。

化合物11：白色针状晶体（氯仿）。该化合物难溶于水，易溶于氯仿。同豆甾醇对照品共薄层层析后的Rf值较为一致，混合后测定的熔点未见下降，故鉴定化合物11为豆甾醇。

化合物12：白色针状晶体（氯仿），mp.141℃～142℃。该化合物难溶于水，易溶于氯仿，同 -谷甾醇对照品共薄层层析后的Rf值较为一致，混合后熔点未出现下降，故鉴定化合物11为 -谷甾醇。

3 讨论

血芙蓉在民间应用比较广泛，但国内对其化学成分的研究相对较少。有国外学者从血芙蓉中分离鉴定出2种新的新克罗烷二萜类化合物[14]。为了进一步开发和扩大血芙蓉的药用资源，本研究采用色谱法对血芙蓉进行分离纯化，根据其物理化学性质及光谱数据鉴定得到 12 个化合物，其中，化合物 2、3、4、5、7和8为首次从该植物中分离得到。通过本研究，不仅为血芙蓉的实验室研究提供一定参考，更为将来血芙蓉的开发和利用提供明确依据。

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