化学发光法对免疫功能低下患儿确诊为巨细胞病毒性肺炎的临床应用价值

廖翠乐，戴洪法，米沛明，徐志威，潘杰文

（清远市妇幼保健院，广东 清远511500）

巨细胞病毒性肺炎是患者感染巨细胞病毒 （CMV）后，以被感染细胞核及胞质内形成巨大的包涵体为特征的病毒性肺炎，多数为无症状隐性感染，但在免疫功能低下的婴幼儿中表现较为严重，甚至导致死亡［1］。因此，对免疫功能低下的婴幼儿CMV感染进行早期诊断具有重要的临床意义。有研究［2］显示，CMV－PP65抗原作为CMV感染早期表达的特异性蛋白，CMV－PP65抗原阳性表达可作为CMV肺炎的临床诊断标准之一。本研究以免疫功能低下疑似巨细胞病毒性肺炎患儿为对象，应用化学发光法对患儿外周血CMV－PP65抗原进行检测，探讨化学发光法在免疫功能低下患儿巨细胞病毒性肺炎诊断中的临床应用价值，具体报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2016年1月至2017年6月间收治的100例免疫功能低下疑似巨细胞病毒性肺炎的患儿作为观察组，所有患儿临床ELISA检测血清免疫五项中IgG＜4 mg／L，患儿经CT、胸片检查符合巨细胞病毒性肺炎诊断标准［3］。其中男性56例，女性44例；年龄0～1岁，平均 （7.43±2.35）个月。另选取本院健康体检儿童100例作为对照组，其中男性57例，女性43例；年龄0～1岁，平均 （7.76±2.42）月。两组患儿的一般资料比较，差异均无统计学意义 （P＞0.05）。

1.2 检测方法

采用化学发光法对外周血多形核白细胞中CMV－PP65抗原进行检测，取儿童外周静脉血5 mL，经离心分离后获得血清，并将分离出的血清放置在－20℃的环境下保存等待检测，注意所分离的血清不要进行反复冻融，检测前对样本进行常规质控；样本检测结果S／Co≥1.0为阳性。同时应用ELISA法对所有样本血清CMV－IgG及IgM抗体进行检测［4］，作为对照分析，样本检测结果S／Co≥1.02为阳性。本研究所用的检验试剂、体外诊断试剂盒及鼠抗人CMV－PP65抗原单克隆抗体、羊抗鼠IgG单克隆抗体等均来自于郑州安图生物工程股份有限公司，检验过程所有操作步骤均严格按照使用说明书进行。

1.3 检测结果判断

取所有检测结果为阳性的儿童的血液，如果CMV－IgM阳性，则提示近期存在巨细胞病毒感染。

1.4 统计学方法

数据采用SPSS 20.0统计学软件进行分析，计数资料以率（%）表示，行χ2检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组的化学发光法CMV－PP65抗原阳性率比较

观察组的CMV－PP65抗原阳性率显著高于对照组，差异有统计学意义 （P ＜0.05）， 见表 1。

表1 两组的化学发光法阳性率结果比较 ［n（%）］

2.2 两种检测方法的阳性检出率比较

观察组中，化学发光法CMV－PP65抗原的阳性检出率显著高于ELISA法检测血清CMV－IgM抗体的阳性检出率 （χ2＝15.171， P ＝ 0.000）。 所有 100 例样本中， CMV－PP65 抗原阳性为45例，CMV－IgM抗体阳性为13例，二者均阳性为11例，阳性一致率为11.00%，阴性一致率为53.00%。见表2。

表2 CMV－PP65抗原与血清CMV－IgM抗体检测结果比较 ［n（%）］

3 讨论

巨细胞病毒 （CMV）作为临床易感染型病毒，在人群中的感染率非常高，可达90%以上，一旦感染便会终身携带［5］。CMV在免疫功能正常的感染者体内多为隐性感染，无临床感染症状，而当患者免疫功能低下时，如严重性疾病、器官移植后及新生儿等，CMV便会由潜伏状态变为活跃状态，诱发感染性疾病［6］。临床报道显示，多数婴幼儿由于免疫能力低下极易感染巨细胞病毒性肺炎，可导致患儿死亡［7］。我科每年收治大约5 000例肺炎患儿，婴幼儿占30%左右。因此，尽早诊断出CMV性肺炎感染患儿对临床治疗及预后具有重要的意义。

传统的CMV感染诊断方法以ELISA法为主，主要是通过检测感染者体内CMV－IgM抗体的形式对CMV感染进行诊断，对CMV活动性感染者具有一定的确诊价值［8］。由于感染者机体CMV－IgM抗体的出现具有较长时间的延迟，当检测结果为阳性时，患者由于感染所致的并发症已经处于较严重的状态，诊断已无实际意义。因此，临床上需要一种敏感度和特异度均较高的诊断方法。化学发光法能够对IgG和IgM抗体水平进行定量分析，并且检测全过程均由机器进行操作，避免了检测过程或检测结果因操作者本身或其他外界因素影响出现的偏差，其对IgG和IgM抗体的阳性检出率和对CMV的诊断灵敏度、特异度以及阳性预测值都比ELISA法明显更好［9－10］。临床上对于CMV性肺炎的治疗目前主要以抗病毒及增强免疫功能为主。因此对免疫功能低下的CMV性肺炎患儿在病毒感染早期进行诊断，对其临床治疗及预后具有重要的作用。本研究结果显示，化学发光法的阳性检出率明显高于ELISA法，差异有统计学意义 （P＜0.05），且敏感度及特异度均较高。

综上所述，应用化学发光法能够在巨细胞病毒感染早期快速确诊，为免疫功能低下巨细胞病毒性肺炎患儿的早期预防、诊断及治疗提供一定的依据，有利于改善患儿预后。

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