滇产前胡的化学成分研究

　　　　　

1.广州白云山汉方现代药业有限公司/中药提取分离过程现代化国家工程中心，广东　广州　510240； 2.昆明医科大学药学院暨重点实验室，云南　昆明　650500 3.昆明医科大学第一附属医院，云南　昆明　650032；

前胡为伞形科(Umbelliferae)白花前胡 (PeucedanumpraeruptorumDunn)干燥根，苦、辛，微寒，归肺经。用于痰热喘满，咯痰黄稠，风热咳嗽痰多[1]。在云南有8个属约20种植物作为前胡使用，其中短片藁本、羽胞藁本、美脉藁本、云前胡、亮蛇床、二色棱子芹是各地区长期习惯使用[2]。《滇南本草》所记载云南地产前胡的功效与《本草纲目》记载一致，为味辛，性寒，阴中阳也，解散伤风伤寒发汗要药，升降肝气，止咳嗽，明目退翳，除内外之痰，有推陈出新之功[3]。前胡根部主要含香豆素化合物，其具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等活性[4-5]。实验对产自云南中药前胡的化学成分进行了提取分离、鉴定。从其甲醇提取物分离得到3个化合物，分别鉴定为白当归素 (byakangelicin，1)[6]、氧化前胡素 (oxypeucedamin，2)[7]和2,3-二甲氧基苯甲酸 (2,3-dimethoxy-benzoic acid，3)[8]。

1　材料与方法

1.1仪器Bruker AM-400型、DRX-500型核磁共振仪(Bruker 公司)，TMS作为内标，为ppm，J为Hz。

1.2材料薄层色谱GF254、柱色谱硅胶(100～200目和200～300目)均为青岛海洋化工厂生产；反相填充材料RP-18(Merk公司，40～60(m)；MCI树脂(Mitsubishi Chemical公司)；Sephadex LH-20柱色谱填料(Merk公司)。药材于2014年9月购买于云南菊花村药材市场，由昆明医科大学唐丽萍博士鉴定为前胡(PeucedanumpraeruptorumDunn)。

2　方法与结果

2.1前胡化学成分的提取分离前胡的干燥根部6.0 kg，经过粉碎后用甲醇溶液重复提取4次(每次10升，室温浸泡24 h)，合并甲醇提取液，过滤，浓缩得浸膏317.2 g。浸膏分散于1.5 L水中，用乙酸乙酯萃取数次，蒸干乙酸乙酯得浸膏165.0g，加等量硅胶(80～100目)拌样后以1.0 kg硅胶(200～300目)柱层析，氯仿/丙酮溶剂梯度洗脱(1∶0-0∶1)，TLC检测，合并相同馏分，得馏分段7部分。分别为A(氯仿部分)， B(9∶1)，C(8∶2)，D(7∶3)，E(6∶4)，F(5∶5)，G(丙酮部分)。B部分称重25.0 g，用50.0 g硅胶(80-100目)拌样，用石油醚：丙酮(10∶1, 5∶1, 3∶1, 1∶1)进行梯度洗脱得三部分B1，B2，B3。B1经Sephadex LH-20凝胶柱层析及反复重结晶获得化合物2 (5.0 mg)和3 (3.0 mg)。C部分称重21.0 g，用石油醚：异丙醇(8∶1, 4∶1, 2∶1, 1∶1)进行梯度洗脱得四部分C1，C2，C3， C4。C2经过反复重结晶获得化合物1 (3.0 mg)。

2.2化合物的理化数据白当归素 (Byakangelicin，1)：C17H18O7；1H-NMR (CDCl3，600Hz) δ：1.26 (3H，s，H-4″), 1.30 (3H，s，H-5″), 3.81 (1H，dd，J=7.8，2.4Hz，H-2″), 4.18 (3H，s，5-OCH3), 4.24 (1H，dd，J=10.2，7.8Hz，H-1″b), 4.58 (1H，dd，J=10.2，2.4Hz，H-1″a), 6.28 (1H，d，J=9.6Hz，H-3), 7.01 (1H，d，J=2.4Hz，H-3′), 7.62 (1H，d，J=1.8Hz，H-2′), 8.12 (1H，d，J=10.2Hz，H-4)；13C-NMR (CDCl3，150Hz) δ：25.2 (q，C-4″), 26.9 (q，C-5″), 60.9 (q，5-OCH3), 71.7 (s，C-3″), 76.1 (d，C-2″), 76.3 (t，C-1″), 105.6 (d，C-3′), 107.7 (s，C-10), 113.1 (d，C-3), 114.7 (s，C-6), 127.0 (s，C-8), 140.0 (d，C-4), 144.2 (s，C-5), 145.1 (s，C-9), 145.5 (d，C-2′), 150.4 (s，C-7), 160.4 (s，C-2)。以上数据与文献[6]对照一致。

氧化前胡素 (Oxypeucedamin, 2)：C16H14O5；1H-NMR (CDCl3，600Hz) δ：1.41 (3H，s，H-4″), 1.48 (3H，s，H-5″), 3.31 (1H，dd，J=6.6，4.2Hz，H-2″), 4.50 (1H，dd，J=10.8，6.6Hz，H-1″b), 4.67 (1H，dd，J=10.8，4.2Hz，H-1″a), 6.37 (1H，d，J=10.2Hz，H-3), 7.02 (1H，d，J=2.4Hz，H-3′), 7.24 (1H，s，H-8), 7.68 (1H，d，J=2.4Hz，H-2′), 8.27 (1H，d，J=9.6Hz，H-4);13C-NMR (CDCl3，150Hz) δ：19.2 (q，C-4″), 24.8 (q，C-5″), 58.6 (s，C-3″), 61.3 (d，C-2″), 72.4 (t，C-1″), 94.9 (d，C-8), 104.7 (d，C-3′), 107.5 (s，C-10), 113.2 (d，C-3), 114.2 (s，C-6), 139.3 (d，C-4), 145.5 (d，C-2′), 148.5 (s，C-5), 152.6 (s，C-9), 158.2 (s，C-7), 161.3 (s，C-2)。以上数据与文献[7]对照一致。

2,3-二甲氧基苯甲酸(2,3-Dimethoxy-benzoic acid，3)：C9H10O4；1H-NMR (CDCl3，600Hz) δ：3.93 (3H，s，3-OCH3), 3.94 (3H，s，2-OCH3), 6.91 (1H，d，J=5.6Hz，H-5), 7.58 (1H，d，J=1.6Hz，H-4), 7.76 (1H，dd，J=1.4，5.4Hz，H-6)；13C-NMR (CDCl3，150Hz) δ：56.2 (q，3-OCH3), 56.3 (q，2-OCH3), 110.4 (d，C-4), 112.4 (d，C-5), 121.8 (s，C-1), 124.8 (d，C-6), 148.8 (s，C-3), 153.9 (s，C-2), 172.0 (s，-COOH)。以上数据与文献[8]对照一致。

3　讨论

通过对滇产中药前胡化学成分的研究发现，其根部主要成分为香豆素类化合物，其中线型呋喃香豆素化合物氧化前胡素(Oxypeucedamin)，具有明显抗HIV作用，治疗指数TI为8.48[9]。该研究为滇产中药前胡进一步的化学成分及生物活性研究提供了理论基础。

[1]国家药典委员会. 中华人民共和国药典(一部)[M]. 北京: 中国医药科技出版社，2010: 248.

[2]饶高雄，吴帆，刘启新，等. 云南药用前胡品种调查[J]. 中药材，1996, 19(4): 177-179.

[3]兰茂(明). 滇南本草(第三卷) [M]. 昆明：云南人民出版社，1978: 170.

[4]吴霞，毕赢，王一涛. 前胡化学成分及药理作用的研究进展[J]. 食品与药品，2010, 12(11): 442-445.

[5]程果，徐国兵. 香豆素类化合物的药理作用研究进展[J]. 中成药，2013, 36(6)：1288-1291.

[6]卢嘉，金丽，金永生，等．中药杭白芷化学成分的研究[J]. 第二军医大学学报，2007, 28(3): 294-298．.

[7]赵爱红，杨秀伟. 兴安白芷脂溶性部位中新的天然产物[J]. 中草药，2014, 45(13): 1820-1828.

[8]Auerbach J, Weissman S.A, Blacklock T.J, et al. N-Bromosuccinimide/dibromodimethylhydantion in aqueous base: a practical method for the bromination of activated benzoic acids[J]. Tetrahedron Letters, 1993(34): 931-934.

[9]Zhou P, Takaishi Y, Duan H, et al. Coumarins and bicoumarin from Frula sumbul: anti-HIV activity and inhibition of cytokine release [J]. Phytochemistry, 2000, 53(6): 689-697.